摘要：目的:考察不同因素对红花随机扩增多态性DNA反应体系的影响,建立并优化反应体系。方法:提取红花基因组DNA,分别设计Taq酶浓度(三水平:0.02、0.04、0.06 U/μL)、dNTP浓度(三水平:0.10、0.20、0.30 mmol/L)和引物(primer)浓度(三水平:0.16、0.32、0.48 pmol/L)的三因素实验,进行PCR扩增。根据PCR产物的琼脂糖凝胶电泳图确定最优的Taq酶浓度、dNTP浓度和引物浓度。进一步设计Mg2+浓度(三水平:1.0、1.5、2.0 mmol/L)和模板浓度(四水平:1.00、1.25、1.50、1.75 mg/L)的两因素实验,进行PCR扩增,确定最佳Mg2+浓度和模板浓度。结果:三因素实验中,第17条组合泳道和两因素实验中第6条组合泳道扩增主带稳定、均匀、清晰,条带数目多。结论:确定红花随机扩增多态性DNA反应25μL反应体系中最佳组合为:Taq酶0.04 U/μL、dNTP 0.30 mmol/L、引物0.32 pmol/L、Mg2+1.5 mmol/L、模板浓度1.00 mg/L。

摘要：目的研究果糖二磷酸钠片在健康中国人体内的药动学特征。方法采用自身交叉对照的试验设计方法,将6名健康男性受试者随机分为两组,交叉单剂量口服3g安慰剂和果糖二磷酸钠片,建立固体复合酶活力测定方法以测定人血浆中果糖二磷酸的药物浓度。进行果糖二磷酸钠的临床药动学研究。结果本方法的标准曲线方程为：R=0.000 741C-0.000 73（r=0.998）。血浆中果糖二磷酸钠浓度在4.94~78.97μg/mL范围内与果糖二磷酸钠的吸光度差值ΔA’具有良好的线性关系。高、中、低浓度血浆样品的方法回收率分别为（100.08±2.67）%、（99.79±8.14）%、（95.14±8.09）%,提取回收率分别为（93.19±2.49）%、（96.15±7.84）%、（91.80±7.81）%,在室温和冰冻条件（-20℃）下相对标准偏差（RSD）值均在10%以内。单剂量口服3g果糖二磷酸钠片后6名受试者血浆果糖二磷酸浓度无明显峰值,浓度在（60.38±18.19）μg/mL至（71.81±7.65）μg/mL范围内波动;服用等量安慰剂后,6名受试者平均血浆果糖二磷酸浓度在（52.76±17.82）μg/mL至（73.42±9.28）μg/mL之间波动。结论单剂量口服3g果糖二磷酸钠片后其血药浓度较服用等量安慰剂后无明显升高,可能需要加大口服给药剂量。