摘要：蛇毒中C类凝集素 (C TLs)超家族蛋白 ,是具有抗凝血等功能的一族蛋白质 .根据测得的蛇毒蛋白的N端氨基酸序列 ,设计PCR引物 ;从湖南尖吻蝮蛇毒腺中提取总RNA ,经反转录 ,再通过温度降落锚式PCR ,在只使用一个特异性引物和一个通用引物、进行一次循环数不超过 30的非巢式反应的条件下 ,即获得两个较为清晰的扩增条带 ;其中之一带经克隆、测序、比较 ,证明其与已知的蛇毒中C类凝集素超家族蛋白质有较高的同源性 .在大肠杆菌中获得高效融合表达 ,融合蛋白占细胞总蛋白的 2 6 %～ 30 %

摘要：目的　分析戊型肝炎病毒 (HEV)Ⅳ型的全基因序列以比较与其他基因型的差异。方法　设计PCR引物对全基因进行分片段扩增 ,并对两个末端采用末端快速扩增方法 (RACE)进行扩增 ,对扩增产物进行克隆及测序。结果　HEV T1全序与Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型的核苷酸同源性分别为(74.8～ 75 .5 ) %、74.5 %和 (75 .3～ 76 .3) %。ORF1与已报道的Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型氨基酸同源性分别为(85 .0～ 86 .7) %、85 .0 %和 (88.5～ 88.7) % ;ORF2与已报道的Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型的氨基酸同源性分别为 (91.6～ 92 .4) %、90 .1%和 (91.9～ 93.0 ) % ;ORF3与已报道的Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型的氨基酸同源性分别为 (75 .9～ 77.8) %、75 .0 %和 (79.6～ 83.3) %。结论　这一研究为今后发展戊型肝炎诊断试剂及戊型肝炎疫苗提供了新的、重要的分子生物学基础。

摘要：为克隆尖吻蝮蛇C型凝集素类蛋白基因至表达载体pBV2 2 0 ,在该载体的多克隆位点上选择适当的酶切位点 ,设计PCR引物 :在目的基因上、下游引物的 5′ 端分别加上对应于载体的粘性末端序列 ,建立两个单独反应体系 ,每个反应体系中只加入一种引物 ,用PfuDNA聚合酶催化模板DNA单链扩增 ;将所得的两种单链产物在适当条件下进行复性后直接与经过酶切的载体DNA连接 ,并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,获得足够数量的转化子 .经PCR鉴定单菌落中有目标DNA片段插入 ,测序表明克隆连接正确 .该方法以其简捷性和有效性 。

摘要：目的探索中国株庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因的变异。方法采用ＨＧＶ中国株５’非编码区序列设计引物、逆转录套式聚合酶链反应法，检测中国不同地区血清中的ＨＧＶＲＮＡ，７份阳性产物采用ＡＢＩＰｒｉｓｍ３７７ＤＮＡ自动测序仪进行序列测定。结果测定的２ｌ３个碱基中，７株中国ＨＧＶ分离株与非洲株ＧＢＶＣ（ｕ３６３８０）序列同源性分别为８８．２６％、８５．９２％、８８．２６％、８５．４５％、８６．８５％、８５９２％和８８．２６％，与美国株ＨＧＶ（ｕ４４４０２）序列同源性分别为９２．０２％、８６．８５％、８６．６７％、８９．２０％、８９６７％、８９．６７％和９ｌ．５５％，而中国ＨＧＶ分离株间的同源性均高于９２．０２％。

摘要：目的　为阐明TT病毒(TTV)流行病学特征和基因组异质性以及为血清学诊断试剂的研制提供资料。方法　从健康查体者的血清中提取DNA,设计一套引物,采用套式聚合酶链反应(nestedPCR),检测TTV,对其中7例阳性标本进行了克隆测序,并与2株日本株TTV的核苷酸序列作了比较。结果　111例正常人中TTV的感染率为126%。7株中国株TTV间的核苷酸同源性为906%～954%,与日本株TX011(O)的核苷酸同源性930%～950%,而与日本株TA278同源性则在729%～747%之间。所推测的7株中国株TTV间氨基酸同源性为819%～994%,与日本株TX011(O)氨基酸同源性为855%～886%,而与日本株TA278氨基酸的同源性仅为681%～717%。结论　正常人群中TTV的携带率比较高。7株中国株TTV变异相对较小,同源性比较高,与日本株TX011(O)属于同一基因型。氨基酸的变异大于核苷酸变异。

摘要：目的试图比较简并引物扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＮＳ３变异较大的区域的作用。方法设计了简并引物和减温（ｔｏｕｃｈｄｏｗｎ）ＰＣＲ扩增程序以对目的基因进行扩增，并对阳性ＰＣＲ产物进行克隆及测序。结果该方法能够检测基因变异约达２１％的区域。结论提示该法是一项有效的了解基因家系的技术。

摘要：目的 对职业供血员进行TTV检测。方法 于TTV基因组保守区设计一套检测引物,用套式聚合酶链反应检测TTV DNA。结果 111例普通人群对照检出14例(13％)TTV DNA阳性,221例职业供血员检出45例(20％)TTV DNA阳性。结论 在我国的普通人群和职业供血员中较高的TTV流行率。