摘要：目的:利用细菌内同源重组法构建含人肿瘤特异性抗原的腺病毒质粒。方法:设计NY-ESO-1 cDNA扩增引物,从pET15b-NY-ESO-1质粒中扩增NY-ESO-1的DNA序列,与pShuttle-IRES-hrGFP-2进行连接,PCR和EcoRⅤ酶切鉴定重组质粒pShuttle-NY-ESO-1-EGFP,经Pm eⅠ酶切线性化后,转化含pAdeasy-1的超感受态B J5183大肠杆菌,细菌内同源重组法构建腺病毒质粒pAd-NY-ESO-1-EGFP;质粒经PacⅠ酶切鉴定,DNA测序。结果:线性化的pShuttle-NY-ESO-1-EGFP转化含pAdeasy-1的超感受态B J5183大肠杆菌,重组质粒经酶切获得一大于23 kb的大片段和4.5 kb的片段,PCR反应扩增出了340 bp的片段。结论:用细菌内同源重组法成功地构建了含NY-ESO-1的重组腺病毒质粒,为进行表达NY-ESO-1的重组腺病毒的制备及肿瘤特异性抗原NY-ESO-1的核酸疫苗在肿瘤方面的研究奠定了基础。

摘要：基于既有研究成果在对混凝土轨枕裂纹检测效率不足的基础上,提出一种改进算法YOLOv5+,主要以YOLOv5网络模型为基础,对混凝土轨枕裂纹进行高效检测。首先,采用分治标签的策略来增大裂纹在标签中的实际占比,从而解决混凝土轨枕裂纹尺度变化大的问题,使网络更利于提取有效特征;其次,将YOLOv5网络结构中SPP模块的最大池化层改为平均池化层,减少裂纹漏检的现象;同时,在YOLOv5骨干网络中嵌入SE注意力模块(Squeeze and Excitation,SE)提高对细小裂纹的检测能力;最后,结合新的检测尺度与特征融合网络,降低微小裂纹的漏检现象。实验结果表明,以YOLOv5网络模型为基础的改进算法YOLOv5+,除了召回率Recall变化不大外,精确率Precision提高6.5%,平均精度均值mAP提升8%,帧率FPS也有所提升,能够满足实时性的检测需求。