摘要：【目的】探明黑麦草与紫云英不同比例混播方式下茶园杂草发生及群落结构的变化,为以草抑草生物控草技术在生产上的应用提供科学依据。【方法】采用随机区组试验设计方法,研究单播黑麦草(T_(1))、单播紫云英(T_(2))、黑麦草与紫云英3∶7混播(T_(3))、黑麦草与紫云英1∶1混播(T_(4))、黑麦草与紫云英1∶2混合后条播(T_(5))和黑麦草与紫云英1∶1混合后条播(T_(6))对茶园杂草发生的影响。【结果】不同处理土壤杂草种子的平均密度为968.52~1438.69粒/m^(2),共发生9种杂草,分属禾本科(3种)、蓼科(2种)、菊科(2种)、苋科(1种)和石竹科(1种);不同处理土壤杂草均一度、密度和频率存在差异,均一度,各处理禾本科的千金子、看麦娘和稗草分别为14.88%~73.66%、24.78%~68.33%和25.67%~51.74%,均以T_(1)最大;蓼科的酸模和辣蓼分别为5.75%~15.65%和14.62%~21.54%,均以T_(1)最大;菊科的小飞蓬和辣子草分别为11.64%~24.42%和14.33%~23.87%,分别以T_(1)和T_(2)最大;苋科的空心莲子为11.87%~21.75%,以T_(2)最大;石竹科的牛繁缕为4.75%~17.63%,以T_(1)最大。密度,各处理禾本科的千金子、看麦娘和稗草分别为0.84~8.62株/m^(2)、1.08~7.29株/m^(2)和1.13~3.94株/m^(2),均以T_(1)最大;蓼科的酸模和辣蓼分别为0.45~2.23株/m^(2)和1.22~3.39株/m^(2),均以T_(1)最大;菊科的小飞蓬和辣子草分别为0.64~4.56株/m^(2)和1.22~3.52株/m^(2),分别以T_(1)和T_(2)最大;苋科的空心莲子为0.64~2.40株/m^(2),以T_(2)最大;石竹科的牛繁缕为0.34~1.37株/m^(2),以T_(6)最大。频率,各处理禾本科的千金子、看麦娘和稗草分别为56.34%~100.00%、35.74%~100.00%和27.02%~94.53%,分别以T_(1)和T_(2)最大;蓼科的酸模和辣蓼分别为10.76%~53.44%和29.29%~81.45%,均以T_(1)最大;菊科的小飞蓬和辣子草分别为15.37%~100.00%和29.28%~84.51%,分别以T_(1)和T_(2)最大;苋科的空心莲子为29.29%~57.69%,以T_(2)最大;石竹科的牛繁缕为29.31%~36.13%,以T_(4)最大。【结论】黑麦草与紫云英1∶1混播(T_(4))田间杂草的均一度、密度和频率均最低,其对杂草的抑制效果最好,可在当地及类似地区茶园推广应用。

摘要：应用等离子体增强化学气相淀积(PECVD)法制备SiO_2薄膜,并用折射率来表征致密性。研究了SiO_2薄膜致密性与射频(RF)功率、基板温度、腔内压强、N_2O/SiH_4流量比的关系。通过Filmetrics薄膜测厚仪F20测量了薄膜的折射率,用聚焦离子束扫描电镜(FIB-SEM)测量了表面微结构。利用能量弥散X射线(EDX)分析薄膜中Si、O、N元素含量随工艺参数变化对致密性的影响。进行多因子实验设计(DOE),得出了各种条件下最优的折射率与结构的生长条件,并研究了SiO_2薄膜致密性随工艺条件变化的机理。

摘要：【目的】分析不同品种羊Toll样受体(TLRs)基因转录水平的差异性,为揭示TLRs基因转录水平与羊疫病间的关联性提供参考依据。【方法】选取贵州省主要饲养的贵州黑山羊、贵州白山羊、黔北麻羊、波尔山羊和湖羊为研究对象,根据GenBank已公布的TLRs基因序列设计荧光定量PCR特异性扩增引物及TaqMan探针引物,利用TaqMan探针荧光定量PCR检测不同品种羊血液和肺脏中TLR1~TLR10基因转录水平差异。【结果】TLR1~TLR10基因在不同品种羊血液和肺脏中均有转录表达。不同品种羊血液和肺脏中的TLRs基因转录水平均存在差异性,在波尔山羊血液中TLR2、TLR4和TLR5基因转录水平均极显著低于其他4种羊(P<0.01,下同),TLR7和TLR8基因转录水平则极显著低于除黑山羊外的其他3种羊;在白山羊血液中TLR4、TLR7、TLR8和TLR9基因转录水平极显著高于其他4种羊;在湖羊肺脏中TLR2、TLR3、TLR4、TLR5和TLR8基因转录水平极显著低于其他4种羊,而在黔北麻羊肺脏中TLR5和TLR8基因转录水平极显著高于其他4种羊。此外,在5种羊血液中TLR2、TLR4、TLR7和TLR8基因转录水平均极显著高于其他TLRs基因转录水平;羊肺脏中TLR2、TLR3、TLR4、TLR5和TLR8基因转录水平相对较高,在贵州白山羊、贵州黑山羊和波尔山羊均表现为极显著高于其他TLRs基因转录水平。【结论】不同品种羊血液和肺脏中TLRs基因转录水平具有差异性,以TLR2、TLR3、TLR4、TLR5和TLR8基因转录水平相对较高,提示TLRs在不同品种羊机体中发挥着清除病原体及维持机体稳态的作用,而TLRs基因转录水平差异可能是造成不同品种羊对疫病易感差异的原因之一。

摘要：为了建立一种适用于猪轮状病毒(PoRV)的逆转录-环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)的快速、灵敏检测方法。依据GenBank上登录的PoRV VP7基因保守序列,设计了6条特异性引物,通过对外引物与内引物浓度比、Bst DNA聚合酶浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度和反应条件等进行优化。结果显示,当外引物与内引物浓度比为200nmol/L∶2 400nmol/L(1∶12)、Bst DNA聚合酶浓度为0.64 U/μL、Mg2+浓度为2.5 mmol/L、dNTP浓度为1.0mmol/L,在恒温(60℃)条件下作用60min,扩增效果出现明显"梯状"条带,同时对建立的RT-LAMP检测方法进行特异性和敏感性验证,其只有PoRV获得特异性扩增条带,与其他猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒等无交叉反应,具有良好的特异性,最低检测分子拷贝数为1.0×102拷贝/μL,具有极高的敏感性。反应结束后肉眼可见阳性扩增产物出现白色沉淀,加入SYBR GreenⅠ观察颜色变化可以判定结果。该方法适用于野外、基层部门和海关快速检测PoRV的新方法,在临床上有良好的推广意义。

摘要：为研究绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)侵害山羊的组织嗜性、筛选其最佳培养基及建立快速检测方法,针对Mo16SrRNA基因设计特异性引物FQs/FQa,以Mo Y98株16SrRNA基因重组质粒pMD19-MoFQ为模板,通过优化反应体系构建标准曲线,建立可定量检测Mo 16SrRNA基因的FQ-PCR方法,并对所建方法进行重复性、特异性、敏感性及应用性检测。结果表明,所建Mo 16SrRNA基因检测FQ-PCR方法具有较好的重复性、特异性、临床应用性,Mo核酸拷贝最低检出量可至10μL-1。该方法不仅可作为Mo临床检测方法,且为后续Mo研究工作提供技术支持。

摘要：文章介绍了贵州省畜禽屠宰行业的发展现状,系统分析存在的问题与困难,并提出进一步健全法律法规、强化顶层设计,加强监督执法、严格定点屠宰,严格企业监管、促进规范发展,推动转型升级、提升整体水平的对策建议,以期推动贵州省屠宰行业转型升级,助力生态畜牧业高质量发展,助推乡村振兴战略实施。

摘要：针对绵羊肺炎支原体(Mo)16SrRNA基因设计4条环介导等温扩增(LAMP)引物,通过优化反应条件与体系,建立了Mo检测LAMP方法,并对其进行特异性、敏感性及临床应用性检测。结果显示,于60℃保温60min即可最优化检测Mo,且所建方法仅能特异扩增Mo,最低检出分子拷贝数为1.0×102copies/μL,具有良好的特异性和敏感性。对4份已知阳性病料进行LAMP检测均为阳性,表明所建LAMP可初步应用于临床检测,为羊Mo感染病例诊断提供了新方法。

摘要：为了解猪轮状病毒（PoRV）贵州株NSP4基因的序列特征，试验根据GenBank上公布的猪轮状病毒NSP4基因序列设计1对特异性引物，扩增一株猪轮状病毒贵州流行株NSP4基因序列并进行序列测定及分析。结果表明：得到的碱基序列（562bp）与预期结果相符，包含NSP4基因528bp的开放阅读框，编码175aa；与已知的14个国内外参考毒株NSP4核苷酸和推导氨基酸序列比较，同源性分别为89．1％～94．1％和95．4％～98．3％；氨基酸系统进化树结果显示，贵州流行株与国内流行株LL36755亲缘关系较近。说明试验成功克隆了PoRV贵州株NSP4基因，获得了其序列，并分析了其序列特征。

摘要：为了解贵州省猪轮状病毒（PoRV）VP7蛋白的结构及功能,根据Gen Bank发表的猪轮状病毒VP7基因序列设计1对特异性引物,扩增1株猪轮状病毒贵州流行株VP7基因全序列并进行序列测定及生物信息学分析。结果显示：VP7基因全长为1 062 bp,包含一个981 bp的开放发阅读框,编码326个氨基酸,氨基酸突变主要发生在高变区。与已知的14个国内外参考毒株VP7核苷酸和推导的氨基酸序列比较,同源性分别为71.5%-97.0%和72.4%-98.7%,与G4型毒株核苷酸同源性及推导的氨基酸同源性分别为86.6%-97.0%和92.9%-98.7%。核苷酸系统进化树结果显示,贵州流行株与G4型毒株CMP070/09属同一个分支,因此推测贵州流行株为G4型猪轮状病毒。预测PoRV VP7蛋白理论相对分子质量为37.2 ku,等电点为4.75,半衰期为30 h,不稳定系数为31.22;跨膜结构及信号肽分析表明VP7蛋白有2个跨膜区,无信号肽区域;抗原表位预测显示VP7蛋白在第69-104、145-150、176-183、210-224、311-321位及其附近肽段可能为其优势抗原表位;结构预测显示,VP7蛋白存在1个N-糖基化作用位点、14个磷酸化位点,不存在O-糖基化位点。

摘要：为成功表达PRRSV GZJL株GP5蛋白,本研究设计合成一对引物,并以PCR方法从阳性重组质粒pMD18-T-GP5中扩增得到PRRSV GZJL株GP5基因片段中的79-600 bp即dGP5。将dGP5基因连接至原核表达载体pET-32a（＋）,并转化入表达菌株BL21（DE3）。经PCR、双酶切和测序鉴定,阳性菌株进行IPTG诱导表达,纯化的融合蛋白His-dGP5应用SDS-PAGE和Western-blotting方法进行分析,结果表明,本研究成功构建了原核表达菌株,其所表达的融合蛋白His-dGP5的分子量约为40.2 kDa且可被PRRSV阳性血清所识别。这为进一步研究PRRSV新型基因工程疫苗和诊断试剂奠定了基础。