摘要：β地中海贫血密码子41～42(—4bp)突变的杂合子经PCR体外扩增后,聚丙烯酰胺凝胶电泳除显示预定扩增片段外,还显示由DNA异源双链组成的额外双带,据此设计出简单的识别β41～42突变纯合子、杂合子及相应的正常个体的方法,并成功地应用于产前断诊。

摘要：设计了5种针对中国人常见β-地贫突变的单碱基错配引物,即在引物的3′端附近引入一个与模板错配的碱基。用此引物进行多聚酶链式反应,可使扩增产物中创造出能区别正常和突变β-珠蛋白等位基因的限制性酶切位点,藉此人工限制性片段长度多态性即可确诊样品的基因型。用此法分析了45例β-地贫DNA样品,并完成13个β-地贫高风险胎儿的产前诊断,其结果与ASO探针杂交法一致。

摘要：PCR(polymerase chain reaction)已作为分子生物学研究中的基本技术得到广泛应用。近年来,以PCR为基础发展起来的检测基因突变的新技术,设计先进、操作省时、方便,比传统的分子杂交分析法更具有实用性。且已在遗传病的基因诊断的应用中显示出巨大的潜力。本文就运用这些方法检测基因突变的基本原理及方法学加以综述。

摘要：东南亚型缺失突变(—SEA/)是我国α-地中海贫血的常见类型,其纯合子为致命的Bart′s胎儿水肿综合征。本文通过设计位于该突变基因断裂点两侧的3个引物,构成两对独立的PCR体系来鉴别样品基因型。样品DNA中有—SEA/突变时,扩增产生630bp左右的DNA片段,无此突变则出现224bp的扩增片段。经过对5例正常、6例—SEA杂合子和3例Bart′s水肿胎儿DNA的检测,证明本法能准确区分上述3种基因型。我们还将本法应用于一个HbQ复合HbH家系的基因分析和产前诊断,结合脐血电泳分析和Southern blotting结果,确定胎儿的基因型为(α α/-αHbQ)。本法简便快速,为α-地贫携带者的检测及产前诊断提供了一个有用手段。

摘要：β地贫是一种分子病理具有高度异质性的、我国南方最为常见的遗传性血液病.在已发现的23种β地贫突变中,CD41-42(-TCTT)移码突变基因频率最高(达41.6%).根据PCR原理和该突变的特点,作者设计了一对引物进行PCR特异扩增,电泳分析即可检出此种突变.并引进基因释放剂DNA模板快速制备法,从而使此技术更为简便和实用.作者运用此法检测了广东珠海地区114份β地贫样品,CD41-42突变捡出率为40.35%,并成功地应用于产前诊断中.根据实验结果,作者建议在分析未知β地贫突变时,首先采用本法先对CD41-42突变进行初筛,而将RDB和ASO技术作为补充.