摘要：针对微生物酶制剂中残留转基因微生物的检测问题,根据醇氧化酶-1(AOX1)启动子基因的序列信息设计一对引物及一条MGB探针,建立了转基因微生物的实时荧光PCR筛选检测方法。实验结果表明,该方法灵敏度达到1pg,可以准确判定生产线上不同分离阶段的微生物酶制剂中的转基因微生物残留情况。该方法准确度和灵敏度高,操作方便,可作为微生物酶制剂中转基因微生物分离状况的监测方法,也可为其他转基因微生物检测研究提供借鉴和参考。

摘要：面对肉制品掺假突发事件频发的现状,对动物源性成分快检方法需求迫切。在等温扩增方法基础上,开展了肉制品掺假鉴定方法研究。以猪、鸡、鸭线粒体细胞色素b基因为目的序列,采用软件Primer Explorer Version5,通过序列比对设计并筛选环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)的特异性扩增引物。通过反应体系优化建立猪、鸡、鸭源性成分的环介导等温扩增技术分析方法,对常见9种动物源性成分进行特异性分析,检出限达到0.001 ng/μL,高浓度牛、羊DNA不影响方法检出限。通过分析模板脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid, DNA)浓度与反应循环数的关系,建立牛羊肉产品中,阈值为1%的猪、鸡、鸭掺杂成分的LAMP快速检测方法,分析时间36 min。采用该方法对深加工模拟掺杂肉样本分析结果与现行国家标准方法结果一致。研究可为肉制品原材料、市售生鲜肉及加工肉制品的肉成分快速筛查提供解决途径。

摘要：通过对Lactobacillus paracasei种内的20株菌的全基因组序列进行了单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点分析,并结合糖代谢途径预测,序列比对,得到了分辨力可达菌株水平且遗传相对稳定的N1115菌株特异性位点。针对特异性位点所设计的N1115菌株特异性荧光定量PCR扩增引物及探针组,在51株常见益生菌株间具有特异性,所选特异性位点传代8代比较稳定,针对菌粉所建DNA提取方法的定量检出限为10^(3)~10^(9)CFU/mL,其间的线性拟合度较好(R2>0.98)。采用已知浓度标准菌粉做标准曲线可以对未知菌含量样品进行准确定量。

摘要：目的建立同时检测单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)及其3种毒力因子的多重荧光PCR快速检测方法,并应用于日常食品的检测。方法根据单增李斯特菌溶血素基因hly A、内化素基因inl A和表面蛋白act A基因的保守序列,分别设计合成特异性引物和探针,优化多重荧光PCR反应体系。对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果该法特异性强、敏感性高,对单增李斯特菌纯培养物的最低检出限410cfu/m L;重复性好,变异系数均小于2%。对84份食品检测结果与传统国标法相符,共检出单增李斯特菌4份,检出率为4.76%。多重荧光PCR检测方法耗时1 h,比传统方法节约2~5 d。4株单增李斯特菌分离株中2株同时含有inl A、act A、hly A 3种毒力基因,另2株为毒力基因act A缺失株,提示目前流行株并非同一来源。结论本研究建立的多重实时荧光PCR方法能同时对单增李斯特菌及其3种毒力因子进行快速检测,且灵敏度高、特异性好,为食源性疾病的病原学检测提供了快速可靠的方法。

摘要：目的了解北京市丰台区社区卫生服务中心医务人员流感疫苗接种现状、推荐意愿及影响因素,为提高该人群流感疫苗接种率提供依据。方法采用自行设计的问卷,对北京市丰台区23家社区卫生服务中心的医务人员和公卫科负责人分别进行调查和访谈。了解流感及流感疫苗的认知情况、2018—2019年度流感疫苗接种现状和推荐意愿、医务人员接种流感疫苗的相关政策等内容,采用非条件多因素logistic回归分析流感疫苗接种现状和推荐意愿的影响因素。结果共回收有效问卷1359份,应答率平均为58.48%(1359/2324),2018—2019年流感疫苗调整权重后接种率为32.81%,推荐率为79.76%(1084/1359)。公共卫生等科室、知晓疫苗效果、知晓疫苗接种时间、知晓医务人员是我国推荐优先接种流感疫苗的人群、单位免费提供等因素促进流感疫苗接种。年龄较大、医师和护士等岗位、既往接种流感疫苗、流感及流感疫苗知识得分高等因素促进流感疫苗推荐意愿。78.26%(18/23)受访者认为流感疫苗接种率不高的原因主要是流感疫苗未免费。91.30%(22/23)受访者建议加强流感和流感疫苗知识宣传以提高流感疫苗接种率。结论丰台区社区卫生服务中心医务人员流感疫苗接种率较低,推荐率较高,为医务人员免费提供疫苗并针对性开展宣传教育是提高该人群流感疫苗接种率的关键。