摘要：目的比较双层叠帐法、人帐诱法和人诱停落法对白纹伊蚊成蚊密度监测的效果,为白纹伊蚊成蚊监测及登革热等伊蚊传播疾病的防控提供参考。方法 2016年8-9月,于江苏省宜兴市太华镇内选择成蚊密度较高的3处生境,分别采用3种监测方法开展白纹伊蚊成蚊密度监测,根据拉丁方试验设计,依次轮换监测生境与方法,共进行3轮试验。组间两两比较采用LSD检验;气象资料中不同生境间比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD检验;成蚊密度与气象数据间的相关关系采用Pearson相关分析。结果人诱停落法测得白纹伊蚊成蚊平均密度为(30.44±8.70)只/(人·h),高于双层叠帐法[(10.67±7.42)只/(帐·h)]和人帐诱法[(12.89±2.53)只/(帐·h)],差异均有统计学意义(LSD-t双层叠帐法=6.865,P=0.021;LSD-t人帐诱法=6.093,P=0.026);双层叠帐法与人帐诱法监测效果之间差异无统计学意义(LSD-t=-0.772,P=0.521)。平均温度、平均相对湿度和平均风速与白纹伊蚊密度之间均无相关关系(r温度=-0.019,P=0.961;r湿度=-0.031,P=0.938;r风速=-0.332,P=0.383)。结论双层叠帐法与人帐诱法监测效果相当,但二者诱蚊效率均不及人诱停落法。双层叠帐法在保护诱集者方面优势明显,在蚊媒疾病流行区域及暴发期间,仍然是一种行之有效的监测方法。

摘要：本研究通过高通量测序技术检测了寨卡病毒(ZIKV)感染组、血餐对照组和糖水对照组埃及伊蚊中肠组织小RNA的丰度,并筛选出差异表达的6个黄病毒NIRVS和9个棒状病毒NIRVS。针对筛选出的6个NIRVS设计引物用两步法逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)方法验证了ZIKV感染第4、7和10天中肠组织中黄病毒NIRVS片段的表达。结果显示,黄病毒NIRVS AeFlavi53在感染第4、7天均上调,结果与小RNA测序一致,AeFlavi34B和AeFlavi4A在感染第4天上调,第10天下调,但在第7天表达无变化,与小RNA测序结果不一致,其余片段表达量在感染组与对照组间无统计学差异。RT-qPCR与高通量测序的结果一致性差,其原因可能是因为细胞中长链piRNA前体受上游转录和下游酶切多个程序的调节,针对其设计引物进行定量检测的结果不稳定。

摘要：本研究旨在建立一种以白纹伊蚊Actin基因表达量作为参照的登革Ⅱ型病毒一步法实时荧光定量PCR检测技术,为登革病毒在蚊虫中的定量检测提供更准确的检测方法。根据登革Ⅱ型病毒和白纹伊蚊Actin基因保守区序列设计引物和探针,在检测体系中同时加入病毒和Actin基因的特异性引物,计算每个样本中病毒含量与Actin表达量的比值,得到更为准确的定量结果。该方法重复性好、灵敏度高,可用于实验室白纹伊蚊感染登革Ⅱ型病毒的病毒载量检测。

摘要：本文旨在建立检测登革1型和2型病毒的一步法实时荧光定量PCR方法,为登革热的诊断和预测提供技术支撑。依据登革1型和2型病毒的保守区序列设计引物和探针,建立了同时检测两个血清型登革病毒的一步法实时荧光定量PCR方法。特异性实验结果显示,该方法可检测出登1型和2型病毒,与登革3型、4型病毒、黄热病毒、流感H3N2病毒均无交叉反应,具有较好的特异性。对登革1型和登革2型的灵敏度均为102copies/μL。应用该方法,可检测出登革1型和2型病毒混合感染C6/36后不同时间点病毒复制动态。在两个血清型登革病毒混合感染C6/36细胞72~120 h登革2型病毒的拷贝数与单独感染时登革2型病毒的拷贝数相比显著下降。上述研究证实建立的一步法实时荧光定量PCR方法具有特异性好灵敏度高、重复性好等特点,能够用于登革型和2型病毒混合感染样本的检测。