摘要：构建表达炭疽杆菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白（位于248～532氨基酸），并对其免疫效果进行研究；设计引物采用PCR法自炭疽杆菌扩增中性蛋白酶部分片段N，T-A克隆后构建原核表达质粒pET28a（＋）-N，通过Western blot检测重组蛋白的免疫原性。以AI（OH）3为佐剂皮下注射免疫BALB／c小鼠，用ELISA方法测血清总IgG水平，MTT比色法测定脾T淋巴细胞增殖，采用流式分选法对脾T淋巴细胞亚群分类；Western blot显示重组蛋白具有免疫原性，rN免疫BALB／c小鼠后，ELISA检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生；T淋巴细胞亚群试验表明，重组N蛋白以诱发Th2型免疫反应为主；MTT试验表明，rN蛋白对小鼠脾细胞在体外有促进生长和增殖能力，说明该重组蛋白具有生物学活性。纯化的rN可诱导高水平的抗体反应，为进一步的功能研究奠定了基础。

摘要：采用PCR方法,根据文献报道的人成骨蛋白-1(OP-1)成熟肽基因序列,设计并合成一对引物,从含人成骨蛋白基因的质粒中扩增获得大小为420bp的DNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,继之以pPIC3.5K为表达载体构建重组表达质粒,并经PCR及酶切鉴定。

摘要：为了研究鼠疫耶尔森氏菌 (Y .pestis)保护性抗原V蛋白 ,从基因库中查得Y .pestisLcrV基因DNA序列 ,针对序列设计合成了一对PCR扩增引物 ,以本所保存的Y .pestis菌种为模板进行基因扩增 ,结果获得长约 980bp的DNA片段。将扩增产物回收纯化 ,克隆至pGEM T载体 ,构建重组载体pGEM T/ypV ,经过PCR ,酶切鉴定 ,并对pGEM T/ypV中的V基因片段进行测序 ,分析测序结果与已知序列相同 。

摘要：[目的]研究小鼠多疫苗联合接种的安全性和有效性。[方法]研究要求6种(炭疽、鼠疫、出血热、霍乱、痢疾、钩体疫苗)疫苗进行联合接种,根据6种疫苗的联合接种方式、疫苗接种间隔和接种的先后顺序,设计3种疫苗快速接种方案(2～3w完成接种)。对研究对象连续观测了119d,以体重、免疫反应、生化指标及自发活动等指标对疫苗联合接种的安全性和有效性进行评价。[结果]研究过程中实验动物在疫苗联合接种中副反应发生比较明显。在某些时间点体重、白细胞计数、淋巴细胞百分比、AST、ALT和肌酐有变化。6种疫苗联合接种后,小鼠能够对各疫苗产生免疫反应。但是,不同方案疫苗免疫反应不同。其中以出血热疫苗的免疫反应受方案的影响更加明显。[结论]出血热、霍乱、痢疾、钩体疫苗等疫苗在采用恰当的接种顺序和接种间隔的情况下可以联合使用,但是可能存在一定的风险,尤其在此基础上加入炭疽和鼠疫疫苗。

摘要：将已知浓度的风疹病毒液通过ＴＫ发生器进行气溶胶发生于气溶胶转鼓中，搅匀后用ＡＧＩ－１０和Ｃａｓｅｌｌａ采样器进行气溶胶采样，采样样品以不同浓度稀释后分别进行ＲＴ－ＳＮ－ＰＣＲ和细胞培养。敏感性试验结果表明１００ＴＣＩＤ（５０）的ＲＶ病毒仍可被ＲＴ－ＳＮ－ＰＣＲ检测到，扩增片段为２９３ｈＰ，经ＨｉｎｃⅡ酶切成１２１和１７２ｈＰ的酶切片段与理论设计吻合。相应的Ｖｅｒｏ细胞培养结果均为阴性。通过气溶胶耐喷和耐压试验证明ＲＶ在空气采样过程中因高压冲击衰亡。ＰＣＲ检测微生物核酸，可不过多地考虑其生物衰亡，只要靶基因存在即有检测的可能性。