摘要：目的探索成纤维细胞生长因子2(FGF2)敲除对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖、迁移侵袭和凋亡的影响及作用机制。方法将FGF2-sgRNA基因序列转入载体lenticrispv2构建CRISPR-cas9-FGF2稳转细胞系,Western blot检测CRISPR-cas9-FGF2稳转细胞系FGF2的蛋白敲除情况及相关凋亡蛋白指标和周期蛋白指标,将MCF-7细胞分为CRISPR-cas9-NC组(对照组)和CRISPR-cas9-FGF2组(FGF2基因敲除组),使用CCK-8实验和细胞集落形成实验检测细胞增殖能力,细胞划痕实验和transwell实验检测细胞迁移侵袭能力,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果(1)设计的三条FGF2-sgRNA序列均与载体lenticrispv2连接成功。(2)用Western blot检测表明FGF2-sgRNA1敲除作用更明显(P<0.0001)。(3)与对照组细胞相比,FGF2基因敲除组细胞的增殖、迁移侵袭能力明显降低(P<0.01);周期蛋白CDK2和cyclinA蛋白表达显著降低(P<0.001),Bax促凋亡蛋白表达升高(P<0.001),Bcl-2抑凋亡蛋白表达降低(P<0.001),Bcl-2/Bax的比值减低(P<0.0001)促进细胞凋亡。结论FGF2基因敲除后明显抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移侵袭,将细胞阻滞在S期,抑制细胞的增殖与分裂,并促进细胞凋亡,提示FGF2基因具有成为乳腺癌治疗的潜在分子靶点。

摘要：目的 :建立人血浆中奥美拉唑的高效液相色谱测定法 ,以测定志愿者口服 2种奥美拉唑制剂后的血药浓度 ,并对 2种制剂的生物等效性进行评价。方法 :血浆中加入内标尼美舒利后 ,以乙醚提取 ,进行高效液相色谱法检测。色谱柱为HypersilODS2 2 0cm× 4 6mm ,5μm ,流动相为甲醇-水 -冰醋酸 -三乙胺 ( 60∶4 0∶0 5∶0 5) ,流速 1mL·min- 1,检测波长为 3 0 2nm。 1 2名健康志愿者随机分成两组 ,分别服用 2种奥美拉唑制剂 ,人体实验方案采用双交叉实验设计法。结果 :本测定方法的提取回收率为 87 0 2 %～ 98 0 7% ,血浆中奥美拉唑的最低检出浓度为 3ng·mL- 1,线性范围为 5～ 1 80 0ng·mL- 1。用本法测定了 1 2名志愿者随机交叉口服单剂量 4 0mg洛赛克胶囊和奥美拉唑肠溶片后血浆中奥美拉唑的浓度经时变化过程 ,并对其药动学参数进行估算。结论 :用本法测定人血浆中奥美拉唑浓度结果满意。奥美拉唑体内过程符合一室模型 ,统计学结果表明

摘要：烧嘴作为水煤浆气化炉的重要装置,可以实现在高压氧气和水蒸气的作用下,将水煤浆充分混合、雾化,以利于水煤浆的燃烧。烧嘴在高流速水煤浆的冲击下容易磨损,甚至造成流体泄漏。对水煤浆气化炉的烧嘴改进设计,强化了水煤浆的雾化和烧嘴的冷却效果,提高了烧嘴的使用寿命,保障了生产的安全稳定运行。