摘要：利用Gateway克隆技术构建重组抗瘤肽AIK的原核表达体系,建立表达及纯化重组AIK的最优条件,为深入研究和利用AIK奠定基础。首先,设计含AttB重组位点的引物,通过重叠PCR技术扩增出Att B-TEV-FLAG-AIK序列,利用BP重组反应将目的序列TEV-FLAG-AIK克隆到供体载体pDONR223中,构建入门载体,再通过LR重组反应,将目的序列转移到目的载体pDEST15中,构建GST-AIK融合蛋白原核表达质粒。随后,在BL21(DE3)工程菌中优化诱导融合蛋白表达的条件。以谷胱甘肽磁珠纯化GST-AIK融合蛋白,再以rTEV酶切除GST,获得FLAG-AIK重组蛋白。最后以MTS法检测FLAG-AIK对白血病细胞HL-60的细胞毒性。菌液PCR验证和测序分析表明成功构建了重组抗瘤肽AIK的入门质粒和原核表达质粒。在BL21(DE3)工程菌中实现了GST-AIK融合蛋白的高效可溶性表达。并测得在37℃下以0.1 mmol/L IPTG诱导工程菌(OD600=1.0)4 h,重组蛋白表达量占菌体总蛋白的30%以上。经GST亲和层析、rTEV酶切除GST标签及二次GST亲和层析获得纯度高于95%的FLAG-AIK蛋白。MTS法测得所制备的FLAG-AIK蛋白抑瘤活性与化学合成的AIK相当。总之,本课题应用Gateway克隆系统成功构建了抗瘤肽AIK的原核表达质粒,实现了GST-AIK融合蛋白的高效可溶性表达,经亲和层析获得了有生物活性的重组AIK多肽,为后续深入研究和大规模制备奠定了基础。

摘要：需求分析是系统研发的起点,对整个研发过程都具有指导作用,决定着系统的建设方向和最终结果[1]。本文针对城市维稳卫勤保障任务特点、工作流程和技术应用等需求,通过专家咨询法构建军队医院城市维稳卫勤保障决策支持系统的需求分析,旨在为系统的整体设计与开发提供理论依据,实现在卫生资源的信息化管理和战备训练的基础上,优化和改善应急条件下卫勤保障决策、组织、指挥方式,以满足医院应对城市反恐维稳卫勤保障的需要。

摘要：对医院遂行城市维稳卫勤保障任务伤病员救治涉及的基本概念,从保障特点、伤病员属性、保障模式进行探讨,在此基础上对行动中伤病员救治的工作进行勤务分类,并以此为依据,利用运筹学原理对医院城市维稳卫勤保障伤病员救治流程进行设计。

摘要：编制卫勤保障预案及配套的技术文件是卫生战备的重要内容，也是做好卫勤组织指挥的基本依据。随着国内恐怖活动的逐渐升级，强化城市维稳应急卫勤保障能力已是当务之急。医院尤其是军队医院是实施伤员救治的主要力量，在平时战备工作中如何预测情况、设计具体内容与步骤，从而使预案合理、有效、实用，是驻疆军队医院的现实任务。本文欲结合当前我军卫勤保障预案存在的问题，对军队医院拟制城市维稳卫勤保障预案的针对性及合理性进行探讨。

摘要：新疆南疆地区由于地处地震断裂带,会受地震突发的潜在威胁。而南疆地区属于典型的沙漠干热环境,在此环境下进行抗震救灾医疗救援活动,不仅要考虑医疗救援本身,还要考虑干热环境各种风险因素给医疗救援带来的影响。手术室在抗震救灾医疗救援活动中发挥着重要作用,只有分析风险因素对手术室勤务的主要影响,才能对手术室涉及的勤务问题进行合理设计。