摘要：生态位模型是利用物种分布数据和相关环境变量,根据一定的算法建立模型分析物种的生态需求,以预测不同时空下物种的实际分布和潜在分布。现阶段,该模型已在病媒传染病的危险因素识别、传播风险预测领域中取得了很好的预测效果,表明其在疾病传播动态分析和流行病学研究方面具有较好的应用价值,但对于一些自然疫源性或者生物因素影响较大的疾病预测,生物性因素被纳入构建模型的重要参数则较为少见,预测结果存在一定的局限性,有必要在应用生态位模型研究此类疾病中从模型设计、数据挖掘和处理中更多地考虑生物因素,从而提高预测结果的可信度。

摘要：目的：原核表达纯化新疆出血热病毒（ XHFV） YL04057株的多表位肽,以其为抗原建立检测动物血清抗XHFV抗体的间接ELISA方法。方法依照对XHFV YL04057株核蛋白和糖蛋白氨基酸序列的亲水性和抗原决定簇位点分析,设计包含有保守性强的共6个优势B细胞表位的多表位基因片段,经串联重复成为双拷贝多表位基因 MEPX2,采用化学法合成后构建原核表达质粒pET-32a（＋）-MEPX2,经诱导表达和镍柱亲和层析纯化获得重组rMEPX2多表位肽,Western blot检测其抗原性,以其作为包被抗原采用方阵滴定法建立间接ELISA方法检测动物血清,并与商品化试剂盒检测结果进行比较。结果经双酶切鉴定和测序证实构建的重组表达质粒pET-32a（＋）-MEPX2正确,经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定证实rMEPX2表达正确,相对分子质量约为49＆#215;103,能被His-tag单抗及天然感染XHFV的羊血清特异性识别。以纯化的rMEPX2为抗原建立了检测XHFV IgG抗体的间接ELISA方法,用此法对108份绵羊血清样品进行检测,并与双抗原夹心法商品化试剂盒检测比较,结果显示基于rMEPX2建立的检测方法具有较高的特异性。结论成功获得抗原性强的重组多表位肽rMEPX2,以其为抗原建立的间接ELISA方法可用于XHFV特异性抗体的检测。

摘要：目的对我国新发现的准噶尔盆地大沙鼠鼠疫自然疫源地的鼠疫菌株进行基因组差异性区段的比较分析，确定该鼠疫疫源地鼠疫菌株的基因组类型。方法按常规方法提取鼠疫菌染色体DNA，依据已证实的鼠疫菌22个差异性区段（DFR）设计引物，采用PCR技术检测鼠疫菌基因组差异性基因片段的构成。结果准噶尔盆地鼠疫菌株的差异性区段结构类型为缺失DFR01、04、06、07、10、13和DFR15—18，不同于其他鼠疫疫源地鼠疫菌株的结构类型，为我国新的鼠疫菌基因组型。结论准噶尔盆地大沙鼠鼠疫疫源地鼠疫菌株的基因组结构类型为我国新的基因组类型。

摘要：目的探讨新疆出血热病毒(XHFV)糖蛋白的2个抗原优势区(GcⅠ和GcⅡ)以不同嵌合策略以及不同免疫方式诱导小鼠免疫应答的效果。方法以在5’’端加入或不加鼠白细胞介素-2(IL-2)信号肽与通用型辅助性T细胞(Th)表位为不同设计策略,将GcⅠ、GcⅡ及GcⅠ上已鉴定出来的表位(Gc^(233~248)、Gc^(241~256)和Gc^(281~296))分别进行融合并构建至真核表达载体pVAX1与原核表达载体pET-28a上。采用间接免疫荧光法检测重组真核质粒的体外表达效果后进行大量提取,将重组原核质粒转化大肠杆菌BL21进行诱导表达及纯化。通过基因免疫、蛋白免疫和DNA初免-蛋白加强免疫(联合免疫)3种方式免疫BALB/c小鼠,酶联免疫吸附测定法检测小鼠体内IgG抗体水平以及小鼠脾细胞培养上清中IL-4和干扰素-γ(IFN-γ)的含量,噻唑蓝比色法检测小鼠脾T淋巴细胞的增殖情况。结果双酶切及测序结果表明8种重组质粒构建成功。荧光显微镜下可见构建的重组真核质粒在体外细胞均能成功表达。3次免疫小鼠后,各实验组的小鼠血清IgG抗体水平和刺激指数均明显高于对照组(均P<0.01)。Th2型细胞因子IL-4与Th1型细胞因子IFN-γ的质量浓度检测结果表明,联合免疫组引起的免疫应答偏向Th1型。结论成功构建了XHFV糖蛋白的多表位嵌合疫苗且靶抗原在小鼠体内可有效表达,各免疫组与对照组相比均激发了较强的体液免疫及细胞免疫应答,其中pVAX1-ST(GcⅠe+GcⅡ)联合重组蛋白r(GcⅠe+GcⅡ)的免疫效果最好,有望作为XHFV的新型候选疫苗。

摘要：目的 比较来自我国新疆4大片山地鼠疫自然疫源地的144株鼠疫菌的基因组组成的差别，研究新疆山地鼠疫自然疫源地鼠疫菌的基因分型和进化规律。方法 根据已经证实的22个差异区段（DFR）设计引物，每株鼠疫菌的每个DFR都采用PCR技术进行验证。结果 新疆4大片山地鼠疫自然疫源地的144株鼠疫菌的基因型DFR图谱可归类为14种，分为7个主要基因组型和7个次要基因组型。西天山北坡灰旱獭-长尾黄鼠鼠疫疫源地存在3个主要基因组型和5个次要基因组型，西段以01型基因组型为主，占种群体的91．7％，02型占8．3％；中段以03型为主，占68．8％，01型占4．2％，02型占20．85％，另有02M1和02M3（02型的突变型）占2．1％，03M1型（03型的突变型）占2．1％；东段以02型为主，89．8％，01型、02M2、02M3和02M4型（02型的突变型）各占2．0％。南天山灰旱獭鼠疫疫源地存在2个主要基因型和1个次要基因型，以4型为主，占66．7％，02型占16．7％，04M1型（04型的突变型）占16．7％。帕米尔高原-阿赖山红旱獭鼠疫疫源地仅存在04型1种基因型。昆仑山喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地分为中昆仑和东昆仑鼠疫自然疫源地，中昆仑山存在2种鼠疫基因组型，以11型为主，占群体的90％，12型占10％；东昆仑山存在3种鼠疫基因组型，以05型为主，占66．7％，02型和11型分别占16．7％。结论 新疆山地鼠疫自然疫源地鼠疫菌基因组的演化由3个演化路线组成。西天山北坡鼠疫自然疫源地的鼠疫菌基因组，自西向东在不同的生态地理环境和宿主媒介作用下发生适应性进化和演变，由较为古老的01型基因组逐渐演化为02和03型，最后南下至青海和东昆仑演变为05型，并且在这条演化路线上存在许多演变过程中发生的基因组地域交叉和次要基因组型；南天山和帕米尔高原-阿赖山鼠疫自然疫源地的鼠疫菌的04型基因组型是由01型直接演化而来，并在这一区域形成主要鼠疫基因组型；中昆仑山鼠疫自然疫源地的鼠疫菌基因组型可能是由西藏冈底斯山喜马拉雅旱獭鼠疫源地的鼠疫菌的10型基因组演化而来，形成以11型为主，12型为辅的鼠疫基因组构型特点。

摘要：岩体结构面对爆破效果有显著影响 ,当最小抵抗线与结构面平行时 ,极易造成冲炮和隔墙。鉴于此 ,本文介绍一种千枚岩硐室爆破的设计和施工方法 ,取得了较好的爆破效果。

摘要：目的利用DNA重组技术,在大肠杆菌中获得融合表达的鼠疫耶尔森氏菌YopD抗原基因。方法根据查找文献及基因比对选取了鼠疫菌重要功能蛋白-YopD蛋白。利用分子克隆技术克隆后,在原核系统中进行表达。根据云南玉龙菌株(D106004)全基因组序列设计引物,PCR扩增目的基因片段。采用pET-32a(+)作为表达载体,通过双酶切和连接反应,将目的基因片段定向插入载体中,构建重组表达质粒。IPTG诱导,使重组质粒在其宿主菌*** BL21(DE3)中表达。结果在大肠杆菌中成功获得了融合表达蛋白,即重组YopD蛋白。结论以质粒pET-32a(+)作为表达载体,鼠疫菌重要功能蛋白YopD能够在大肠杆菌*** BL21(DE3)中稳定高效地表达,为鼠疫潜在诊断靶点及新型疫苗选择的可能性奠定了基础。

摘要：目的利用DNA重组技术,在大肠杆菌中获得融合表达的鼠疫耶尔森氏菌caf1及p H6抗原基因。方法利用分子克隆技术克隆后,在原核系统中表达鼠疫菌重要功能蛋白caf1及p H6蛋白,根据云南玉龙菌株(D106004)全基因组序列设计引物,PCR扩增目的基因片段;采用p ET-32a(+)作为表达载体,通过双酶切和连接反应,将目的基因片段定向插入载体中,构建重组表达质粒;IPTG诱导,使重组质粒在其宿主菌*** BL21(DE3)中表达。结果根据酶切鉴定和PCR产物测序结果显示,目的基因caf1及p H6已成功连接到表达载体p ET-32a(+)上,SDS-PAGE结果显示表达产物的相对分子质量约为34.2 ku和35.5 ku,与理论分子量一致。结论成功克隆并构建了p ET32a-caf1及p ET32a-p H6重组基因原核表达系统,为鼠疫潜在诊断靶点及新型疫苗选择的可能性奠定了基础。

摘要：根据 Gene Bank数据库中 5种啮齿目动物卵透明带 3 (ZP3 ) c DNA的序列 ,利用 DNAMAN和 NIH NCBI BLAST同源性分析程序设计了特异性引物。从 6周龄的未孕雌性的草原兔尾鼠卵巢中用柱离心法得到总 RNA,利用反转录技术得到 c DNA,通过特异性引物进行 PCR扩增草原兔尾鼠的 ZP3 c DNA保守序列。将扩增产物连接到 p MD1 8- T载体上 ,通过蓝白斑筛选得到阳性克隆 ,酶切鉴定后进行测序。将其与 Gene Bank中啮齿目动物 ZP3 c DNA进行同源性比较 ,获得了草原兔尾鼠 ZP3 c DNA的保守基因序列 ,与啮齿类同类基因比较 ,具有较高的同源性。