摘要：目的采用问卷形式调查我国麻醉学科住院医师硬膜外穿刺技术的掌握现状及培训需求。方法采用自行设计的调查问卷,通过微信平台将调查问卷发至参与调查的每位麻醉科住院医师手机上,调查时间为1个月,系统自动记录答卷情况。结果共795位麻醉科住院医师参与问卷调查,有效问卷为753份(94.7%),其中培训年限为0~2年的低年资住院医师233位(30.9%),3~5年的中年资住院医师279位(37.1%),大于5年的高年资住院医师241位(32.0%)。与低年资组相比,中年资组和高年资组硬膜外穿刺的难度评分降低,完成常规正中腰段、困难腰段、侧路腰段和胸段硬膜外穿刺的自信心评分升高(P<0.05);与中年资组相比,高年资组硬膜外穿刺的难度评分降低,完成常规正中腰段、困难腰段、侧路腰段和胸段硬膜外穿刺的自信心评分升高(P<0.05)。既往穿刺例数越多,住院医师认为硬膜外穿刺难度越低(回归系数=-0.719,P<0.01)。46.6%的住院医师在患者身上进行硬膜外穿刺之前曾使用模拟教学模型进行练习,多数住院医师认为模拟教学模型在帮助熟悉操作流程(77.2%)、熟悉解剖结构(70.4%)、模拟各层次穿刺手感方面(47.9%)和提高硬膜外穿刺成功率(56.7%)方面相当和非常有效。75.0%的住院医师认为可视化技术定位对于提高硬膜外穿刺的成功率和信心相当和非常有帮助。结论目前我国麻醉学科低年资住院医师的硬膜外穿刺技术掌握情况尚有待加强,硬膜外穿刺模拟教学尚未广泛普及,住院医师对于模拟教学的有效性给予高度评价,并期待可视化技术加入硬膜外穿刺的模拟教学。

摘要：目的:通过构建用于RNAi筛选的模拟靶基因,筛选出起作用的siRNA,为进一步研究以Cav2.2e[37a]为靶标的基因治疗提供依据。方法:构建了EGFP-e37a/e37b融合基因,将其放入载体质粒中进行表达。按照siRNA的设计原则设计了四对siRNA(编码为I号、Ⅱ号、Ⅲ号、IV号),并将其放入质粒表达载体中,用siRNA表达载体与融合基因表达载体共转染BHK细胞进行了RNAi试验。用荧光显微镜、流式细胞仪等方法检测RNAi效果。结果:EGFP-e37a/e37b融合基因通过PCR、测序等方法鉴定为正确;在荧光显微镜下可见siRNAⅡ使细胞的荧光效率明显受到抑制,流式细胞术可见siRNAⅡ的RNAi效率在24h达到了90%左右,其余3条siRNA抑制作用不明显。结论:本研究将目的基因e37a与EGFP基因进行了融合构建,通过EGFP的绿色荧光效应显示目的靶基因在细胞内的表达,并观察到RNAi抑制效果,筛选出了有功能的siRNA。