摘要：目的以腺相关病毒(AAV)为载体,利用CRISPR-Cas9系统靶向抑制BRCA1邻近基因1(NBR1)表达,建立NBR1基因敲除的肺癌小鼠模型,并探究其对肿瘤生长和免疫细胞浸润及功能活性的影响。方法利用在线网站CRISPOR(http://***/***)进行靶向鼠源NBR1基因(Gene ID:17966)的sgRNAs设计。使用AAV6作为sgRNAs的载体,使用PCR和DNA测序的方法确认重组病毒载体是否构建成功及确定基因敲除效率。为了确定小鼠体内最佳的AAV侵染方式,将6只C57BL/6J小鼠随机分为滴鼻组和气管内注射组,侵染28天后,通过观察小鼠肺组织冰冻切片的增强型绿色荧光蛋白表达情况,选择更有效的侵染方式进行后续实验。通过HE染色、免疫组化、组织免疫荧光和流式细胞术等方法检测小鼠肺部肿瘤生长情况以及肿瘤组织免疫细胞浸润和激活状态。结果DNA测序及荧光显微镜观察显示,AAV6-U6-sgNBR1-CAG-Cre-GFP病毒载体构建成功,且敲除效率稳定。荧光显微镜观察显示气管内给药法小鼠肺部感染病毒的效率较高(P<0.05)。HE染色结果显示靶向敲除NBR1后小鼠肺部肿瘤面积较对照组减少(P<0.01)。组织免疫荧光及流式细胞术结果显示,靶向敲除NBR1的肺癌小鼠肺癌组织中CD8^(+)T淋巴细胞功能活性较对照组增强,表现为效应型T淋巴细胞增多、耗竭型T淋巴细胞减少(P<0.01)。结论通过CRISPR/Cas9技术成功构建了靶向NBR1基因敲除的肺癌小鼠模型,验证了靶向抑制NBR1表达可明显增强肺组织CD8^(+)T淋巴细胞功能活性,使肿瘤生长受到抑制,减轻肿瘤负荷,延长肺癌小鼠生存期。为后续研究NBR1及其他基因在肺腺癌细胞中的作用机制和功能奠定了实验基础。

摘要：介绍了在微机上开发的麻花钻CAD/CAM系统的总体结构及各功能模块 ,探讨了产生式原理在工艺设计中的应用。

摘要：为了给临床检测猪库布病毒(PKV)提供更加准确便捷的检测方法,本试验设计了1对特异性引物,扩增PKV基因组的VP0区域。在传统PCR反应体系中添加纳米金颗粒材料,优化后建立了一种方便快捷且特异检测PKV的nano-PCR方法。结果显示,该方法能特异性扩增猪库布病毒,与猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪轮状病毒、猪札幌病毒均无交叉反应。nano-PCR相对于普通PCR表现出更高的敏感性,普通PCR的最低核酸检测浓度为5.61×10^(-7)ng/μL,而nano-PCR的最低核酸检测浓度为5.61×10^(-10)ng/μL,敏感性提高了1000倍。对来自不同发病猪场30份腹泻猪的粪便和血液临床样本的检测结果显示,nano-PCR阳性检出率为23.33%(7/30),普通PCR阳性检出率为16.66%(5/30)。结果表明,本试验建立的nano-PCR方法在猪库布病毒的检测中表现出更高的特异性和敏感性,对猪库布病毒的快速诊断和检测具有重要的临床意义。

摘要：1931年Smith-Petersoh首先采用三翼钉内固定治疗股骨颈骨折,开创了股骨颈骨折的内固定治疗历史.随后上百种内固定物先后被设计应用到临床工作中.我们从1990年至今采用尾部折断式加压螺丝钉内固定治疗股骨颈骨折,共96例,取得了较好的结果.现报道如下:

摘要：针对大型风电场中风电机组数量多、分布面积广和需要远程监控的特点,把风力发电监控系统和嵌入式系统有机地结合起来,提出了一种基于嵌入式的风力发电监测控制系统。该系统采用无线通信方式进行信号的传输,从而使系统具有了监测、控制方式灵活,性能稳定等特点。

摘要：在采用美国标准及规范进行境外燃煤火力发电厂的钢筋混凝土烟囱设计时,需要计算烟囱各层的温度变化及各层内外表面的温度。美国《钢筋混凝土烟囱设计规范》(ACI 307-08)中第6章给出了4种不同隔热形式的钢筋混凝土烟囱筒壁温差的计算公式,但规范中并未给出烟囱各层温度的计算方法及公式。首先介绍了热传导、热对流和热辐射3种热量传递的基本方式以及基本的计算公式,包括傅里叶导热定律及牛顿冷却公式,并利用傅里叶导热定律推导了单层圆筒壁导热的计算公式,进而利用传热学的基本原理以及单层圆筒壁导热的计算公式推导了基于ACI 307-08的不同隔热形式的钢筋混凝土烟囱的总体传热系数,进而求得烟囱各层的温度以及温差。提出的计算公式可在工程设计中供参考采用。

摘要：目的通过构建汉滩病毒M片段的噬菌体展示文库,筛选汉滩病毒包膜蛋白的抗原表位。方法DNaseⅠ随机消化的M片段与载体pComb3连接,转化宿主XL-1Blue,在辅助噬菌体VCSM13存在的条件下,获得M片段的随机噬菌体文库。利用纯化的恢复期病人血清对M片段噬菌体文库进行3轮淘洗,通过ELISA、序列分析对所获得的克隆进行鉴定。并对其中2个阳性克隆的目的片段进行了原核表达和免疫原性分析。结果筛选获得的5个阳性噬菌体克隆均位于G1蛋白编码区,原核表达的2个阳性克隆片段蛋白免疫兔,免疫兔血清能与病毒抗原发生特异反应。结论本技术路线可用于汉滩病毒包膜蛋白抗原表位的研究,为汉滩病毒诊断试剂的研制、亚单位疫苗的设计提供了数据。

摘要：针对土壤的石油污染问题,在花盆中模拟原位修复实验,采用单因素实验考察有机质与全氮含量比(C/N)、含水率及漆酶活性对石油烃降解率的影响。通过响应曲面法设计实验,建立二次多元回归方程预测模型,确定修复的最佳条件。结果表明:在干旱条件下漆酶可以增强石油烃的生物修复效果。软件预测模型显著且具有准确性,在C/N为12.35∶1,漆酶活性为15.03 U/g,含水率为12.62%条件下,修复30 d后石油烃降解率为25.01%。对石油烃降解率影响的显著性从小到大依次为漆酶活性、含水率、C/N。

摘要：针对关系型数据库(RDB)现有的全文搜索方案存在的效率低下、资源占用高的问题,提出一种具有增强式辅助缓存的轻量级关系型数据库全文搜索模型。首先,该模型构建基于Redis的倒排索引,并利用缓存索引缩小搜索范围,从而用内存高效的数据处理能力解决关系型数据库I/O瓶颈,并提升系统整体性能;其次,为保证搜索结果的准确性和时效性,进一步提出索引同步策略,而且设计并实现了增量索引组件来隐藏索引处理细节,从而提高模型的易用性和通用性;最后,对于热点数据提供一种基于访问热度的索引更新机制,以降低倒排索引的内存占用。实验结果表明,所提模型在保证关系型数据库全文搜索响应速度和准确度的前提下,空间资源消耗比MySQL全文索引降低了48.8%~60.9%,比Elasticsearch降低了85.2%~96.2%,证明所提模型在实际应用中可行且有效。

摘要：在一般船用柴油机中，大约有１５～１７％的柴油总热量会由夹套冷却水带走，而另一方后又需设置夹套水冷却器将这些淡水降温以便回用。利用气缸头夹套水排出的６０℃～７０℃冷却水作为热源，以舷外海水作为冷源，将被加热的海水在真空条件下蒸发、分离、冷凝来制取淡水，选用最新强化传热管技术设计制造的这种装置由于采用强化传热技术，故设备具有高效、省材、紧凑、重量轻、节能等优点。可减少带水出海，可增加船舶载货能力及续航能力。