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应用Gibson Assembly方法构建植物表达载体: 收藏
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引用; 《华南农业大学学报》2014年第5期35卷 112-116页; 作者：戢志呈江雁翔刘耀光张群宇亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室/华南农业大学生命科学学院广东广州510642; 【目的】构建方便快捷的植物表达载体。【方法】应用Isothermal in vitro recombination system or “Gibson Assem-bly”方法设计包含片段间20～25 bp互补重叠序列的引物，通过PCR扩增出带有首尾重叠的目的DNA片段，可将1个或多个片段...; 【目的】构建方便快捷的植物表达载体。【方法】应用Isothermal in vitro recombination system or “Gibson Assem-bly”方法设计包含片段间20～25 bp互补重叠序列的引物，通过PCR扩增出带有首尾重叠的目的DNA片段，可将1个或多个片段和线性化的载体一步组装成表达载体。【结果和结论】利用该方法快速构建了多个水稻基因的全长以及部分缺失编码区表达载体。此外，还通过对Gibson Assembly连接产物进行PCR扩增后再连接到载体，提高多DNA片段组装的效率。本方法不受目的片段内部限制性酶切位点的限制，可广泛应用于各种载体的构建。; 来源：详细信息评论

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