摘要：目的:探讨SLP-2siRNA对裸鼠胃癌移植瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法:设计合成化学修饰的SLP-2siRNA,将胃癌细胞SGC-7901接种于裸鼠皮下建立裸鼠胃癌移植瘤模型,随机分为转染SLP-2siRNA组、阴性对照组和空白对照组,于肿瘤局部分别多点多次注射化学修饰SLP-2siRNA、阴性对照siRNA及生理盐水.检测3组移植瘤细胞增殖及凋亡状况,RT-PCR及免疫组织化学技术检测移植瘤细胞内SLP-2mRNA及蛋白的表达.结果:与两对照组相比,注射化学修饰的SLP-2siRNA后,裸鼠胃癌移植瘤细胞生长速度减慢、移植瘤体积减小(P=0.009,P=0.003).抑制瘤率分别为26.74%和30.15%,细胞凋亡无明显变化(P>0.05),肿瘤细胞内SLP-2mRNA及蛋白的表达量降低.结论:SLP-2siRNA可抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长,但对细胞凋亡无影响,提示SLP-2基因参与促进胃癌细胞增殖.

摘要：目的:探讨结肠癌组织中SLP-2蛋白的表达情况及SLP-2基因对结肠癌细胞HCT-116侵袭、迁移力的影响。方法:采用免疫组化法检测50对结肠癌及正常结肠黏膜组织中SLP-2蛋白的表达,分析患者临床病理特征与SLP-2蛋白表达的关系。设计合成SLP-2 siRNA,转染结肠癌HCT-116细胞,Transwell法及Matrigel基质实验检测转染SLP-2 siRNA对HCT-116细胞侵袭、迁移力的影响,RT-PCR及Western blot检测转染48 h后HCT-116细胞中SLP-2 mRNA及蛋白的表达情况。结果:正常结肠及结肠癌组织中SLP-2蛋白的高表达率比较,差异有统计学意义(χ2配对=23.188,P<0.001)。SLP-2蛋白表达与结肠癌TNM分期(χ2=10.474,P=0.001)及淋巴结转移(χ2=19.647,P<0.001)有关。SLP-2 siRNA转染组细胞迁移力、侵袭力、SLP-2 mRNA及蛋白表达水平均低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05)。结论:结肠癌组织中SLP-2高表达;SLP-2可能通过促进结肠癌细胞的侵袭、迁移能力,参与结肠癌的转移。

摘要：目的:观察表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)表达抑制对胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡、细胞周期及化疗药物敏感性的影响。方法:设计3条EGFR-siRNA,转染胃癌AGS细胞,CCK-8方法测定细胞增殖,Transwell方法检测细胞侵袭和转移能力,流式细胞术测定细胞凋亡与周期,RT-PCR方法检测EGFR mRNA表达,Western blot方法检测EGFR、ERK、p-ERK、AKT和p-AKT蛋白表达。结果:EGFR干扰能有效抑制胃癌AGS细胞中EGFR的基因和蛋白表达水平(P<0.05)。与对照组、阴性siRNA转染组相比,EGFR-siRNA转染组AGS细胞增殖抑制显著增加,迁移、侵袭能力显著下降,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),对顺铂、多柔比星、紫杉醇的化疗敏感性显著增加(P<0.05)。EGFR表达抑制后,处于S期的细胞比例明显减少,G_2/M期细胞比例明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。EGFR表达抑制后,AKT和p-AKT表达下调。结论:抑制EGFR表达可抑制胃癌AGS细胞增殖,降低细胞迁移和侵袭能力,增加细胞对顺铂、多柔比星、紫杉醇的化疗敏感性,其机制可能与AKT、p-AKT的表达下降有关。

摘要：目的观察慢病毒介导的基因干扰对胃癌SGC-7901细胞中E型钙黏附蛋白(E-cadherin)表达抑制效果,及E-cadherin基因抑制对5-氟尿嘧啶(5-Fu)作用的影响。方法设计E-cadherin基因干扰序列,构建慢病毒载体,MTT法测定细胞增殖,流式细胞术测定细胞凋亡,RT-PCR方法测定E-cadherin、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax) m RNA表达,Western blot法测定E-cadherin蛋白表达。结果慢病毒介导的E-cadherin干扰能有效抑制胃癌SGC-7901细胞中E-cadherin的基因和蛋白表达水平(P <0. 05)。E-cadherin表达被抑制后,胃癌SGC-7901细胞对5-Fu增殖抑制显著下降,感染前后半数抑制浓度(IC50)分别为1. 27 mg·L^(-1)和2. 35 mg·L^(-1),细胞凋亡率的显著下降(P <0. 05)。E-cadherin表达被抑制后,Bcl-2 m RNA表达增高,Bax m RNA表达下降。5-Fu诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡时,Bcl-2 m RNA表达增高,Bax m RNA表达下降。结论慢病毒介导的E-cadherin基因干扰能有效抑制E-cadherin在胃癌SGC-7901细胞中的表达,并降低细胞对5-Fu作用的敏感性,其机制可能与Bcl-2、Bax基因表达改变有关。