摘要：为了制备犬细小病毒（CPV）VP2蛋白抗原，试验采用PCR方法，以一例疑似CPV感染的出血性肠炎患犬粪便为样品对VP2基因进行扩增，并将该目的基因克隆到pMD18-T质粒上。进行EcoRI／HindⅢ双酶切鉴定及测序鉴定；对该基因进行序列分析后将VP2基因克隆到原核表达载体pET-32a上，并转化***21（DE3），诱导表达后进行Ni-NTA亲和层析纯化、Western—blot试验验证其生物活性。结果表明：克隆的基因全长为1790bp；该基因序列与已报道的CPV基因序列同源性高达99．2％～99．9％，氨基酸同源性达99．0％～99．8％，为新CPV-2a基因亚型，其中与泰国株GQ379042．1亲缘性最高，仅1个碱基不同，与猫细小病毒同源性高达98．69％；获得了87ku的目的蛋白。说明该临床病例确为CPV感染。该株细小病毒VP2蛋白的成功表达可为吉林省CPV流行病学调查提供资料，可用于进一步的疫苗研究及免疫学方法的建立。

摘要：目的应用Box-Behnken设计-响应面法,结合基准关联度和层次分析法(analytichierarchyprocess,AHP)-熵权法优化经典名方小承气汤的提取工艺。方法以芦荟大黄素和大黄酚、厚朴酚、辛弗林含量、出膏率及指纹图谱相似度为关键质量属性(critical quality attributes,CQAs),以加水倍量、提取时间、提取次数为关键工艺参数(critical process parameters,CPPs),采用单因素实验确定各因素水平,Box-Behnken设计优化提取工艺参数并进行验证。最后,计算不同提取参数的各评价指标下各样品与基准样品的基准关联度,采用AHP-熵权法确定各种评价指标的权重系数,进行综合评分,预测最佳提取工艺。结果方差分析结果显示,2次项回归模型的方差显著(P<0.01),且失拟值不显著,表明所建模型具有统计学意义,各因素与响应值之间的关系可以用所建模型进行函数化。确定最佳提取工艺为全方饮片加6倍量水,提取30min,提取1次。平行3次的验证试验综合评分均值为95.37,RSD为2.31%,且符合基准样品质控标准。结论基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念、基准关联度和AHP-熵权法筛选的经典名方小承气汤提取工艺参数稳健可靠,同时为其他经典名方的制备工艺开发提供了参考。

摘要：目的:优化两菌协同发酵工艺,提高六神曲消化酶活力。方法:利用酵母属真菌扣囊复膜酵母菌(Saccharomycopsisfibuligera)和细菌枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillussubtilis ***)协同发酵六神曲,在2008年版《北京市中药饮片炮制规范》方法二基础上,以蛋白酶活力和淀粉酶活力为指标对发酵工艺进行单因素考察并进行Box-Behnken响应面设计,寻找最优发酵工艺。结果:最优发酵工艺为枯草芽孢杆菌和扣囊复膜酵母菌按4:1的比例接种,总接种量为40%,发酵5d。9批自制神曲的蛋白酶活力和淀粉酶活力的RSD分别为4.35%和4.73%,蛋白酶活力远高于北京市炮制规范下生产的传统发酵商品神曲(P<0.01)。结论:两菌协同发酵自制神曲可以提高酶活力稳定性及蛋白酶活力。

摘要：快用你的巧(qiáo)手,记录(jīlù)生活中的精彩(jīng cái)吧!欢声笑语。娜娜点评:整(zhěng)个画面颜色鲜艳(xiān yàn).

摘要：针对利用线性模型忽略浮力解决系泊系统中锚链形状参数时所造成误差大的问题,提出考虑浮力的迭代模型。利用该模型,首先计算得到的锚链形状,其与真实情况相比所得结果基本相同;然后研究改变锚链链环型号对锚链形状的影响;最后,在以往的线性模型的基础上做出改进,得到锚链模型。通过对几个模型的比较可以发现,迭代模型和改进后锚链模型均与真实锚链形状相符,没有改进的模型与其有较大的差异。