摘要：目的:构建针对h TERT基因的人工mi RNA表达框架,并验证其对Hep G2细胞端粒酶活性的抑制作用。方法:应用融合PCR技术针对不同位点设计并构建3个靶向h TERT的人工mi RNA表达框架,对各表达框架鉴定后,将其单独或两种共转染Hep G2细胞,采用TRAP-银染法和TRAP-二聚体蝎形探针荧光定量PCR法检测细胞端粒酶活性。结果:3个针对h TERT基因的人工mi RNA表达框架均成功构建,单独或共转染Hep G2细胞后,Hep G2细胞的端粒酶活性均被不同程度的抑制,且两种表达框架共转染的抑制作用明显大于单独转染,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:靶向h TERT基因的人工mi RNA表达框架能有效而特异抑制Hep G2细胞端粒酶活性,多位点联合抑制是一种有效的实验方案。

摘要：目的指导儿科重症监护病房(pediatric intensive care unit,PICU)临床工作人员的床旁血浆置换操作中的护理,规范PICU床旁血浆置换治疗的护理,减少并发症的发生,在危重症救治中缩短上机前准备时间,为患者争取宝贵时间。方法选取2015年3月~2015年12月在本科室进行血浆置换治疗的36例患者作为对照组,予以常规治疗;2016年1月~2016年10月在本科室进行血浆置换治疗的36例患者作为试验组,对于试验组设计《PICU床旁血浆置换护理临床路径表》,行床旁血浆置换治疗时,均按《PICU床旁血浆置换护理临床路径表》规范内容操作,包括上机前、治疗中、下机后的药物、用物的准备及需要监测的项目等。观察和比较2组上机前准备时间、血浆置换治疗并发症的发生率。结果通过使用《PICU床旁血浆置换护理临床路径表》,试验组较对照组上机前准备时间明显减少,并发症的发生率降低,保证血浆置换治疗流程的质量。结论 PICU床旁血浆置换治疗时使用《PICU床旁血浆置换护理临床路径表》,按表进行操作,能有效减少来回取物等上机前准备时间,循章操作,提高工作效率;PICU患者行床旁行血浆置换治疗,其风险增高,操作者按表进行早期识别与干预,能保证患者安全,降低并发症发生率;按表操作,可减少操作过程中的环节缺失或环节质量偏差,保证操作流程的质量,此表值得临床推广。

摘要：目的 :设计靶向端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,h TERT)的mi RNA表达框架,探讨其对h TERT的表达、端粒酶活性及K562增殖的影响,以期为慢性髓系白血病提供新的基因治疗策略。方法:构建靶向h TERT的mi RNA表达框架,脂质体法转染K562细胞,银染法及荧光定量PCR法检测端粒酶活性及h TERT的表达情况。Annexin V/PI双染检测细胞凋亡。结果:mi RNA表达框架转染48 h后,h TERT的表达明显下降,端粒酶活性明显减低,K562细胞凋亡率增加。结论:靶向h TERT的mi RNA表达框架能够有效干扰h TERT的表达,抑制端粒酶活性,诱导K562细胞的凋亡。以mi RNA表达框架为基础的RNAi技术,有望成为分子水平治疗慢性髓系白血病的有效工具。

摘要：目的 探讨PICU危重患儿护理评估单对急危重症患儿的早期识别效果,提高护士护理干预和应急能力,保障患儿生命安全。方法 以715例急危重患儿为实验组,采用PICU危重患儿护理评估单;对照组纳入698例急危重患儿,采用常规护理评估流程。比较2组患儿的PICU平均住院日,抢救成功率和不良事件发生率。结果 实验组患儿的平均住院日、不良事件发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组患儿的抢救成功率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 PICU护士在临床利用PICU危重患儿护理评估单早期识别急危重患儿,可以避免因识别时机过晚或治疗不当而导致病情恶化的不良后果,提高了护士的护理评估和干预能力,降低了患儿发生病情变化的风险。此外,为抢救急危重患儿赢得了宝贵的时间,保证了患儿的生命安全,提高了患儿的生存质量。

摘要：目的为了提高导管相关性血流感染(catheter-related blood stream infection,CRBSI)的防控质量,根据《2011年血管内导管相关感染预防指南》和中华护理学会静脉治疗护理专业委员会《2011年输液治疗护理实践指南与实施细则》,结合科室临床实际,设计了儿科重症监护病房(Pediatric intensive care unit,PICU)导管相关性血流感染防控查检单(简称查检单)。查检单可以在短时间内对重要环节进行质量检查,指导医护人员在临床实践中进行质量查检,以提高护理管理质量,以保证患儿安全。方法 2015年10月~2016月9月,将查检单应用所有中心静脉置管的患儿,对中心静脉置管相关性血流感染防控措施进行每日查检,观察中心静脉导管使用率及每千导管日感染率。结果根据查检单配备与指南相适应的物品、制订标准化的操作流程及建立多学科协作如X光机确定导管位置等措施来克服中心静脉置管困难,从而缩短了中心静脉置管的时间和对减少患儿机械性损伤而降低置管并发症发生率。使用查检单干预后,试验组较对照组导管使用率下降(P<0.05),感染率及并发症的发生率均交对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用查检单,有助于提高PICU中心静脉置管相关性血流感染的控制质量。

摘要：目的构建基于人源性miRNA-30,针对EGFP基因的RNAi表达框架并验证其有效性。方法融合PCR构建RNAi表达框架,经凝胶电泳、测序比对及二级结构预测后,将该表达框架与p EGFP-N2质粒共转染A549、HCT116及HEK-293细胞,48 h后倒置荧光显微镜观察EGFP的表达情况并用流式细胞仪检测平均荧光强度。结果凝胶电泳和测序比对均显示RNAi表达框架与设计的相符,二级结构预测显示,新型RNAi表达框架与人源性miRNA-30的二级结构高度相似;共转染该表达框架与p EGFP-N2质粒48 h后,倒置荧光显微镜观察结果显示,3种细胞的荧光强度均明显减弱,流式细胞仪检测结果显示,3种细胞中共转染组与单独转染组相比平均荧光强度的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论新型RNAi表达框架构建成功,且能有效干扰EGFP在A549,HCT116和HEK-293细胞中的表达。