摘要：目的　了解广州地区不同肝病患者肝组织中SEN V的检出情况。方法　由GenBank下载SEN V序列 ,自行设计原位PCR引物 ,检测 2 0例肝病患者肝组织中的SEN VDNA。结果　在6例非甲至非戊型肝炎患者中发现 2例SEN VDNA阳性 ,该 2例均为急性感染病例。另外 8例乙型肝炎及 6例其他肝病 (自身免疫性疾病 2例、DubinJohnson综合征 1例、脂肪肝 1例、原发性胆汁性肝硬化 1例、药物性肝损害 1例 )SEN VDNA检测阴性。SEN VDNA主要散在分布于胞浆 ,部分在胞核内及汇管区 ,有细胞融合现象 ,阳性细胞占总细胞的 3%～ 10 %。结论　广州地区急性非甲至非戊型肝炎病例肝组织中有SEN VDNA存在 ,该病毒可能引起肝损害。

摘要：目的:建立检测SEN病毒(SENV)D和H基因型的聚合酶链反应(PCR)方法,并将其应用到流行调查。方法:从GeneBank下载SENV序列,在SENV开放读码框Ⅰ的高度保守序列内自行设计外引物,参考文献报道合成SENV D型和H型的型特异性引物作为内引物,建立检测SENV D型和H型的巢式PCR方法,并对深圳地区192名健康体检人群、48例急性甲肝患者、176例慢性乙肝患者、98例慢性丙肝患者和38例非甲-戊型肝炎患者的血清进行检测。部分阳性PCR产物进行克隆和DNA序列分析。结果:巢式PCR方法的敏感性及特异性均好。SENV D和/或H型在健康成人、急性甲肝、慢性乙肝、慢性丙肝和非甲-戊型肝炎患者中的总感染率分别为30.7％、37.5％、64.8％、57.1％和 44.7％。SENV D和/或H型在健康人群中的感染率低于慢性乙肝患者和慢性丙肝患者(P0.05)。结论:巢式PCR方法可用于检测SENV感染,深圳地区健康人群和急、慢性肝炎患者中存在SENV感染。SENV可能与HBV和HCV有相似的传播途径,其致病性有待进一步研究阐明。

摘要：目的：了解新型肝炎病毒—ＴＴ病毒在中国的流行情况，探讨其核酸变异性。方法：收集１９例健康体检发现谷丙转氨酶升高者的血清标本，采用ＰＣＲ方法检测ＴＴ病毒的ＤＮＡ。所得ＰＣＲ产物再采用限制性片段长度多态性分析和ＤＮＡ序列分析方法进行验证。最后将测序结果与ＧｅｎＢａｎｋ中的一些分离株进行比较，分析它们的同源性。结果：１９例转氨酶升高者中，２例ＰＣＲ检测呈阳性反应，其产物经限制性片段长度多态性分析证实为特异性产物。ＤＮＡ序列分析显示，２个阳性产物间的核酸同源性为９８７％，与Ｔａｋａｈａｓｈｉ等分离株和Ｏｋａｍｏｔｏ等分离株相比，同源性分别为９８７％和８９２％。两个ＴＴＶＤＮＡ片段中均存在精氨酸取代丝氨酸变异。结论：在中国广东人群中存在ＴＴ病毒感染，其核酸序列与Ｔａｋａｈａｓｈｉ等在日本得到的分离株高度同源。因而，设计ＰＣＲ引物时宜选择Ｔａｋａｈａｓｈｉ等分离株为标准。精氨酸取代丝氨酸变异的意义需进一步研究。

摘要：目的　建立引物长度不对称PCR制备单链DNA探针技术 ,评价单链探针进行斑点杂交的优越性。方法　设计 1对引物 ,其中 1条引物长度为 34bp ,复性温度为 75 2℃ ,另 1条为 2 0bp ,复性温度为 5 5 7℃。首先以 5 2℃的复性温度进行双向对数扩增 ,获得一定数量的双链DNA ,再以 72℃的复性温度进行单向扩增 ,获得单链DNA片段。以含HBVS基因片段的质粒为模板 ,在PCR体系中加入地高辛标记核苷酸直接制备探针 ,并收集 4 0份乙型肝炎患者的血清进行斑点杂交检测。结果　采用引物长度不对称PCR可成功地制备出单链探针且重复性好。对 4 0份乙型肝炎患者血清进行斑点杂交检测 ,HBVDNA检出率为 4 0 %。双链探针和单链探针的检出率一样 ,但单链探针的斑点更清晰 ,背景更好。结论　引物长度不对称PCR可能成为制备单链DNA片段或探针的简便而有效方法。单链探针具有高效和简便特点 。

摘要：目的　了解新型肝炎病毒输血传播病毒 (transfusiontransmittedvirus,TTV)在原发性肝癌 (PLC)患者中的感染状况。方法　在TTV长的ORF保守区设计引物 ,建立巢式聚合酶链反应 (PCR)技术 ,检测了 15 1例原发性肝癌患者血清中TTVDNA。结果　 15 1例原发性肝癌患者中有 2 8例TTVDNA阳性 ,阳性率为 18 5 % ;而同时检测 12 5例正常人血清只有 3例TTV阳性 ,阳性率为 2 4 %。结论　TTV在原发性肝癌患者中存在 。

摘要：目的了解中山地区不同类型的病毒性肝炎患者SEN病毒的感染情况。方法设计合成SEN病毒D型和H型的型特异性引物,对乙肝病毒携带者73例、慢性乙肝124例、重症乙型肝炎58例、乙肝肝硬化63例、非甲-戊型肝炎患者57例和对照组健康体检者60人的血清进行套式PCR扩增。结果通过基因克隆和测序证实了基因扩增产物的特异性。非甲-戊型肝炎SEN病毒阳性率(66.67%)明显高于健康献血者(26.67%)(P0.05),但均显著高于乙肝病毒携带者(27.39%)和健康献血者(P0.05)。结论SEN病毒感染与非甲-戊型肝炎发病有一定的关系。SEN病毒感染可能与乙肝病毒感染的活动和加重有一定的关系。