摘要：目的了解重庆市血液病实验室质量控制的现状及需求。方法自行设计问卷,抽取重庆市各区县医院60家进行调查,主要调查内容涉及工作基础、规章制度、人员条件等问题。结果共发放60份问卷,有效问卷57份。研究对象中,仅14.04%为血液病专科实验室,大多数都能完成基本检验项目,66.67%有完整实验流程及标准操作规程(SOP)文件,人员以中级职称和本科学历为主。35.08%实验设备超过500万元,45.61%有专人检查记录。约45.61%出检验报告时会参考临床表现,并严格审签,大多数研究对象反应设备落后、人员缺乏,主要希望建立远程会诊系统和开展学习进修。结论重庆市各医院血液病实验室整体质量较好,建议加强全面质量控制,建设血液病应急救援系统,以提升实验室质量和水平。

摘要：目的　了解小剂量巨噬细胞炎症蛋白 1α(Macrophageinflammatoryprotein αMIP 1α)联合白细胞介素 8(Interleukin 8,IL 8)对人骨髓造血细胞集落形成的影响。方法　取人骨髓 ,根据随机单位组方差分析设计 ,将每例标本分为空白组 (不加MIP 1α和IL 8) ;10ng ml联合组 (加入 10ng ml的MIP 1α和IL 8) ;1ng ml联合组 (加入 1ng ml的MIP 1α和IL 8) ;单用MIP 1α组 (加入 2 0ng ml的MIP 1α) ;单用IL 8组 (加入 2 0ng ml的IL 8)。建立半固体培养体系 ,一定时间后 ,观察集落粒单细胞集落形成单位 (CFU GM)、红细胞集落形成单位 (CFU E)和混合集落 (CFU Mix)的形成情况。结果　 1ng ml的浓度下 ,相同浓度的MIP 1α与IL 8联合使用对人骨髓造血细胞集落的形成没有明显的抑制作用 ;而在 10ng ml的浓度下 ,两者联合使用则能明显地抑制人骨髓造血细胞集落的形成。两种因子单独使用 ,未见明显的集落形成抑制作用。结论　 10ng mlMIP 1α与IL

摘要：目的　了解小剂量巨噬细胞炎症蛋白 1α(Macrophageinflammatoryprotein α ,MIP 1α)联合白细胞介素 8(Inter leukin 8,IL 8)在大剂量化疗药物阿糖胞苷 (Ara C)存在的情况下 ,对正常造血干 /祖细胞的体外保护作用。方法　取患者骨髓 ,离心分离单个核细胞 ,根据随机单位组方差分析设计 (Therandomcompleteblockdesignvarianceanalysis) ,将每例标本分为空白组 (不加MIP 1α和IL 8) ;10ng/ml联合组 (加入 10ng/ml的MIP 1α和IL 8) ;1ng/ml联合组 (加入 1ng/ml的MIP 1α和IL 8) ;单用MIP 1α组 (加入 2 0ng/ml的MIP 1α) ;单用IL 8组 (加入 2 0ng/ml的IL 8)。将所得细胞培养在含IL 3和GM CSF的液体体系中 ,先后经MIP 1α和 /或IL 8以及大剂量Ara C处理 (以上步骤简称为“Ⅰ期处理”)。之后作胎盼蓝拒染实验 ,流式细胞仪计数各组CD3 4+ 细胞 ,Ⅱ期液体培养 ,集落培养 ,以了解经Ⅰ期处理后不同组别中正常造血干 /祖细胞的存活情况及增殖能力。部分标本在Ⅰ期处理时只经MIP 1α和 /或IL 8处理 ,不经Ara C处理 ,用流式细胞仪检测所得细胞的周期分布。结果　 10ng/ml浓度下MIP 1α与IL 8联合组中 ,无论是Ⅱ期液体培养细胞生长情况、集落生长情况 ,还是CD3 4+ 细胞计数 ,均高于其它组 ;而周期分析结果则表明 ,

摘要：目的构建人HIF-1α的miRNA干扰表达载体并转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞。方法设计合成针对人HIF-1α基因的miRNA前体寡核苷酸,通过退火成为双链DNA片段,以T4 DNA连接酶与线性化pcDNA(tm)6.2-GW/EmGFP-miR质粒连接,构建含HIF-1α前体miRNA的重组质粒。经测序鉴定后,通过脂质体介导转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞。结果经测序鉴定针对人HIF-1α基因的miRNA干扰质粒构建成功,并能够成功转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞。结论成功构建针对人HIF-1α基因的miRNA干扰质粒并转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞,为后续研究HIF-1α基因在人急性髓性白血病骨髓基质的功能奠定基础。

摘要：目的探讨JWA核酶基因转染对人骨髓基质细胞(BMSC)黏附功能的影响。方法设计合成JWA核酶基因并构建于逆转录病毒载体pLXSN上,转染体外培养的人BMSC(BMSC-JWARZ组),应用半定量RT-PCR法(sqRT-PCR)测定细胞内JWA mRNA的表达,流式细胞仪检测BMSC细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管黏附分子-1(VCAM-1)的表达,并检测共培养条件下BMSC对Jurkat细胞的黏附率及Jurkat细胞增殖变化。以pLXSN空载体转染的BMSC(BMSC-pLXSN组)及未转染细胞(BMSC组)为对照。结果BMSC-JWARZ组JWA mRNA表达量[吸光度(A)值]为0．187±0．045,较BMSC-pLXSN组(0．382±0．039)及BMSC组(0．366±0．048)显著降低;BMSC-JWARZ组细胞表面ICAM-1阳性细胞率为(16．11±3．93)％,较B-pLXSN组[(38．24±5．37)％]及BMSC组[(36．27±6．19)％]显著降低;BMSC-JWARZ组细胞表面VCAM-1阳性细胞率为(12．08±3．34)％,较BMSC- pLXSN组[(26．88±5．17)％]及BMSC组[(24．55±3．68)％]显著降低;B-JWARZ组细胞对Jurkat细胞的黏附率为(23．65±5．27)％,较BMSC-pLXSN组[(35．14±8．11)％]及BMSC组[(33．72±6．29)％]显著降低,与BMSC-JWARZ组细胞共培养的Jurkat细胞倍增时间为58．7 h,明显长于与BMSC-pLXSN组(44．1 h)及BMSC组(43．7 h)细胞共培养时。结论JWA核酶基凶转染可抑制人BMSC内JWA基因的表达,抑制骨髓基质细胞黏附功能。

摘要：目的构建针对人 HIF-1α的 miRNA 干扰表达载体并转染人急性髓性白血病骨髓基质细胞。方法设计合成针对人 HIF-1α基因的 miRNA 前体寡核苷酸,通过退火成为双链 DNA 片段,以 T4 DNA 连接酶与线性化 pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR 质粒连接,构建含 HIF-1α前体miRNA 的重组质粒。经测序鉴定后。

摘要：目的建立多重逆转录和半巢式PCR的方法检测急性髓性白血病(AML)多药耐药(MDR)基因mRNA表达。方法分别设计针对5种MDR基因和1种内参照基因的特异性引物,采用多重逆转录和半巢式PCR检测耐药细胞株HL60/VCR和难治性AML患者骨髓标本中的MDR基因mRNA表达。结果应用此多重逆转录和半巢式PCR反应系统,可以特异的在一个反应管内同时检测到5种耐药基因。结论该方法对于检测AML患者MDR基因mRNA表达具有快速、灵敏、简便等特点,能快速同时分析大量样本,对MDR研究、诊断和治疗有一定应用前景。