摘要：目的建立检测人外周血单个核淋巴细胞（PBMCs）中T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域（TIGIT）信使核糖核酸（mRNA）表达水平的相对定量方法,并探讨TIGIT在艾滋病病毒（HIV）感染者/艾滋病（AIDS）病人（简称HIV/AIDS病人）临床监测中的意义。方法设计基因TIGIT引物3对,并利用超声波-煮沸法提取人PBMCs总RNA,选用管家基因GAPDH作为内参,然后用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）进行反转录及扩增TIGIT基因。利用软件测定电泳条带的灰度值（IOD）,计算TIGIT mRNA的相对表达量。结果超声波-煮沸法提取的RNA纯度（A260/A280=1.71±0.056）优于超声波法（A260/A280=1.51±0.023）和煮沸法（A260/A280=1.375±0.078）;筛选出扩增条带清晰且单一的TIGIT引物;相对定量结果表明,TIGIT mRNA在HIV/AIDS病人中的相对表达量均数（0.520 4±0.067）显著低于健康人群（1.383±0.093）,差异有统计学意义（t=7.206,P=0.0167）。结论所建立的相对定量RT-PCR检测方法具有成本低、简单易行的优点,可应用于检测HIV/AIDS病人外周血中TIGIT mRNA的表达差异。

摘要：为进一步研究隐孢子虫的致病机理,对奶牛隐孢子虫感染组和阴性对照组采用分光光度计比色法测定各组奶牛血清若干生化指标。结果表明,感染组与对照组相比,血清肌酐(Cr)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(A)、尿素氮(BUN)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)等指标差异不显著(P(0.05);试验组总蛋白(TP)显著地高于对照组(P(0.05);试验组碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和一氧化氮(NO)极显著地高于对照组(P(0.01);试验组血糖(BG)和白蛋白与球蛋白比(A/G)值极显著地低于对照组(P(0.01)。

摘要：目的建立一种高度敏感和特异的人隐孢子虫的RT-PCR-ELISA检测方法。方法根据人隐孢子虫与其他隐孢子虫粘附蛋白p23基因的多重比对,设计一对引物(其中p1引物带有生物素标记)用来扩增含高变区目的片段;采用RT-PCR方法扩增目的片段,扩增产物与探针引物进行液相杂交,将杂交产物与微孔板上包被的链霉亲和素结合,再与辣根过氧化酶标记的抗地高辛抗体反应。用所建立的方法对22份临床样本进行检测,并与常规检测方法进行比较。结果所建立的RT-PCR-ELISA检测方法具有高特异性和敏感性,比常规的PCR方法灵敏度提高了100(0.08:8ng)左右。临床检测结果显示,该方法的检出率高达86%(19/22),而RT-PCR、蔗糖漂浮法和抗酸染色法的检出率仅为27%(6/22)、27%(6/22)和50%(11/22)。结论本试验成功建立了人隐孢子虫的RT-PCR-ELISA检测方法,检出率比常规检测方法高。

摘要：泰勒虫是一种危害动物的重要血液寄生性原虫,常寄生于牛、羊、骆驼和其他野生动物,在中国的东北、西北等地较为流行。采集安徽定远县某山羊场疑似焦虫病的山羊血样,首先采用血涂片法检查,再用Blood DNA&Tissue kit提取血液基因组,参照Kim和Wei的方法设计2对引物用于泰勒虫18S rRNA基因的扩增,并对该方法进行敏感性和特异性分析。结果显示:血涂片检查明显可见红细胞内有典型的虫体,大小为0.6~2μm,初步怀疑为泰勒虫(Theileria);PCR扩增可扩增出359 bp大小目的片段,与预期结果相一致;基因序列同源性表明,该泰勒虫分离株基因与已报道泰勒虫毒株(JQ926740.1)核苷酸同源性最高,可达99.72%;在遗传进化方面,所分离的泰勒虫和吕氏泰勒虫(Theileria luwenshuni)Nanjingdong(JQ926740.1)最接近,而且在一个分支上。本试验所建立的套式PCR具有良好的特异性,且敏感性较高,最低测出量是3.8 fg/μL。本次分离的羊血液原虫为吕氏泰勒虫。

摘要：为了开展曼氏迭宫绦虫(Spirometra mansoni)种系发育分析,本试验基于18S rRNA和5.8S rRNA基因保守区设计引物用于扩增包含18S rRNA、5.8S rRNA及核糖体内部转录间隔1区(ITS-1)的靶片段,对蛇体内分离的绦虫进行基因组DNA提取,然后采用PCR方法扩增目的基因,将所得序列进行测序比对并构建进化树分析。PCR结果显示,扩增片段大小为737 bp,序列经分析发现包括18S rRNA 17 bp,5.8S rRNA 421 bp,ITS-1片段为304 bp。同源性分析显示,其与猬迭宫绦虫同源性最高,高达86%;遗传进化树表明,其与猬迭宫绦虫广州株(FJ886754.1)最为接近,与微小膜壳绦虫(AF461124.1)关系最远。综上所述,本次分离的绦虫为曼氏迭宫绦虫,ITS-1基因可作为良好的分类工具区别不同种的迭宫绦虫。

摘要：羊口疮是由口疮病毒(orf virus,ORFV)引起的接触性、嗜上皮性的传染病。020基因是该病毒重要的酶活力调节蛋白。根据Gen Bank中020基因的序列设计引物,从ORFV-F10株感染的病料中提取DNA,PCR扩增获得目的基因。然后将其亚克隆至p ET-32a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒p ET-32a-ORF-020。鉴定正确后转化BL21感受态细胞,进行IPTG诱导表达。表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。最后将纯化的020蛋白免疫BALB/c雌鼠,制备多抗血清。SDS-PAGE结果表明,ORFV 020基因在体外获得正确表达,大小约37 k Da。Western-blot结果表明,制备的多抗血清能够与020蛋白发生特异性反应具有良好的反应原性。

摘要：新疆地处欧亚大陆腹地，中亚干旱中心，该地区属于典型的温带大陆性气候，年降水不到250mm，年蒸发量1700mm以上，水资源年径流量约750亿m^3（减去净出国水量）、其中地下水补充量370亿m^3，水资源短缺现象极为严重。在目前国家正在实施的西部大开发战略中，新疆具有重要的作用，西部大开发、生态环境建设最根本和切入点，而新疆要进行生态环境建设首先要解决水的问题，如何把有限的水资源在不同用水部门之间进行优化和合理配置，在不影响正常的生产、生活用水的情况下用于发展生态环境建设，足新疆发展面临的重要研究课题。新疆农业属于荒漠绿洲、灌溉农业，解决水资源短缺问题首先要从农业节水出发，发展高效、资源节约型的节水灌溉是新疆农业持续发展的先决条件，它不仅可提高水分利用率和作物产量，而且可促进生态环境的良性发展。

摘要：可行性研究是建设前期工作的重要步骤，是编制建设项目设计任务书的依据。对建设项目进行可行性研究是基本建设管理中的一项重要基础工作，是保证建设项目以最小的投资换取最佳经济效果的科学方法，可行性研究在项目投资决策和项目运作建设中具有十分重要的作用。