摘要：本文旨在论析加拿大华裔作家张翎最近五年来小说创作在艺术上引人注目的探索和变化。张翎在叙事结构上开始从以往时间上的纵深,即历史与现在的穿梭往返转变为空间、地理上的同时并置,在叙述形式上引入"它-叙述"的叙述模式,丰富叙述的艺术表现力。张翎作品的世界性由此在她新的艺术探索中得到深化,小说中的人物性格冲突体现了作家的文化翻译以及对文化对话的深沉思考。

摘要：本文旨在分析张翎的小说的创作特征,这一特征亦反映了后现代社会移民文学的一个重要特征—混合交错的文化视角,这一视角在艺术结构上表现为跨越家国、地域界限的空间变位和往返于现实和历史的时间交错,在艺术形式上表现为以深刻的“民族性”和“地域性”来体现世界性。

摘要：毕业设计是高等学校四年本科教学的最后一个环节,是检验学生学习成果和综合素质的手段,是培养学生理论联系实际能力的活动。结合对药学本科毕业设计的指导实践,分析了目前高校毕业设计的主要问题及具体原因,提出指导教师在提高思想认识后通过对设计选题、研究过程和写作等方面的正确指导来保障毕业设计质量的措施。

摘要：目的探讨Brevinin-2GHk(BR2GK)的二级结构、理化性质及抗菌活性,并揭示其抗菌作用机制。方法合成并鉴定BR2GK;圆二色谱测定BR2GK的二级结构和理化性质;二倍稀释法测定BR2GK的抗菌活性;共聚焦激光扫描显微镜(LSCM)和扫描电子显微镜(SEM)研究BR2GK的杀菌方式;小鼠红细胞检测BR2GK的溶血活性;等温滴定量热实验和表面等离子共振成像检测BR2GK与脂多糖的结合;生化试剂盒检测BR2GK的抗氧化能力。结果合成的BR2GK经高效液相色谱(HPLC)纯化,纯度≥95%,并通过质谱进行确定。圆二色谱分析显示BR2GK具有阳离子抗菌肽的基本特征,在SDS溶液中以α-螺旋结构为主。抗菌活性测定显示BR2GK对多种菌株均具有抑制和杀灭活性,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)达到2.76μmol/L。LSCM和SEM观察到BR2GK使细菌细胞膜受损,细菌肿涨、收缩和变形,并渗出大量内容物,但在具有抗菌活性的浓度下对红细胞无溶血作用。等温滴定量热实验显示BR2GK与脂多糖的结合亲和力KD为18.2±0.8μmol/L。抗氧化测试结果显示,BR2GK以浓度依赖的方式清除NO(P<0.01)。BR2GK对ABTS和DPPH自由基清除的反应快速,当浓度为40μmol/L时,在1 min内分别清除了73.51%的ABTS和90.32%的DPPH。结论BR2GK具有良好的广谱抗菌活性,且不会导致溶血,此外还能结合脂多糖,并具有较强的抗氧化能力;BR2GK对设计合成具有更强抗菌活性和更低细胞毒性的抗菌肽具有重要的指导意义。

摘要：基于猪瘟病毒主要保护性抗原———E2囊膜糖蛋白有两个相对独立的抗原结构单位———B C抗原区和A D抗原区 ,设计引物扩增编码猪瘟病毒E2蛋白B C抗原区的基因 ,将大小为2 61bp的PCR产物插入含有强启动子PAOX1和α MF信号肽序列的巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαC中 ,构建成重组质粒pPICZα BC ,酶切线性化后电穿孔导入巴斯德毕赤酵母菌X3 3 中 ,经ZeocinTM 筛选得到 3株高拷贝转化子 ,甲醇诱导表达 ,SDS PAGE和Westernblot及ELISA试验表明 ,酵母培养上清液中含有具有良好反应原性的E2蛋白。

摘要：根据GenBank公布的日本脑炎病毒 (Japaneseencephalitisvirus ,JEV)SA14 14 2减毒株的核苷酸序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,应用RT PCR方法扩增出编码JEV囊膜蛋白抗原域Ⅲ的基因 (EⅢ) ,将其连接入pMD18 T载体 ,经测序后克隆入原核表达载体pET 32a (+) ,构建原核表达载体pET EⅢ 。阳性质粒转化感受态大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导 ,JEV EⅢ 基因获得表达 ,经细胞定位分析 ,目的蛋白以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变IPTG的浓度和诱导时间 ,确定了表达EⅢ 蛋白的最佳诱导条件 :IPTG终浓度为 0 1mmol·L-1,诱导时间为 3h。在大肠杆菌中的最高表达量占菌体总蛋白的 5 4 9%。Western blot分析表明表达产物具有良好的免疫学活性。利用纯化的表达产物作抗原包被酶标板 ,可以明显地区分JEV阴、阳性血清 ,并且不与猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒、猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒的阳性血清发生反应。结论 :重组JEVEⅢ 蛋白可以用于检测猪血清中JEV抗体水平。

摘要：阅读教学是语文教学的一个重要环节.每次教新课之前,我都让学生对课文先进行阅读理解,每篇课文设计10个问题,并作回答.如在教学一文时,我让学生对小麻雀最后的结局进行想像,结果有的学生想像小麻雀死了,写道:'我'含泪地把它掩埋在葱郁的山上,每年都要送上一些食物和水,祈求小麻雀永远平安快乐.

摘要：基于猪瘟病毒主要保护性抗原 E2 囊膜糖蛋白有两个相对独立的抗原结构单位--B/C 抗原区和 A/D 抗原区,设计一对特异性的引物扩增猪瘟病毒 E2 蛋白的 A/D 抗原区基因, 并将 PCR 产物克隆入含有强启动子 PAOX1和α-MF 信号肽序列的巴斯德毕赤酵母表达载体 pPICZαC 中,构建成重组质粒 pPICZα-AD,酶切线性化后电穿孔导入巴斯德毕赤酵母 X33菌中,经 ZeocinTM筛选得到 5 株高拷贝转化子,甲醇诱导表达。SDS-PAGE 和 Western blot试验表明酵母培养上清液中含有具有良好反应原性的 E2 蛋白,蛋白表达量达 175.8μg/mL。N-糖基化分析显示该表达蛋白在分泌过程中发生糖基化。该研究为研制防治猪瘟的亚单位疫苗与诊断试剂盒奠定基础。

摘要：应用 Pichia 酵母表达系统高效分泌表达了传染性传染性法氏囊病病毒 vp2 基因片段。首先用 Primer5.0 设计 1 对引物 P1、P2,以插入 IBDV vp2 基因的 PMD18-T-VP2 载体为模板,扩增出带有终止密码子的 1.4 kb 片段,将此片段正向亚克隆到酵母表达载体pPICZα-A上,将构建好的重组载体pPICZα-A-VP2用SacⅠ内切酶线性化后,电击转化整合入 Pichia PastorisX-33 酵母菌,经高浓度 ZeocinTM 筛选、表型鉴定、诱导表达及表达产物的鉴定,得到高效表达 vp2 基因的酵母工程菌 X-33/ pPICZα-A-VP2。工程菌 72h 培养上清的 SDS-PAGE 电泳与免疫印迹结果显示,vp2 基因表达产物大小约为 55 kDa,比预期的 41kDa 大。凝胶薄层扫描结合 Bradford 蛋白质总含量测定结果表明,表达产物占工程菌培养上清总蛋白的 28%,表达量可达 23 mg/ L。间接 ELISA 结果表明重组表达产物能够有效地区分法氏囊病病毒标准阳性与阴性血清。