摘要：背景:去细胞处理的猪主动脉瓣膜植入人体后发生了免疫排斥反应,分析引起免疫排斥反应的原因是由于猪瓣膜的细胞外基质与宿主发生接触引起了免疫激活。目的:试图将人自身的细胞外基质履盖去细胞猪瓣膜表面起到隔离猪瓣膜与宿主血液成分接触的作用。同时应用免疫组化的方法验证人细胞外基质覆盖瓣膜的效果。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-08/2009-04在解放军第二军医大学长海医院胸心外科实验室完成。材料:新鲜猪心脏瓣膜取自上海五丰上食肉联厂,采用酶消化法将猪主动脉瓣叶行脱细胞处理。密度梯度离心法从健康志愿者骨髓中获取骨髓基质干细胞。方法:用人细胞外基质包被猪去细胞瓣膜支架来构建组织工程瓣膜,再应用前期制备的抗人细胞外基质单克隆抗体,采用免疫组织化学染色鉴定人细胞外基质在体外构建的组织工程瓣膜上的黏附情况。以未构建的去细胞猪瓣叶为对照组。主要观察指标:①组织工程瓣膜上种子细胞的黏附和生长情况。②免疫组织化学法检测人细胞外基质在瓣膜上覆盖的效果。结果:光镜下观察瓣膜表面均形成了细胞层。扫描电镜所见细胞排列欠规则,未完全覆盖去细胞瓣叶表面,可见裸露的瓣膜支架。免疫组织化学方法检测构建的瓣膜表面呈阳性反应证明有人的细胞外基质黏附,而对照组呈阴性证明了检测方法具有特异性。结论:体外构建的组织工程瓣膜上检测到有人的细胞外基质黏附。

摘要：背景:在去细胞猪瓣膜(Synergraft瓣膜)的临床应用时发现异种的细胞外基质引发了人体一个强烈的炎症反应。早期的炎症反应严重地削弱了瓣膜内壁的基质结构,导致了移植物的结构破坏及衰败。从Synergraft瓣膜的事件中认识到猪去细胞瓣膜仍然具有免疫原性,尤其是在儿童患者中这种免疫反应会更强烈。因此对于细胞外基质蛋白引起的免疫排斥反应仍需要进一步的研究。目的:通过生物信息学的方法找到人与猪细胞外基质蛋白的基因序列差异,并制备抗体验证基质的免疫原性。设计、时间及地点:以Ⅳ型胶原基质为观察对象进行人、猪细胞外基质基因差异性的对比研究。于2008-06/2009-05在解放军第二军医大学长海医院胸心外科实验室完成。材料:新鲜猪瓣膜由上海五丰上食肉联厂提供,去细胞猪瓣膜、杂交瘤细胞和单克隆抗体由长海医院胸心外科实验室制备。方法:通过比较人、猪、鼠基因序列之间的相似区域和保守性位点,寻找有进化关系基因序列之间共同的保守区域、位点和序列差异,探索导致它们产生共同功能的基因序列以及基因序列间的差异片段。应用制备的抗猪Ⅳ型胶原单克隆抗体,采用免疫组化染色鉴定猪去细胞瓣膜上的猪瓣膜自身的细胞外基质存留情况。主要观察指标:Ⅳ型胶原基因序列差异分析结果、自制抗体有效性的免疫组化测试、自制抗体对猪去细胞瓣膜Ⅳ型胶原的检测结果。结果:通过基因比对的方法找到了人与猪Ⅳ型胶原的基因序列差异。通过杂交瘤技术成功制备检测细胞外基质的单克隆抗体;用免疫组化的方法检测到猪去细胞瓣膜上有猪的细胞外基质存留。结论:猪去细胞瓣膜支架上检测到有猪的细胞外基质存留,并且具有免疫原性。

摘要：目的 评价自主研制的新型高分子材料介入肺动脉瓣膜动物体内原位置换后的中期实验效果.方法 选用超微孔膨体聚四氟乙烯（ePTFE）材料制作成三叶球囊扩张型介入瓣膜,选用牛心包介入瓣膜作对照.雄性羊12只,体质量（22.1±2.3）kg,10只置入高分子材料瓣膜（PPHV）,2只置入对照瓣.右侧开胸经导管经右心室心尖途径原位置换肺动脉瓣.术后随访12周,通过超声心动图、胸部CT、心血管造影、尸检等对介入瓣膜进行中期评价.结果 两枚PPHV未成功原位移植,其余10只羊手术获得成功.术后1只置入PPHV的羊因肺部感染死亡,其余9只存活到随访终点.超声心动图提示,术后12周时PPHV均无明显反流,瓣膜峰值跨瓣压差16～38 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）,平均（28.2±8.0）mmHg;牛心包瓣峰值跨瓣压差分别为16 mmHg和21 mmHg.术后12周胸部CT、心血管造影提示所有人工心脏瓣膜均正常工作,支架无移位或变形.尸检结果提示：术后12周时ePTFE瓣叶无降解或损伤,大部分保持光滑,无血栓、钙化,但密封套囊、瓣叶流出面根部、瓣窦底部、3个瓣叶交界处有血管翳增生.结论 超微孔ePTFE介入肺动脉瓣膜动物体内原位置换后中期效果良好,PPHV有良好的抗组织粘附性能,有良好的抗降解、抗血栓、抗钙化和生物力学性能,血流动力学参数与牛心包对照瓣相当.局部血管翳增生可能通过优化瓣膜设计来改善.

摘要：本文采用ANSYS软件对一船用辅机浮筏的固有振动特性、隔振效果和抗冲击性能进行了数值分析。浮筏装配后对其隔振效果进行了测试 ,测试结果表明本文的数值分析方法是可信的 ,所得结论可供工程设计参考。

摘要：筒状物是日常生活当中非常常见的一种物体形状,采用波叠加法对其进行了声辐射计算,选用了3种虚源来计算,分别是单一简单虚源、双简单虚源以及相似缩比虚源。另外,还对双简单虚源位置以及相似缩比虚源缩比因子对计算结果的影响进行了讨论。结果表明:单一简单虚源很难保证较高的计算精度,而采用双虚源同时虚源位置放置恰当则能获得很好的计算精度,采用与计算模型相似的缩比模型作为虚源,同样也能获得较好的计算精度。由于双虚源情况对虚源位置有一定的要求,而相似缩比模型作为虚源则不会遇到位置的问题,因此对于此类结构可以采用相似缩比模型作为虚源来计算声辐射。

摘要：传统的波叠加法是边界元法的有效替代方法,其具有计算速度快计算精度较高等优点,但是也有复杂模型的建立较困难,以及对模型适应性较差等缺点。为了克服传统波叠加法的缺点,从而使其能够计算较为复杂模型的声辐射,将三维数字空间方法与传统波叠加法结合,因为三维数字空间方法具有建模迅速,对模型适应性很好等优点。分别采用边界表示法和体积表示法建模,且通过简单算例计算表明,采用这两种方法与传统波叠加法结合计算外场声辐射是完全可行的,并且结果的精确度相对较高,采用边界表示法的效率相对较高。

摘要：舱壁结构参数选择对舱壁振动性能有直接影响。为减小舱壁振动,采用有限元法,选择舱壁板厚度、加强筋数量、加强筋截面大小为变化的结构参数,分析振动随激振力频率、激振力作用方向、舱壁结构参数的变化规律,得到在动载荷作用下,舱壁振动的均方法向速度频响曲线,并以此为依据,设计了潜艇舱壁的结构形式和结构参数。优化的结果可以为舱壁结构参数选择提供理论依据。

摘要：目的通过报道11个医疗中心完成的50例临床试验结果,分析和评价中国制造的HeartCon型植入式第三代磁液悬浮左心室辅助装置(LVAD)用于治疗终末期心力衰竭(ESHF)的安全性和有效性。方法本试验系依前瞻性、多中心和单组目标值法设计的多中心临床试验。50例ESHF受试者竞争入组,在11个中心接受HeartCon辅助治疗。主要有效性指标为生存率。受试者在植入HeartCon后90天内出现过渡到心脏移植或心功能恢复停止辅助、使用HeartCon辅助满90天情况之一被认为生存,目标生存率为60%。其他观察指标包括植入成功率、病死率、泵失功或因失败需更换或紧急心脏移植。结果50例均成功接受LVAD植入手术,其中46例带泵满90天,1例过渡到心脏移植,3例发生泵血栓(其中2例接受血泵置换术继续带泵生存满90天,另1例接受紧急心脏移植)。无脱落受试者。植入HeartCon后满90天的生存率为100%。用全集分析和符合方案集分析的带泵生存率分别为96.00%和95.92%,均高于目标值60%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论本研究是中国最大宗样本量的应用国产第三代LVAD治疗ESHF患者的多中心临床试验,结果表明HeartCon是一种安全有效的LVAD。

摘要：目的:构建靶向人BRG1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并验证其沉默效率。方法:设计3个针对人BRG1基因的特异性shRNA序列(shBRG1),构建于pLKO.1慢病毒载体中,并与psPAX2和pMD2.G质粒共同转染293T细胞以包装成慢病毒颗粒。将包装好的慢病毒感染人主动脉平滑肌细胞(HASMC),应用实时荧光定量PCR和western blot检测BRG1 mRNA和蛋白表达水平,判断其沉默效率。结果:3种shBRG1干扰序列均成功插入慢病毒载体中且测序正确,3种慢病毒均可有效降低BRG1 mRNA表达水平(P均<0.01)。其中shBRG1-3的沉默效率最高,其感染HASMC后BRG1蛋白表达水平较对照组显著下降(P<0.01)。结论:靶向人BRG1基因的shRNA慢病毒表达载体构建成功,shBRG1-3慢病毒能够有效降低BRG1 mRNA和蛋白表达水平。

摘要：目的构建介导血管生长素(Angiogenin,ANG)短发夹RNA(ShorthairpinRNA,shRNA)表达的真核质粒载体,研究RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对食管癌细胞株TE-1中ANG表达的抑制作用。方法依据Tuschl等设计原则,以ANG为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA片段序列,经退火成互补双链,再克隆到载体pRNA-H1.1/Neo中构建重组质粒pRNA-H1.1/Neo-ANGshRNA。脂质体法转染重组质粒至食管癌TE-1细胞,以空质粒(pRNA-H1.1/Neo)转染为对照;半定量RT-PCR法及蛋白质印迹法分别观察TE-1细胞中ANG在核酸和蛋白水平表达量改变。结果①成功构建带ANG靶向的shRNA真核表达载体(pRNA-H1.1/Neo-ANGshRNA);②pRNA-H1.1/Neo-ANGshRNA转染TE-1细胞后,ANG在核酸和蛋白水平表达均较空载体pRNA-H1.1/Neo转染的对照组显著下降。结论成功构建真核表达质粒介导的ANG靶向RNA干扰重组质粒,转染TE-1细胞后能有效抑制ANG表达,为下一步利用RNAi技术抑制肿瘤血管形成以及局部侵袭和远处转移提供研究基础。