摘要：高职院校学生的学习能力差、知识点掌握不牢固、接受新知识的能力弱、上课注意力不集中,因此在进行授课时,应该摒弃传统的“以教师为中心”的教授方式,转为“以学生为中心”。采用案例教学法、项目驱动教学法和参与式教学法等多样化教学手段,用学生感兴趣的案例,用学生能听懂的语言,充分调动学生的积极性,加深学生对知识点的理解与记忆,让课堂变成有趣的课堂。

摘要：“十四五”规划明确提出要深入推进教育数字化发展,将智慧教育列入十大数字化应用场景。随着我国高职院校录取政策的调整,高职生源结构呈现多元化的趋势,使得教学难度大大提高。因此,线上线下混合式及分层教学是未来高校教学模式改革的方向之一。以“生物化学”课程为例,以课堂派+MOOC为教学平台,随机选取广东岭南职业技术学院2022级助产专业两个班学生为研究对象。实验组采用混合式及分层教学设计,对照组采用传统教学设计。实践结果表明,通过灵活多变的教学形式及考核方式,在显著提高教学效果的同时提升了学生的学习效率和成绩优秀率。基于实践中发现的问题,未来可以从多课程知识融合等方面完善“生物化学”课程的混合式及分层教学模式。

摘要：目的:建立基于环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)的蕲蛇快速检测方法,实现中药蕲蛇的可视化快速鉴定。方法:依据《中华人民共和国药典》收录的蕲蛇特异性序列设计4条LAMP引物(2条内引物、2条外引物),建立蕲蛇LAMP的鉴别方法,对比《中华人民共和国药典》收录的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)方法的检测结果,评价LAMP的鉴别方法的特异性和灵敏度,并采用LAMP鉴别方法和PCR方法鉴别市售蕲蛇的真伪。结果:使用该引物建立的蕲蛇LAMP鉴别方法对蕲蛇对照药材和4份市售蕲蛇样本产生扩增,对1份市售蕲蛇样本和8种蕲蛇混淆品样本无扩增,与PCR鉴别结果一致,说明蕲蛇的LAMP鉴别方法具有良好的特异性。LAMP检测的灵敏度在DNA水平上达到0.004 ng·μL^(-1),PCR检测的灵敏度为0.4 ng·μL^(-1),因而LAMP检测具有较高的灵敏度。结论:本研究建立的LAMP检测方法可以应用于中药材蕲蛇真伪的快速鉴别。

摘要：本研究旨在建立食品中产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的快速检测方法。基于产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌合成酶基因cesB靶基因,设计4条特异性引物(2条内引物、2条外引物),建立环介导等温扩增技术(LAMP)。然后采用2株产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌、19株蜡样芽胞杆菌和41株非蜡样芽胞杆菌验证了该LAMP具有很好的特异性。LAMP检测的灵敏度在DNA水平上达到1.49 pg/μL,纯菌的灵敏度为5×10~3 cfu/mL。人工污染米饭样品,当起始污染量为2 cfu/g时,37℃增菌培养6 h,用试剂盒法和煮沸法提取的DNA,都可以检出产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌。采用此LAMP方法进行了72份实际样品的检测,检出2份产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌阳性样品,与传统方法一致。因此,本研究建立的LAMP检测方法可应用于食品中产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的快速特异检测。

摘要：以耐热核酸酶基因nuc、纤维蛋白原结合蛋白基因clfA和SmaI限制性酶切片段特异序列为靶基因,设计筛选引物,建立并优化了检测金黄色葡萄球菌(Staphylococus aureus,SA)的多重PCR体系。采用10株SA和46株非SA验证了该多重PCR具有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到1.197 3 ng。人工污染样品,当起始污染量为1.2个/g时,37℃增菌培养6 h即可检出。一共检测了43份样品,检出3份阳性样品,其中有2份阳性样品与传统方法一致,另外一份阳性样品用测序验证。作者建立的多重PCR方法可特异、快速地实现对SA的检测。

摘要：环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,简称LAMP)是利用能识别靶序列上6个位点的4个特殊设计的引物和一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在恒温条件下,特异、高效、快速地扩增核酸的新技术。该技术在1h内扩增效率可达到109-1010个数量级,扩增产物是一系列反向重复的靶序列构成的茎环结构和多环花椰菜样结构的DNA片段混合物,电泳后在凝胶上显现出由不同大小的区带组成的阶梯式图谱。近年来LAMP技术以其特异性强、等温灵敏、操作简单、产物易检测等优点已经应用于食品安全检测领域的多个方面。

摘要：旨在建立川贝母的快速真伪鉴别方法。比较分析川贝母保守性序列及其常见伪品的序列差异,设计了3套LAMP引物,评价了其特异性和灵敏度;利用该技术对市售川贝母样品进行检测,同时用《中华人民共和国药典》的聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)进行验证。结果表明,三套LAMP引物中,只有加了碱基突变的Set3的引物特异性强;使用Set3引物建立的川贝母LAMP检测方法在川贝母、暗紫贝母和太白贝母样品中显示阳性,在伊贝母、浙贝母、湖北贝母、平贝母等7种常见混淆品中显示阴性,方法特异性良好;LAMP检测的灵敏度在DNA水平上达到32μg/L。采用此LAMP方法进行了30份市售川贝母样品的鉴定,本法实验结果与药典收录的PCR-RFLP法实验结果一致。建立的川贝母LAMP快速鉴别法适用于川贝母及其常见伪品的真伪鉴别。

摘要：针对阪崎肠杆菌的ompA基因设计4条特异性引物(2条内引物、2条外引物),建立一种快速检测阪崎肠杆菌的DNA环介导恒温扩增法(LAMP)。通过对2株阪崎肠杆菌标准菌株、24株阪崎肠杆菌分离株和18株非阪崎肠杆菌测试,结果表明此方法具有很高的特异性;对其灵敏度进行检验,发现该方法的最低检测限可以达到8CFU/mL,具有较好的敏感性。在1份实验室能力验证盲样和26份实际奶粉样品中应用发现,该方法与传统生化方法结果吻合,具有较好的可靠性。

摘要：目的:建立二重PCR方法特异检测食品中的单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)。方法:以编码内化素B的inlB基因和以编码LM溶血素O的hly基因为靶基因,设计筛选引物,建立二重PCR体系。对5株LM和35株非LM进行特异性检测。梯度稀释LM基因组DNA,以不同稀释度DNA作PCR扩增。在黑椒烤鸡样品中以不同菌量人工污染,增菌培养10 h,提取DNA进行PCR扩增。应用该方法对实际样品进行检测。结果:以inlB、hly为靶基因的2对引物对LM的检出有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到0.8769 ng。人工污染样品,当起始污染量为2.7×102cfu/g时,37℃增菌培养10 h即可检出。一共检测了55份食品样品,检出1份阳性样品,与传统方法一致。结论:建立了适用于食品中LM检测的特异二重PCR方法。