摘要：采用PCR-SSCP方法对猪CAST基因遗传多态性进行分析,并研究基因型与肉质性状和背膘厚的相关性。根据猪CAST基因的cDNA序列(M20160)设计7对引物,结果在F1/R1,F6/R6引物对扩增的片段上发现了多态性,并对纯合子进行测序,发现317位A→G突变,2042位G→C突变。基因型在不同猪种分布的多重比较结果表明,长白猪、大白猪和杜洛克猪与沂蒙黑猪和莱芜猪比较差异极显著(P0.05)。最小二乘分析结果表明,不同猪种比较,屠宰12h和24 h后肌肉温度、30 min和1 h后pH值及滴水损失差异显著(P<0.05);BBCC和BBDD单元型个体与其他单元型个体比较肌肉嫩度的差异显著(P<0.01),AACC和AADD单元型个体与其他单元型个体比较背膘厚的差异显著(P<0.01)。因此,推测CAST基因对猪肉品质及背膘厚存在一定的影响,将CAST基因应用于猪育种过程中的标记辅助选择将可以改善猪肉品质,加快猪的育种进程。

摘要：采用PCR-SSCP方法检测胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)基因外显子7,8,9的多态性,并分析其对初生重、断奶重、6月龄重和6月龄背膘厚的遗传效应。根据猪IGF2基因的DNA序列(AY044828)设计3对引物,结果在Ex8引物对扩增的片段上发现了多态性,并对纯合子进行测序,发现exon8的53位存在C→T转换,且检测到3种基因型(AA、AB、BB)。统计结果表明,3种基因型在各品种中的分布不一致,长白猪与大白猪比较,莱芜猪与大薄莲猪比较,沂蒙黑猪和里岔黑猪比较差异不显著(P>0.05);其他猪种间基因型分布的差异均显著(P0.05)。最小二乘分析结果表明,BB基因型个体同AA和AB基因型个体比较初生重的差异显著(PAA>BB;AA基因型个体同AB和BB基因型个体比较6月龄背膘厚的差异显著(PAB>AA。因此,推测IGF2基因对个体的初生重和胴体瘦肉率存在一定的影响,将IGF2基因应用于猪育种过程中的标记辅助选择可以加快猪的育种进程。

摘要：采用一种简便提取高质量DNA的方法,从大仓鼠肝脏组织中提取其总DNA,分别以人工合成的微卫星核心序列(GTG)5和(CA)8做单一引物,进行特异引物PCR反应。电泳检测后回收15条特异性片段。与被标记过的大仓鼠基因组DNA反向杂交结果表明,15个片段中(GTG)5-8、(CA)8-1b和(CA)8-5b产生了较强的阳性信号。我们依据3个片段的测序结果设计适合DIG标记的探针,该探针得到的大仓鼠不同地理种群个体的指纹图谱有较高的个体特异性和种群多态性,而且与传统的来源于其它生物重复序列的探针如33.6和33.15形成的指纹图谱相比得到的变异适中,便于统计。

摘要：采用PCR-SSCP方法检测猪胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,IGF2)基因外显子3多态性,分析其对初生重、断奶重、6月龄重和背膘厚的遗传效应.根据猪IGF2基因的DNA序列(AY044828)设计引物,结果在其扩增片段上检测到多态性,对纯合子进行测序,发现IGF2-ex3-A36T和IGF2-ex3-G109A两个多态性位点,并且这2个多态性位点完全连锁,检测到3种基因型(A36A/G109G,A36T/G109A和T36T/A109A).统计结果表明,基因型在各品种中分布不一致,长白猪和大白猪与莱芜猪、大薄莲猪、沂蒙黑猪和里岔黑猪比较基因型分布差异极显著(P0.05).固定效应模型分析结果表明,初生重和背膘厚基因型间差异显著(P0.05).最小二乘分析结果表明,A36A/G109G基因型个体同A36T/G109A和T36T/A109A基因型个体比较初生重和背膘厚的差异显著(PA36T/G109A>T36T/A109A.因此,推测IGF2基因对个体的初生重和胴体瘦肉率存在一定的影响,将IGF2基因应用于猪育种过程中的标记辅助选择,将可以改善猪肉品质,加快猪的育种进程.

摘要：以长白猪(73),大白猪(68),沂蒙黑猪(57)和莱芜猪(83)为研究对象,采用PCR-SSCP方法对猪MyoG基因遗传多态性进行分析,并研究基因型与初生重、日增重、肌肉嫩度和背膘厚的相关性.根据猪MyoG基因的DNA序列(M14331)设计引物,结果在内含子1扩增的片段上发现了一个多态性,检测到2个等位基因(A、B),3种基因型(AA、AB、BB),并对纯合子进行测序,发现2943位G→C突变.基因型在不同猪种分布的多重比较,结果表明,大白猪与长白猪、沂蒙黑猪和莱芜猪比较差异显著(P0.05).固定效应模型分析结果表明,初生重及嫩度基因型间差异显著(P0.05).最小二乘分析结果表明,BB基因型个体与AA基因型个体比较肌肉嫩度的差异显著(P<0.05),AA基因型个体与AB和BB基因型个体比较背膘厚的差异显著(P<0.05).因此,推测MyoG基因对猪肉品质、生长速度及背膘厚存在一定的影响,将MyoG基因应用于猪育种过程中的标记辅助选择将可以改善猪肉品质,提高生长速度,加快猪的育种进程.

摘要：基因组DNA的变异是种群遗传多态性研究的基础。PCR技术可以在反应管内经济快速地扩增特定DNA序列 ,在动物种群遗传多态性研究中的应用主要包括三个方面 :(1 )种群遗传多态位点的检测 ;(2 )基因定位或利用已经定位的单拷贝基因设计染色体位点特异的分子标记 ;(3 )与DNA测序技术相结合 。

摘要：为进一步改革生物化学的实验教学方法,提高理工科大学生实验能力与创新能力,在分析传统生物化学实验教学方法的不足与查阅大量文献的基础上,提出了实验课"3+1"教学法即实验教学过程在传统实验操作的基础上增加"进一步探究",主要是让学生进行自主创新实验的设计与操作。通过三届学生的教学实践与改进,发现该方法可以激发学生的学习兴趣、培养学生的实验能力、创新能力、帮助学生全面地认识生物化学的研究领域,有助于师生间的双向交流。

摘要：采用PCR-SSCP方法检测猪激素敏感脂肪酶(hormone sensitive lipase,HSL)基因外显子1的多态性,并分析其与初生重、断奶重、6月龄重和背膘厚的关联性。根据猪HSL基因的DNA序列(AJ000483)设计5对引物,结果在P5引物对扩增的片段上发现了多态性,并对纯合子进行测序,发现外显子1的874bp处存在G→A转换,且存在3种基因型(AA、AB、BB)。统计结果表明,3种基因型在各品种中的分布不一致,长白猪和大白猪与莱芜猪和沂蒙黑猪比较差异极显著(P0.05)。固定效应模型分析结果表明,背膘厚基因型间差异显著(P0.05)。最小二乘分析结果表明,BB基因型个体同AB和AA基因型个体比较背膘厚的差异显著(P<0.05),3种基因型在背膘厚的大小排列顺序为BB<AB<AA。因此,推测HSL基因对个体胴体瘦肉率存在一定的影响,将HSL基因应用于猪育种过程中的标记辅助选择可以加快猪的育种进程。

摘要：采用PCR-SSCP方法对莱芜猪、大蒲莲猪、沂蒙黑猪和里岔黑猪的肌细胞生成素(myogenin,MyoG)基因5'端进行单核苷酸多态性检测,并分析MyoG基因对猪的初生重、60日龄重、210日龄重,60～210日龄平均日增重和背膘厚的影响。根据猪MyoG基因5'端的DNA序列(U14331)设计3对引物,发现5-2引物对扩增的片段有多态性,且存在3种基因型(AA、AB、BB),并对纯合子进行测序,发现2080位G→A突变。χ2独立性检验表明,基因型频率在莱芜猪和大蒲莲猪与沂蒙黑猪和里岔黑猪间存在显著差异(P0.05)。最小二乘分析结果表明,BB基因型与其他两种基因型比较有较小的初生重和日增重,同AA和AB基因型比较差异极显著(PAB>BB。因此,推测基因型对个体的初生重和日增重存在一定的影响,选择带有A等位基因的个体有望提高个体的初生重和日增重。

摘要：根据毕赤酵母Pichia pastoris密码子偏爱性重编兔防御素基因(Neutrophils peptide-1,pNP-1),设计4条引物搭桥合成.将pNP-1克隆到pPICZα-A载体,使用同尾酶XhoⅠ和SalⅠ在重组载体上构建多价串联体[pNP-1(2×)]和[pNP-1(3×)],分别对这3个基因进行毕赤酵母表达,表达量依次为3.39、6.39和13.05μg/mL.重组蛋白经溴化氢切割后,对得到的活性产物进行抑菌试验,结果表明,重组pNP-1蛋白对苏云金杆菌Bacillus thuringiensis等革兰阳性菌(G+)及大肠埃希菌Escherichia coli等革兰阴性菌(G-)均有抑菌活性,但对白色念珠菌Candida albicans等真菌没有明显的抑菌活性.对pNP-1抑菌机理研究发现,细胞壁和DNA合成抑制剂对pNP-1抑菌活性有协同作用,而多种蛋白质和RNA合成抑制剂对pNP-1抑菌活性有抑制作用.