摘要：初步摸索大肠杆菌DH 5α生产核酸疫苗的发酵条件。通过均匀试验设计确定,当胰蛋白胨与酵母粉的质量比为1∶1.2,并且磷酸盐的加量较大时菌体的质粒产量较高。在菌体生长刚进入对数生长期时采用指数式流加葡萄糖与采用恒速流加葡萄糖,菌体得率相同,而产物收率前者高于后者。在菌体生长进入平稳期时将温度由37°C升高到42°C,在菌体密度没有改变的情况下,质粒产量得到提高,达到75 m g/L。

摘要：根据油菜茎基溃疡病菌Leptosphaeria maculans与其近似种ITS序列的差异,设计了检测***的引物Lmb3/R2和探针Probe-M,建立了***的实时荧光PCR检测方法。试验结果表明,来自加拿大、澳大利亚和乌克兰等国的22株***菌株都能得到阳性扩增,而供试的30株***菌株和6株其他菌株以及空白对照没有荧光信号的增加。该检测方法的灵敏度达到4 pg菌丝DNA,整个检测过程控制在4 h内,其快速、特异和灵敏的特点可以满足进境油菜籽样品的快速初检以及病菌分离物的快速鉴定。

摘要：研究了质粒复制的前体物质、蛋白质合成抑制剂及金属离子对核酸疫苗载体pVAX-44质粒拷贝数的影响。结果表明,在改良的LB培养基中分别添加谷氨酰胺、甘氨酸、天门冬氨酸和Fe3+时,单位菌体质粒含量分别达到5.88mg.g-1、7.15 mg.g-1、5.93 mg.g-1、7.38 mg.g-1,同时添加这几种物质时,质粒拷贝数可以得到进一步扩增。均匀设计实验结果表明,改良的LB培养基中含有1.6 g.L-1甘氨酸、1.0 g.L-1天门冬氨酸、0.2 g.L-1谷氨酰胺、0.4mmol.L-1Fe3+时,单位菌体质粒含量可达到9.11 mg.g-1,明显高于单独添加这几种物质时的质粒拷贝数。在此基础上加入0.1 g.L-1链霉素抑制蛋白质合成,单位菌体质粒含量可达到9.53 mg.g-1,较对照提高了56.25%。

摘要：研究了培养基组分对hCG核酸疫苗质粒拷贝数的影响。结果表明,复合培养基比合成培养基更利于hCG核酸疫苗质粒DNA的生产。通过均匀设计实验确定,当培养基中含有胰蛋白胨10g·L-1、酵母浸出粉8g·L-1、NaCl10g·L-1、甘油10g·L-1、KH2PO40.37g·L-1、K2HPO42.01g·L-1时,单位菌体质粒含量可达6.68mg·g-1;在此基础上添加乙酸2.0g·L-1、谷氨酰胺1.2g·L-1、甘氨酸1.0g·L-1、天门冬氨酸0.4g·L-1,可使质粒拷贝数进一步扩增,单位菌体质粒含量可达9.32mg·g-1,为LB培养基的5.12倍。