摘要：对呼和浩特市四子王旗某种羊场的疑似绵羊肺腺瘤病的4只病羊,通过临床诊断、病理组织学观察,PCR、RT-PCR和半巢式PCR技术对疑似病羊进行检测诊断。结果显示:(1)"小推车试验"时有鼻液流出;(2)剖检时可见肺肿大实变,切开肺脏时可见大量泡沫状液体从切面渗出;(3)病理组织学观察肺脏有大小不一的腺瘤灶,而且肺泡上皮细胞呈乳头状增生;(4)根据GenBank中登录的绵羊肺腺瘤病毒全序列(AF105220),设计合成3对特异性引物和3条巢式引物,经RT-PCR、PCR及半巢式PCR法扩增并测序,利用RT-PCR和PCR分别扩增出与预期大小一致的条带U3(175bp)、env(225bp)、gag(300bp),序列分析表明与引起该病的绵羊肺腺瘤病毒序列同源性较高,分别达97.2%、96.5%、94.4%。应用半巢式引物扩增片段分别为U3(133bp)、env(178bp)、gag(275bp)。经过以上方法确诊该羊场的疑似病例为绵阳肺腺瘤病。

摘要：以乌兰察布市某种羊场的疑似病羊为研究对象,采用临床诊断、镜检观察及PCR法检测患病羊是否患有绵羊肺腺瘤病。结果显示:①"小推车试验"时有鼻液流出;②剖检时可见肺实变,体积明显增大,表面出现大量形态不规则的灰白色结节,切开肺脏时可见大量泡沫状液体从切面渗出;③显微镜下观察,疑似患病羊的肺脏有大小不一的腺瘤灶,且肺泡上皮细胞呈乳头状增生,肺泡腔内充满巨噬细胞,病灶中央的细胞核溶解,胞浆中有空泡,呈坏死状;④根据GenBank中已发表的外源性绵羊肺腺瘤病毒的基因组全序列,设计合成3对特异性引物,对病料样品进行PCR扩增并将其产物测序,结果表明扩增出的片段为178bp、226bp、301bp,同源性分析表明这3段序列与引起该病的病原即绵羊肺腺瘤病毒基因组序列同源性最高分别为97.2%、96.5%、94.4%,与相对应的内源性病毒序列最高分别为73%、69.5%、85.4%,以上4方面诊断该病例为绵羊肺腺瘤病。其中所建立的PCR诊断方法具有快速、特异、敏感等特点,为绵羊肺腺瘤病的快速诊断提供了新的手段。