摘要：本研究旨在克隆绵羊CYP19基因卵巢启动子序列片段,构建真核表达载体,并在细胞水平检测其组织特异性表达情况。参考已知序列设计特异性引物,PCR扩增绵羊CYP19基因卵巢启动子1.1和0.5kb两个片段,并与已公布的序列进行同源性比较;将测序正确的两个片段分别定向克隆到去除CMV的pEGFP-N2载体骨架中,构建真核表达载体pCYP19-1.1-EGFP-N2和pCYP19-0.5-EGFP-N2,重组质粒在脂质体LipofectamineTMLTX+PLUS介导下,分别转染绵羊的颗粒细胞和胎儿成纤维细胞,并于转染后24、48和72h观察EGFP表达情况。结果表明,扩增获得片段与已公布序列高度同源;应用转录因子结合位点预测软件对所得序列分析表明,该扩增片段含有类似于TATA-box核心启动顺式元件,并含有多个潜在转录因子的结合位点。转染24h后,发现pCYP19-1.1-EGFP-N2在颗粒细胞可观测到绿色荧光表达,48h荧光细胞数量有所增加;转染72h时荧光细胞数最多;在胎儿成纤维细胞也有少量EGFP基因表达。pCYP19-0.5-EGFP-N2在颗粒细胞和成纤维细胞中均未检测到荧光。结果表明,扩增所得的绵羊CYP19基因卵巢启动子1.1kb片段可引导外源基因在颗粒细胞中的表达,可用于与繁殖相关的基因功能及转基因动物研究,但并非卵巢特异性启动子。

摘要：本试验对两个不同比例谷草颗粒与花生秧饲喂肉羊的育肥效果、产肉性能、血清指标和消化酶进行了研究。采用单因子试验设计,选择4月龄体况相似、健康无病的寒泊×小尾杂交公羊54只,平均初重为(33.18±4.89)kg,随机分为高谷草比例组(HMS组,谷草颗粒:花生秧=2∶1)与低谷草比例组(LMS组,谷草颗粒:花生秧=1∶2)2组,每组3个重复,每个重复9只。试验期为3个月,预饲期7 d。结果显示:(1)HMS组试验羊总增重和日增重均较LMS组提高13.01%(P 0.05);(2)育肥后期,HMS组血清中葡萄糖(GLU)显著高于LMS组(P 0.05);(3)HMS组十二指肠和空肠的糜蛋白酶(CRS)活性显著高于LMS组(P <0.05),HMS组十二指肠的胰蛋白酶(TRS)活性显著高于LMS组(P <0.05);HMS组纯利润高于LMS组(183.86元VS 134.58元)。添加高比例谷草可提高羔羊育肥增重效果,且对育肥消化生理无不良影响。

摘要：为建立绵羊线粒体基因组SNP的四引物扩增受阻突变体系(tetra-primer amplification refractory mutation system,Tetra-primer ARMS)PCR检测方法,选择小尾寒羊线粒体T1112C和C11606T2个SNP,在等位基因特异PCR基础上,根据错配原理设计4条引物,优化PCR反应体系,采用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。结果表明:T1112C位点检测中,所有个体均能扩增出569 bp最长片段的外引物产物(阳性对照),扩增出349 bp片段的个体为野生型,扩增出263 bp片段的个体为突变型。C11606T位点检测中,所有个体均能扩增出572 bp最长片段的外引物产物(阳性对照),扩增出408 bp片段的个体为野生型,扩增出213 bp片段的个体为突变型。在每个线粒体多态位点均检测到野生型和突变型2种基因型,没有发现异质性。应用Tetra-primer ARMS PCR方法,经一次PCR即可判定线粒体SNP位点的基因型,该方法快速、简便,可应用于绵羊线粒体SNP分型。

摘要：为研究全株玉米青贮日粮饲喂肉羊的育肥效果,选用70日龄黑头萨福克和小尾寒羊杂交一代断奶公羔40只,采用单因子随机区组设计,随机分为2组,每组均为20只,进行91 d育肥饲喂试验。试验组日粮为全株玉米青贮+精料+干草,对照组日粮为精料+干草,比较分析试验组和对照组投入产出比以及产肉性能、肉品质、血清中生长激素和生理生化指标。结果表明,试验组和对照组羔羊日增质量无显著差异(P>0.05),但只均净利润比对照组增加74.08元;试验组羊肉大理石花纹评分显著高于对照组(P0.05),可见以全株玉米青贮为基础日粮进行肉羊育肥可获得较好的经济效益。