摘要：为提高玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)NRRL 11379产达托霉素的能力,在实验室已有研究基础上对生产菌株进行癸酸钠抗性筛选,得到癸酸钠抗性株D1000-S3-2-P2000,经验证其能够耐受高癸酸钠浓度.此外,使用因子筛选和响应面设计对发酵培养基进行氨基酸、维生素、微量元素种类的筛选和优化,最终确定培养基组成为(g/L):酵母提取物11,(NH4)2Fe(SO4)2.6H2O 0.86,葡萄糖10.7,糊精72,糖蜜7.2,组氨酸1.7,天冬氨酸1.3,L-天冬酰胺0.74,硫辛酸0.007 92,ZnSO4.7H2O 0.55.利用此培养基进行摇瓶和发酵罐分批发酵培养得到达托霉素产量分别为42.38和411mg/L,分别是优化前的2.52倍和1.46倍.

摘要：为提高南极假丝酵母脂肪酶B（Candida antarcticalipase B,CALB）的表达量,根据毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子偏好性设计合成CALB基因,插入表达载体pPIC9K构建重组质粒pPIC9K-CALB.重组质粒转化毕赤酵母GS115,经过G418抗性筛选得到多拷贝转化子.摇瓶发酵120 h后上清液酶活力达到46 U/mL,通过金属螯合层析纯化发酵液将CALB纯化了5.23倍,比活力达到856.7 U/mg,去糖基化实验显示重组CALB比野生型CALB大5 ku.实验考察了不同反应温度、pH值和金属离子对重组CALB活性和稳定性的影响,发现重组CALB最适反应温度和pH分别为30℃和6.5,在pH 5.0~8.0之间以及40℃以下有较好稳定性,金属离子（10 mmol/L）Ca2＋,Zn2＋,Mn2＋有助于CALB酶活力的提高,而Cu2＋,Ag＋,Fe3＋强烈抑制酶催化反应.

摘要：依据毕赤酵母偏好密码子,设计合成长效人胰岛素原(human proinsulin,HPI)基因序列,所合成的HPI基因全长为200bp,并在其N端添加信号肽(EEAEAEAEPK)以提高目的蛋白表达.将改造后基因克隆到pPIC9K载体中,构建分泌表达型载体pPIC9K-HPI,转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中.用遗传霉素G418梯度筛选获得高拷贝菌株,在甲醇诱导下表达分子质量为7.87ku的HPI,利用金属螯合层析纯化蛋白质,胰蛋白酶酶切后利用人胰岛素试剂盒测得生物活性,HPI摇瓶最高产量可达35.4mg/L.该研究为获得大量长效胰岛素基因工程产品奠定研究基础.

摘要：研究了超临界CO2夹带乙醇流体从裂殖壶藻Schizochytrium sp.中提取富含DHA油脂的新工艺。基于气液相平衡性质,确定了夹带剂乙醇的添加范围,并对提取过程进行动力学分析,确定了二氧化碳的使用量。通过中心组合设计的响应面优化试验,获得了最佳提取工艺条件:温度52℃、压力38 MPa、乙醇摩尔比0.04。该条件下,微藻油脂的回收率约为88.2%,显著高于纯超临界CO 2萃取的回收率(71.9%)。根据Peng-Robinson方程考察了混合流体的密度变化对油脂溶解度的影响,部分解释了操作条件对油脂回收率的影响。脂肪酸组成分析显示,新工艺得到的油脂中的DHA质量分数约为39.9%,略高于传统工艺。由此可知,超临界CO 2夹带乙醇流体是一种极性范围广、溶解能力强的绿色提取介质,非常适用于中性微藻油脂的提取。

摘要：根据已报道的酵母苹果酸酶基因序列,利用CodeHop(Consensus Degenerate Hybrid Oligonucleotide Primers)软件设计两对简并引物,以斯达油脂酵母(*** CICC 1809)总DNA为模板做简并PCR,得到2个基因片段(ME1,ME2).对这2个目的片段进行测序,将结果翻译成氨基酸序列,blastp结果显示其中ME2片段为油脂酵母未报道苹果酸酶基因的序列(Gene Bank登录号GU348991),并对巢式PCR方法检验简并PCR结果的有效性进行了评估.