摘要：针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点编码基因片段(SBC,下同)设计合成1对引物,用PCR方法扩增SBC基因,将该基因片段定向插入到原核表达载体p ET-32a(+)中,构建原核表达载体p ET-32a-SBC。阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下表达大小约38 k D的蛋白,重组蛋白以包涵体的形式存在。Western blot分析表明,表达产物具有良好的免疫学活性。以纯化的表达产物作为诊断抗原建立了检测TGEV抗体的间接ELISA(TGEV SBC-ELISA)方法。表明建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比血清中和试验高,可用于TGEV的检疫和流行病学调查。

摘要：本试验旨在建立同步共检猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(RV)的多重RT-PCR检测方法。参照PEDV的M基因(JQ023161)、TGEV的N基因(JX013850),RV的VP7基因(AY707788),利用Primer Premier 5.0软件设计筛选能特异性扩增PEDV、TGEV、RV相应基因的引物。并对引物浓度、退火温度等扩增条件进行优化,建立了一种能同时共检PEDV、TGEV和RV的多重RT-PCR方法。该方法对PEDV、TGEV和RV均能分别扩增出大小为347、779和510bp的预期片段;该方法灵敏度高,最低可以检测约1.5×105拷贝的阳性RNA模板;该检测方法特异性强,TGEV、PEDV、RV三种病毒核酸检测体系内无交叉反应,对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、日本脑炎病毒和伪狂犬病病毒的RNA或DNA检测均为阴性。应用该方法检测135份临床样品,TGEV、PEDV和RV的阳性检出率分别为2.96%、82.2%和2.22%,与常规单一RT-PCR的检测结果进行比较分析,符合率均为100%。上述研究结果表明该方法是一种简便、快速、同步共检PEDV、TGEV和RV的有效方法。

摘要：为建立一种快速、灵敏、特异的鉴别基因Ⅰ型和基因Ⅲ型日本脑炎病毒(JEV)的反转录-环介导等温扩增方法,根据Gen Bank中登录的基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV毒株基因序列,分别设计了1套基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP引物,并以此引物分别建立了基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP方法。结果显示,基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP方法均能在1 h内完成对相应基因型JEV RNA的扩增,并与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪细小病毒和伪狂犬病病毒无交叉反应。灵敏性试验结果显示,基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV特异性RT-LAMP方法均能扩增出24 copies的JEV RNA。本研究建立的基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV特异性RT-LAMP检测方法具有灵敏性高、特异性好、简便、快速的特点,能够快速对JEV进行检测及基因Ⅰ型和基因Ⅲ型的鉴别,具有广泛的应用价值。

摘要：目的探讨和比较1540 nm铒玻璃非剥脱点阵激光(1540 nm NAFL)和1927 nm掺铥非剥脱点阵激光(1927 nm NAFL)以及红外双极射频(IR-RF)治疗眼周静态皱纹的有效性和安全性,为临床选择更好的治疗路径提供依据。方法采用前瞻性、随机、自身对照研究设计。纳入2019年12月至2021年1月就诊于上海交通大学医学院附属第九人民医院激光美容科的眼周静态皱纹患者,采用随机数字表法随机分为3组,每组患者分别接受3种治疗方法中的2种:A组为左侧IR-RF,右侧1540 nm NAFL;B组为左侧IR-RF,右侧1927 nm NAFL;C组为左侧1540 nm NAFL,右侧1927 nm NAFL。每2个月治疗1次,共3次。治疗前和治疗结束后6个月采用整体美学改善量表(GAIS)评分和Fitzpatrick皱纹评分进行主观评估,采用面部图像分析仪VISIA-CR进行客观评估,同时记录治疗相关不良反应以及患者疼痛度的视觉模拟量表(VAS)评分。采用Wilcoxon符号秩检验评价3种治疗方式疗效的差异,治疗疼痛度VAS评分的差异,以及疗效与患者年龄的关系。结果共纳入30例患者,每组10例,最终27例完成了全部治疗和随访:A组9例(男3例,女6例);B组8例(男3例,女5例);C组10例(男4例,女6例)。A组年龄33~65岁,平均36.9岁;B组年龄28~67岁,平均38.6岁;C组年龄25~58岁,平均37.8岁。GAIS评分比较:各组左右两侧的GAIS评分的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。Fitzpatrick皱纹评分比较:与同侧治疗前比较,IR-RF治疗侧无显著变化,1540 nm和1927 nm NAFL治疗后Fitzpatrick皱纹评分均显著降低(P值均<0.05),且1927 nm NAFL侧较1540 nm NAFL侧评分下降更明显(P<0.05)。VISIA-CR分析结果与Fitzpatrick皱纹评分情况相符。此外,IR-RF治疗侧中50岁以上患者较50岁以下患者眼周皱纹改善显著(P<0.05)。IR-RF治疗侧的VAS评分明显低于NAFL治疗侧(2.2分vs.5.8分,P<0.05)。1540 nm NAFL侧有1例出现暂时的色素沉着,末次治疗后4个月逐渐消失。结论NAFL对于改善眼周静态皱纹有效且安全,IR-RF治疗可能更适合高龄患者且疼痛感低。

摘要：随着我国人口老龄化的程度逐渐加深、收入水平和生活环境的质量逐步提高、智能机器人的应用范围以及功能扩展,使得人们对物联网家庭智能机器人的需求不断加大。针对这一现象,设计一款使老年人生活智能化,操作简单人性化的物联网家庭智能机器人。通过机械结构的设计、电子控制技术以及当前新兴的物联网技术相结合,巧妙地解决了老人家庭潜在危险检测预警、提不动重物、家务负担重、居家光线调节、出门衣物增减等切实的问题。在为老年人日常生活提供极大便利的基础上,提高其生活质量。

摘要：对美好生活的追求,是人的普遍愿望。于是,一种与追求美好生活相匹配的“生活美学”应运而生。美好生活是我们对于自身幸福的追求,生活美学不仅是在自由的环境中充分发挥本心,而且也是有返璞归真的境界与心性的。

摘要：电影《周恩来的四个昼夜》取材于李栓庆所著的报告文学《周恩来总理视察伯延纪实》，影片在尊重史实的基础上进行了适当的艺术加工，使历史真实与艺术虚构得到了巧妙的融合。周恩来作为共和国第一任总理，深得人民爱戴和敬仰。

摘要：目的了解我军战现场各项救护技术常用程度,为更好开展卫生士官战伤救护技能培训提供指导。方法设计调査问卷,就止血、通气、包扎、固定、搬运、补液、镇痛、抗感染、生命支持等数十项战现场救护技术的常用程度对20位军内专家进行咨询,并对结果进行统计分析。结果根据各技术常用程度的调査结果及专家意见,初步构建我军卫生士官战现场救护技术培训模块,并明确培训重点及方向。结论本研究为建立我军现代战伤救护技术规范提供参考,有助于提高卫生士官野战一线救护水平。

摘要：为有效表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)的ORF3蛋白并检测表达产物的生物活性,开展了ORF3蛋白相关的生物信息分析(包括遗传进化分析、跨膜区、亲水性、抗原表位、二级结构等),以预测结果为依据,选取抗原区域进行了截短原核表达。根据CV777株的ORF3基因序列,设计了1对特异性引物,以RTPCR扩增了大小为342 bp的ORF3截短基因片段,将扩增的ORF3基因插入p ET-22b(+)载体中构建了原核表达质粒p ET-22 b(+)-ORF3。确定了最佳表达条件为诱导温度25℃、诱导时间4 h、IPTG浓度1.2mmol/L,表达的蛋白主要以包涵体形式存在,大小约18 ku。Western-blot和ELISA试验证明,该蛋白与PEDV阳性血清有良好的反应性。

摘要：为了明确传染性性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）分离株CK/CH/SD09/005的分子特征,以进一步丰富国内IBV的分子流行病学信息。本研究设计了25对引物对其全基因组进行了序列测定,并与参考株进行了同源性比较和S1基因遗传进化分析。结果显示CK/CH/SD09/005基因组为27 691bp（不包括5′端Cap和3′端Poly A）。全基因组同源性比对发现,CK/CH/SD09/005仅与GenBank中广西2009年分离株GX-NN09032各基因高度同源（97%~99%）。除GX-NN09032外,CK/CH/SD09/005基因组5′端复制酶基因（Gene 1）和3′端非转录区（Untranslated region,UTR）与2个QX基因型参考株ck/CH/LDL/091022和SDIB821/2012同源性最高,分别为97%和98%,但是3′端结构蛋白和非结构蛋白基因（S-3a-3b-3c/E-M-5a-5b-N）与这两个毒株同源性较低,仅为72%~90%。其ORF3c/E、5a、5b和N分别与韩国分离株1011、国内分离株CK/CH/LXJ/02I、DK/CH/HN/ZZ2004和YX10同源性最高,分别为97%、96%、99%和96%,而其ORF3a、3b和M与参考株同源性均低于90%。S1基因遗传进化分析发现,CK/CH/SD09/005和国内外39个参考株形成7个进化分支（基因型）,CK/CH/SD09/005和2007以来几个分离株属于基因Ⅳ型,与其它6个基因型参考株S1和S2基因同源性为66%~69%和72%~81%,S1基因不仅表现广泛性点突变,而且有多处碱基插入和缺失,S2仅表现点突变。本研究结果表明CK/CH/SD09/005是一个变异株,可能是QX基因型IBV流行株与其它毒株重组进化而来,此外还涉及基因突变、插入和缺失等多种变异机制。