摘要：为提高空肠弯曲菌的检测效率和检出率,应用免疫磁珠技术自行制备弯曲菌免疫磁珠,用以直接捕获受检样品中的空肠弯曲菌,不需要增菌培养;设计了检测空肠弯曲菌鞭毛蛋白A(flaA)基因的引物与荧光标记探针,首次建立了空肠弯曲菌的磁捕获-荧光聚合酶链式反应快速检测及鉴定方法.应用于实物检测的结果表明,该方法具有灵敏度高、选择性好、简便等特点,可在24h内完成检测,提高了环境样品及食品中空肠弯曲菌的检出率.

摘要：根据GenBank中桃拉病毒的全基因组序列,分别设计扩增该病毒主要结构蛋白基因vp1、vp2、vp3的相应引物,以发病的凡纳滨对虾中提取的总RNA为模板,利用RT-PCR技术对目的基因进行了扩增,分别获得分子量为1 164、849、507bp的基因片段,与预期一致.再将目的基因与pET-28a载体连接,分别构建重组表达载体pET-VP1、pET-VP2和pET-VP3,重组子经酶切和测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测.SDS-PAGE电泳的结果表明,在37℃下,0.5mmol/dm3的IPTG诱导表达的重组蛋白均以包涵体的形式存在,重组蛋白VP1、VP2、VP3的大小分别为48、36、24KDa.本研究的结果为制备桃拉病毒主要结构蛋白的特异性抗体,进而研制桃拉病毒快速检测试剂盒奠定了基础.