摘要：根据猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)溶血素基因(sly)设计和合成了一对可扩增其完整阅读 框的引物,对HA9801等6株猪链球菌2型江苏分离株,1株德国分离株SS2-D及猪链球菌C群参考株 ATCC35246的核酸进行PCR扩增,结果显示HA9801等6株江苏分离株及德国株SS2呈阳性,ATCC35246 呈阴性。HA9801株PCR产物纯化后测序,序列分析表明该DNA片段与猪链球菌2型1933株的sly基因同源 性为99％。

摘要：为了建立可对鳕鱼DNA进行特异性检测的PCR方法,应用在出口贸易中的鳕鱼疑似样品和保护执法工作中难以检查辨认的鳕鱼产品的物种鉴定,从GenBank数据库下载7个鳕属及其他5种鱼类的mtDNA细胞氧化酶Ⅱ(COXⅡ)基因序列,并用DNA Star7.0软件对上述不同鳕鱼的该基因碱基序列进行比较。在此基础上,综合考虑了设计引物的基本原则,选择了鳕鱼与其他鱼类碱基序列上差异位点较多的两个片段,设计出PCR引物。用该引物分别对从7种鳕鱼和5种非鳕鱼的肌肉、脏器组织中提取的DNA进行PCR扩增。结果表明,所设计的引物对鳕鱼DNA具有特异性,从而达到了对该物种进行特异性检测鉴定的目的。

摘要：目的设计并评价白纹伊蚊细胞色素b(Cytb)基因特异性引物。方法根据白纹伊蚊Cytb基因保守区域序列,设计1对引物,优化PCR扩增的退火温度。以白纹伊蚊及同属、同科、同目昆虫基因组DNA为样本,评价引物的特异性;以白纹伊蚊基因组DNA为样本,评价引物的灵敏性;扩增4个口岸捕获的8只白纹伊蚊,评价引物的重复性。结果设计的引物的最佳退火温度为55℃。该引物可成功扩增白纹伊蚊Cytb基因,不能扩增其同属、同种、同目昆虫基因;可扩增来自4个口岸的浓度1.9 ng/μl以上的白纹伊蚊基因组DNA。结论本研究设计的引物的特异性、灵敏性、重复性理想,适用于白纹伊蚊的鉴定。

摘要：根据猪链球菌2型(strep tococcus su is type 2)溶血素基因(sly)设计和合成了一对可扩增其完整阅读框的引物,对HA 9801等6株猪链球菌2型江苏分离株、1株德国分离株SS2-D及猪链球菌C群参考株ATCC 35246的核酸进行PCR扩增,结果显示HA 9801等6株江苏分离株及德国株SS2呈阳性,ATCC 35246呈阴性。HA 9801株PCR产物纯化后测序,序列分析结果表明该DNA片段与猪链球菌2型1933株的sly基因同源性为99%。

摘要：为建立检测鲤春病毒血症病毒(SVCV)的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中SVCV的G基因进行序列分析,设计SVCV特异性引物和探针并标记生物素,偶联荧光编码微球后与SVCV病毒RT-PCR产物杂交反应,用液相芯片仪器检测荧光信号。结果表明液相芯片检测体系能够正确的检测出SVCV。病毒核酸的最低检出量为10pg,检测特异性高,初步建立了检测SVCV的液相芯片技术,为进一步构建其他水生动物病原体全新快速高通量检测平台奠定基础。

摘要：为建立我国特有的珍稀水生动物中国鲎的分子保护方法,根据GenBank中中国鲎及其他17种节肢动物门动物的mtDNA细胞氧化酶Ⅲ(COXⅢ)基因序列,应用DNA Star 7.0软件设计特异性引物,建立了中国鲎SYBR GreenⅠ实时荧光PCR鉴定方法。结果表明,所设计的引物对中国鲎DNA具有特异性,为保护我国珍稀动物进行了有益的探索。

摘要：马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virusY,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害。本文根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶基因序列保守区域,设计合成了3条巢式PCR引物和1条TaqMAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测PVYn的新方法。该方法采用***快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR和TaqMAN探针检测技术。第二步半巢式RT-Realtime PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、Real time PCR等方法高。实验结果表明,该方法检测灵敏度可达4fg/μL植物总RNA。

摘要：目的设计、评价蚊Cytb基因特异性引物,建立蚊Cytb基因的分子鉴定方法,为了解蚊的亲缘关系和群体遗传差异提供理论基础。方法使用Premier Primer 5软件设计2对Cytb基因引物,以蚊及其他病媒生物的基因组DNA为模板进行PCR扩增,通过PCR产物测序对引物的特异性、灵敏性和稳定性进行评价。结果筛选到的1对引物CytbMOSF1/CytbMOSR1可用于鉴定淡色库蚊、三带喙库蚊、白纹伊蚊、中华按蚊和鼠、蝇、蜚蠊、蜱、蚤等无交叉反应。该引物对三带喙库蚊的扩增检测限可达6.8pg/μl,扩增稳定性好。结论设计的Cytb基因引物Cytb MOSF1/CytbMOSR1可进行蚊的分子鉴定,为蚊虫溯源提供数据。