摘要：目的构建针对多效蛋白（pleiotrophin，PTN）基因的小干涉RNA（siRNA）慢病毒表达载体并观察其对人小细胞肺癌H446细胞株PTN表达抑制及对细胞生长和凋亡的影响。方法设计4对针对PTN基因的小发夹RNA（shRNA）序列，与Hvthm载体连接，构建慢病毒表达载体LV（1entiviral）-shPTN，连接产物转化到DH5α感受态细胞，阳性克隆测序鉴定。再用LV—shPTN与pRsv—REV、pMDlg—pRRE、pMD2G三种质粒共转染293T细胞，小量包装与纯化产生慢病毒颗粒。感染H446细胞后，用荧光定量PCR及Westernblot法检测PTN的表达。将包含对PTN基因干扰效率最高的序列慢病毒载体进行大量包装、纯化及病毒滴度测定，将包装好的病毒感染H446细胞。实验分为正常未干扰细胞组、阴性对照组、PTN抑制组、化疗组及PTN抑制加化疗组，四甲基偶氮唑盐比色法观察细胞生长，流式细胞仪分析细胞凋亡。结果测序结果与构建慢病毒载体的预期结果一致，对PTNmRNA的最高抑制效率为72％，对胛N蛋白的最高抑制效率为59％。大量包装与纯化后病毒滴度为1×10^8TU／ml。PTN基因抑制组H446细胞活力明显低于正常未干扰细胞组和阴性对照组，基因抑制联合化疗组较单纯基因抑制组及化疗组细胞活力下降，凋亡率增高，并具有浓度依赖性。结论构建PTN RNA干涉载体，转染后可有效降低H446细胞PTN的转录和表达，抑制H446细胞的生长并促进其凋亡，有望成为小细胞肺癌基因治疗的可选择的方法之一。

摘要：目的与市售进口品乙酰半胱氨酸注射液(富露施)雾化吸入比较,评价国产吸入用乙酰半胱氨酸溶液祛痰的有效性和安全性。方法本试验采用多中心、随机、双盲、阳性药平行对照设计。选用已经上市的同种进口药物富露施作为对照。共收集急慢性下呼吸道感染患者234例,试验药物组117例,对照组117例。各取3 mL药物,雾化吸入,bid,总疗程5～7 d。统计学上采用非劣效检验及双侧检验。结果试验组的有效率为74.8%(PPS),74.1%(FAS),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。在研究过程中,没有发生严重不良事件和重要不良事件。试验组不良事件发生率为14.5%,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。根据预设的非劣界值15%,两组非劣效结论成立。结论吸入用乙酰半胱氨酸溶液与富露施比较,祛痰疗效和安全性相当。