摘要：杆状病毒表达系统主要宿主有昆虫细胞和家蚕两种类型,已广泛应用于结构生物学的研究和生物制剂尤其是疫苗的研发。近十余年来由于合成生物学的发展,该系统的发展目标已从单一基因操作转向于需多基因协同操作才能完成的任务。重点研究领域涵盖了难以表达蛋白如膜蛋白的表达量改善、多基因协调表达的兴起尤其是重组腺相关病毒(rAAV)的包装研究、杆状病毒作为哺乳动物基因呈递载体应用的优化、高质量完全人源化蛋白表达系统的建立和完善、通过研究杆状病毒和宿主的互作以改善表达产物的质和量等方面,这极大地拓展了该系统作为一个表达系统的研发应用范围。该系统优化的重点在于进行系统、集成式的改良以提高目的产品的质和量,尤其是应重视宿主侧的遗传背景改良以及病毒和宿主互作的研究。

摘要：淀粉酶是家蚕体内比较重要的一种消化酶。利用real-time PCR技术对Bmamy5和Bmamy7基因在家蚕5龄3 d不同组织的mRNA转录水平进行了分析,结果显示Bmamy7只在家蚕5龄3 d中肠和马氏管组织中有转录,在中肠组织的转录高达3×10^9个拷贝/μg总RNA,在马氏管组织中的转录丰度较低,只有1.9×10^6拷贝/μg总RNA;Bmamy5只在中肠组织中有转录,转录水平为1.5×10^9个拷贝/μg总RNA。根据在家蚕转录组数据库中预测的编码家蚕淀粉酶的c DNA序列设计引物,利用RT-PCR技术克隆到两个家蚕淀粉酶基因Bmamy5和Bmamy7,Bmamy7基因长1 608 bp,ORF长1 512 bp,编码503个氨基酸;氨基酸序列分析表明Bmamy7具有典型的α-淀粉酶结构域。Bmamy5全长1 196bp,ORF长738 bp,编码245个氨基酸。对Bmamy5和Bmamy7进行了原核表达,Bmamy7重组蛋活性较弱,但未检测到Bmamy5重组蛋白的目的条带。研究结果为家蚕淀粉酶基因的研究与应用提供了参考。