摘要：本试验设计了M基因的特异性引物,扩增了M基因,成功构建了重组质粒,并转化至Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞中,优化了异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达条件.结果表明,重组表达的融合蛋白Pet-32a-M大小约为43 ku,与预期大小相符.十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,M蛋白为包涵体蛋白,且在IPTG浓度为0.8 mmol·L-1,温度为37℃,诱导时间为8 h的条件下,蛋白表达效果最佳.蛋白免疫印迹检测结果进一步显示,重组蛋白Pet-32a-M在体外可以被成功表达.

摘要：ORF3蛋白是猪圆环病毒2型(porcine circovirus type,2PCV2)的一个重要的非结构蛋白。根据GenBank数据库中PCV2的ORF3基因序列设计引物,以PCV2基因组为模板进行PCR扩增,并构建重组表达质粒。将重组质粒转染至BL21感受态细胞,进行最佳诱导条件的选择,采用Ni-NTA亲和层析柱纯化表达产物。以纯化后的重组ORF3蛋白作为酶标包被抗原,优化反应条件,建立PCV2间接ELISA(indirect ELISA,iELISA)诊断方法。结果显示,重组质粒经PCR鉴定、酶切鉴定和测序鉴定构建成功。重组蛋白表达的最佳诱导条件为37℃、8 h、1 mmol/LIPTG。Western-blot结果表明,该重组蛋白具有较好的免疫原性。Ni-NTA亲和层析纯化结果表明,280 mmol/L咪唑为最佳洗脱浓度。iELISA的最佳包被抗原质量浓度为0.03 mg/m L,待检血清最佳稀释度为1∶100,酶标抗体最佳工作浓度为1∶4 000。批内和批间试验结果表明,该方法具有较好的重复性。此iELISA与PCR检测方法具有良好的一致性。结果表明,基于ORF3蛋白建立的PCV2间接ELISA诊断方法,可以为临床上rCap蛋白基因工程疫苗免疫猪场进行鉴别诊断。

摘要：冷却通道壁面上的金属对航空煤油热氧化沉积过程有一定的促进作用.针对航空煤油在金属表面的氧化结焦情况,设计了金属基底氧化沉积实验系统,研究了不同金属对航空煤油氧化沉积的影响.实验结果表明,Fe基底表面沉积量显著高于其他4种基底,沉积量为5.2 mg,而Cu和Ti表面沉积仅为0.8 mg和0.4 mg,Fe、Cr和Ni促进了脱氧和脱氢过程,并显著消耗含氧物质,而铜对喷气燃料的氧化作用最强,生成大量含氧组分,烯烃等物质被氧化后生成更多的醇和烷烃.

摘要：目前在动力域控制器设计与开发方面,国外车控芯片占据垄断地位。为解决关键技术被卡脖子的现状,采用国产化芯片结合国产化AUTOSAR操作系统进行开发。研究重点在于数据缓存技术的应用与优化,针对国产化芯片开发中遇到的缓存数据一致性的问题,提出了多种数据同步机制与缓存策略优化方案,有效消除了数据不一致的风险。此外通过设计高效的数据缓存策略,显著提升了控制器的指令执行效率并进行了试验验证。

摘要：基于质量源于设计理念优化藤茶的提取工艺,确定关键的工艺参数及其范围,并采用网络药理学探索关键成分对血脂紊乱的作用机制。选取二氢杨梅素(dyhidromyricetin,DMY)、杨梅苷(myricitrin,MYT)、紫云英苷(astragalin,AST)及杨梅素(myricetin,MYE)作为指标性成分,进行Plackett-Burman实验设计,进行Box-Behnken 2因素4水平实验设计,采取多指标叠加法,用于优化模块Graphical选项进行设计空间构造,并对空间内外的点进行验证。确定最佳提取工艺为提取次数2次,每次提取20min,加溶媒倍数为11.5倍,乙醇体积分数为50%。在此工艺条件下,DMY、MYT、AST、MYE含量均值分别为443.5、125.8、1.9、2.5μg·mg-1,干膏率均值为28.1%。网络药理学研究表明DMY、MYT、AST和MYE共88个关键靶点共同参与脂质代谢紊乱的治疗,蛋白互作网络分析显示TP53、RELA和STAT3等为关键靶点,KEGG富集通路显示关键靶点参与调控脂质与动脉粥样硬化、晚期糖基化终产物及其受体、TNF等信号通路。该提取工艺稳定可行,为后续藤茶相关产品的开发提供一定帮助。

摘要：在光刻模具清洗中,兆声波技术展现出其独特的优势,兆声清洗能够去除小于0.2μm的微小颗粒,且避免了空化现象可能引起的对物件表面的损伤。然而,兆声清洗换能器不同匹配层的水域声场分布差别很大,且目前鲜有关于兆声清洗换能器方面的研究。为了进一步提高光刻模具兆声清洗换能器的清洗效率,增大传入水中的声压,减小能量传递过程中的损耗,首先借鉴超声的方法对换能器整体进行了设计,然后利用有限元软件Comsol对光刻模具兆声换能器的水域声场进行了分析,采用Comsol中声-压电相互作用模块,通过改变匹配层材料和尺寸,研究了其对光刻模具兆声清洗换能器水域声压的影响规律,并基于分析结果对光刻模具兆声换能器进行了优化设计。优化结果表明,以5mm石英作为喷淋式兆声清洗换能器匹配层,其水域中的声场稳定性更好,且在传播距离为20~40mm时有最大的声压幅值150kPa。

摘要：针对汽车电子软件开发工作中集成与测试工作繁杂重复、人为操作效率低的问题,设计了一种基于Jenkins的汽车发动机ECU软件持续集成系统。该方法在车载嵌入式软件开发技术中融合了Jenkins持续集成技术,将SVN软件版本管理、HighTec集成编译、目标控制器远程刷写、软件测试及报告通知环节整合成一个自动化流程,搭建了一个了基于Jenkins技术的汽车电子软件持续集成系统。该系统可大幅缩短软件迭代升级的开发周期,避免人为集成操作失误。

摘要：本系列的已有文章曾多次涉及课堂评估任务的设计,如“如何设计开放式的评估题”(蔡金法,刘启蒙,2017a),“如何对学生表现进行客观的评估”(蔡金法,刘启蒙,2017b)。这些评估任务的设计不仅包含了不同的评估手段(如反思性日记、成长记录袋等),还涵盖了智能计算思维、数学交流、数学建模等各种核心能力。

摘要：分类查询是网络信息检索的重要组成部分.文章介绍了一个中文网页分类查询系统的设计与实现方法.由于人工分类费时费力,而自动分类需要大量训练数据,因此在实现该系统时提出了一种基于用户推荐机制的解决方案.

摘要：在进行内燃机活塞-连杆-曲轴系统的多体系统动力学分析中考虑了曲轴主轴承和连杆两端轴承的流体动力润滑作用,建立了内燃机系统动力学与流体动力润滑耦合作用下的动力学分析模型.通过机械系统动力学分析软件ADAMS和自行编写的计算流体动力润滑程序之间的连接调用,进行了系统动力学与流体动力润滑耦合作用下的动力学分析.分析结果表明:在内燃机活塞-连杆-曲轴系统动力学分析中考虑油膜动力润滑作用后缸体的动态受力峰值降低,润滑油膜的动力耦合具有使缸体各部位受力趋于均匀化的作用.以不考虑油膜动力耦合作用的动力学分析作为设计依据的零部件设计具有过大的安全裕度,在内燃机零部件设计时考虑摩擦学与系统动力学的耦合是非常必要的.