摘要：【目的】探讨运用聚合酶链反应邛艮制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)进行食源性感染常见致病菌属种鉴定的可行性。【方法】选择细菌23S rDNA基因作为鉴别细菌属的靶基因,通过设计合适的通用引物进行PCR扩增,并对13属食源性感染常见致病菌和5种不同血清型大肠杆菌扩增产物的酶切片段进行RFLP分析和SSCP分析。【结果】运用通用引物可以扩增出13 属食源性感染常见致病菌的23S rDNA基因HpaⅡ酶切产物的RFLP分析表明,不同种属的致病菌表现出不同的RFLP图谱,利于进行细菌属的鉴定。不同种属食源性感染常见致病菌SSCP图谱变异性更大,不利于进行种属间鉴别。对5种不同血清型大肠杆菌的23S rDNA基因扩增产物的RFLP和SSCP分析表明,不同血清型大肠杆菌表现出相似的RFLP图谱。SSCP图谱的变异性较大,这有利于进行血清型间鉴别甚至株间的鉴别。【结论】PCR-RFLP和PCR-SSCP具有应用于食源性感染常见致病菌种、属鉴别诊断的潜力。

摘要：目的研究灭活后的柯萨奇病毒Ｂ１（ＣｏｘｓａｋｉｅｖｉｒｕｓＢ１，ＣＶＢ１）在原代培养骨骼肌细胞中，对报道基因ｐＣＤＮＡ３－ＬａｃＺ转移效率的影响。方法用聚乙二醇沉淀和蔗糖低温超速离心法提纯并用β－丙内酯灭活病毒，将灭活ＣＶＢ１、转铁蛋白聚赖氨酸（ＴｆｐＬ）和报道基因设计成不同浓度组合，观察肌肉细胞中β－半乳糖苷酶染色阳性的细胞数。结果灭活ＣＶＢ１＋ＴｆｐＬ＋ＬａｃＺ在肌肉细胞中使基因转移效率由ＴｆｐＬ＋ＬａｃＺ组的不到１％提高到１５％～２０％。结论灭活ＣＶＢ１也能像腺病毒一样促进基因转移，ＣＶＢ１的嗜肌肉特性，为在肌肉组织中研究靶向明确的新载体提供了实验依据。

摘要：目的克隆SARS冠状病毒(SARS-CoV)GD322株M基因,并进行序列分析。方法根据GenBank中公布的SARS冠状病毒Tor2株M基因序列,设计一对引物,用RT-PCR法从SARS-CoVGD322株基因组中扩增M基因片段。克隆至pET-32(a)载体,转化大肠杆菌BL-21后测序,利用DNAstar和ClustalX分析所测序列翻译的氨基酸与81株SARS-CoVM基因翻译的氨基酸序列的差异。结果该M基因与Tor2株M基因核苷酸同源性为99.86%;与已收集的81株SARS-CoVM基因所译氨基酸相比,和41株(占50.62%)M蛋白完全同源,37株(占45.68%)仅有一个氨基酸改变,同源性为99.55%,仅与3株(占3.70%)有2个氨基酸差异,同源性为99.10%。结论已获得具有代表性的SARS-CoVM基因重组质粒。