摘要：目的克隆表达出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7志贺毒素2B亚单位（Stx2B）与霍乱毒素B亚单位（CTB）的融合蛋白（CTB-Stx2B），并检测其抗原性和与神经节苷脂（GM1）结合能力。方法设计引物扩增融合蛋白CTB—Stx2B的编码基因ctb-stx2b，T-A克隆测序验证后克隆入原核表达质粒pET30a（＋）C，构建表达质粒pET30a（＋）-ctb-stx2b，转化***21（DE3），IPTG诱导表达、纯化，获得目的蛋白CTB-Stx2B，SDS-PAGE和Western-blot检测其抗原性和形成五聚体的能力；GMI-ELISA法检测其与GM1结合能力。结果扩增出约750bp的目的片段，测序鉴定与设计序列一致；原核表达质粒pET30a（＋）-ctb-stx2b转化***21（DE3）后，经酶切和PCR扩增鉴定正确；IPTG诱导后SDS-PAGE初步测定CTB-Stx2B单体的相对分子质量（Mr）约为20×10^3；Western-blot检测CTB-Stx2B能与CTB单克隆抗体结合，纯化产物经复性后大多以五聚体形式存在；ELISA检测CTB-Stx2B具有结合GM1活性。结论成功克隆、表达了融合蛋白CTB-Stx2B；表达的蛋白具有良好的CTB抗原性和GM1结合能力。

摘要：目的建立一种快速检测患者血液标本中猪链球菌的方法。方法收集患者血液标本,提取细菌全基因组DNA;根据猪链球菌6个特异基因设计引物,采用PCR技术对这些基因进行检测,并对PCR扩增阳性的基因产物进行序列分析验证,并分析该方法诊断猪链球菌病的特异性和敏感性。结果取唾液链球菌等6种链球菌进行验证,该检测方法的特异性为100%,模拟标本(细菌含量>103个/ml)的敏感性为100%,血培养阳性病人标本的敏感性为100%。通过对90份血培养阴性临床标本的检测,9份PCR结果阳性,序列分析结果证实扩增片段为目的基因。结论该方法灵敏、特异、快速,可直接用于患者血液标本的猪链球菌特异性基因的检测,为猪链球菌感染的早期诊断提供实验室依据。

摘要：目的　研究我国分离的大肠杆菌O15 7:H7菌株的志贺毒素型别的变化。方法　使用针对志贺毒素 2及其变种的引物对进行PCR检测、细菌染色体DNA的PstI酶切后的Southern印迹实验和PCR产物的HaeⅢ、RasⅠ酶切分析 ,以及PCR产物克隆后的序列分析方法以及致病性大质粒的PstI酶切分析。结果　 1999年分离自徐州市的人的 5株菌均携带slt1、slt2 ,而 2 0 0 0年从江苏省徐州市患者分离的 10株和蜣螂标本分离的 4株共计 14株大肠杆菌O15 7:H7菌株仅携带slt2vha毒素基因 ,其致病性质粒的限制性酶切图谱与 1999年的菌株相比也发生了改变。结论　鉴于江苏省徐州市1999年的分离的 5菌株全部携带slt1和slt2基因 ,结果提示该地的优势菌型发生了改变 ,可能当地大肠杆菌O15 7:H7感染的流行病学特点有关。针对slt2变异基因而设计的引物及其以此为基础进行的限制性片段长度多态性分析的方法对于研究O15 7:H7菌株的志贺毒素型别的变化能够满足特异性及灵敏性的要求。

摘要：目的 研究福氏痢疾杆菌2b血清型菌株中SfII和SfX前噬菌体整合位点及排列方式.方法 根据2b血清型菌株基因组中SFII和SfX前噬菌体可能的整合位点及排列方式,设计引物,对50株2b血清型菌株进行PCR扩增,并对扩增产物测序,根据扩增和测序结果判断噬菌体的整合位点和排列方式.结果 在2b血清型菌株中,SfII和SfX前噬菌体前后相连,整合于宿主菌染色体proA和yaiC基因间的thrW tRNA基因上;以SfII在前,SfX在后,或SfX在前,SfII在后两种方式排列;而以后一种方式为主,在共50株检测菌株中,有49株为此方式.结论 福氏痢疾杆菌血清型相关噬菌体的整合位点及排列方式,对研究福氏痢疾杆菌血清型转换及血清型相关噬菌体的整合机制具有重要意义.

摘要：目的评价地震后早期(震后2周)防病措施及效果,为后续防病提供决策依据。方法使用设计统一的调查表,对18个镇及2个城区安置点震后防病状况进行现场询问、调查,统计分析调查结果,形成评估意见。结果调查358户,98.32%的灾民住在帐篷中,其中88.27%为简易帐篷,10.06%为专用帐篷,58.06%符合卫生学要求。重灾区和轻灾区中,厕所消毒处理的比例分别为92.70%和87.78%;粪便及时清运的比例分别为51.69%和51.67%;仅饮瓶装水的为0.84%,饮瓶装水或集中供水的为10.61%,饮用井水的为88.27%,其中未进行消毒的占2.22%,饮用河沟水的有3.91%,其中未进行消毒的占35.71%。调查的住户中,食用凉拌菜的占5.03%;吃过剩菜剩饭的占12.85%;认为蚊虫比去年较多的有33.52%,认为苍蝇比去年较多的占36.59%,认为老鼠比去年较多的占8.41%,其中发现死鼠的10户,占调查户的2.79%。所调查的乡镇全部通过《地震灾区传染病(症状)监测按日汇总报表》汇报发热、腹泻及犬伤患者。结论绵竹市灾后防病建立了高效运转的管理组织,各项技术措施因地制宜,针对性强,包括尸体掩埋,食品卫生,环境及饮用水消毒、传染病监测等各项措施落实有力,各项防病措施科学、合理、有序进行。