摘要：（上接第10期第3页）6在过程研发中进行QC因为对于候选疫苗进行彻底地QC（效力和安全性）非常困难,现多倾向于过程控制等于产品QC这种理念,并要求在临床研究前完成放大过程与验证。可是这种策略也代表了一种不可接受的风险,

摘要：疫苗是兽医学中最有效和最便宜的预防工具。现实的兽医领域不仅理想的疫苗很少,许多疫苗效力有限或有毒副效应,而且仍有一些严重疾病尚无有效疫苗。传统的疫苗包括灭活疫苗、弱毒疫苗和亚单位疫苗。近期已采用基因工程技术改进和设计新型疫苗。腺病毒可诱导抗插入外源基因编码抗原的体液、黏膜和细胞免疫应答，现已成为表达和运送外源免疫蛋白的候选载体之一，用于开发各种动物的疫苗，尤其是猪用的载体疫苗。本文总结了作为猪用载体疫苗的研究进展以及腺病毒载体的生产和纯化进展与策略。

摘要：利用DNASIS等软件分析传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株的gB蛋白抗原性,筛选出一段抗原性较强的片段,该片段位于gB蛋白的403位至686位氨基酸残基之间。设计引物,引入双酶切位点EcoRⅠ,SalⅠ,将目的片段t-gB插入原核表达载体pET30a(+),得到重组表达质粒pET-tgB并转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导后,表达分子量为37Ku的融合蛋白His-tgB,表达量占菌体蛋白的40.6%。Westernblot分析表明,His-tgB具有免疫反应性。重组蛋白免疫兔之后可以产生针对ILTVgB的特异性抗体。

摘要：根据鸡胚致死孤儿(CELO)病毒Phelps株的fiber1基因(GenBank序列号U46933)序列设计了1对引物,采用PCR扩增CELO病毒fiber1基因C端(包含Knobs区)的部分片段,并将其克隆到质粒表达载体pGEX6p1,获得的阳性克隆命名为pGEXAF807。序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列与CELO病毒Phelps株的fiber1基因序列完全一致。将pGEXAF807转化大肠埃希氏菌DH5α,经37℃、0.6mmol/LIPTG诱导表达5h,SDSPAGE分析超声裂解后的上清和沉淀。结果显示,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.6ku,目的蛋白量占菌体总蛋白的35.7%。用CELO病毒多克隆血清做Westernblotting试验,结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性。

摘要：禽痘病毒作为活载体已经得到广泛的应用。转移载体的构建是重组禽痘病毒构建的重要环节。在分析禽痘病毒基因组的基础上 ,以FL1 1基因为插入位点 ,设计引物分别扩增 1kb的同源臂 ,将PCR扩增后的同源臂在体外连接后 ,插入到pUC1 1 9中 ,构建转移载体 ,并且以此为基础 ,构建表达绿色荧光蛋白的转移载体。含有eGFP的转移载体转染禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞后 ,报告基因获得表达 ,这将为禽痘病毒载体系统的进一步开发奠定基础。

摘要：繁殖控制疫苗主要是根据生殖激素的级联反应调控干线进行设计，用确定的辅助T细胞抗原表位作为肽或者全蛋白将辅助T细胞的成分添加入疫苗配方中。迄今为止所有的商品化疫苗都是以肽一蛋白质的轭合物作为载体的。商品化的肽一蛋白质疫苗使用的载体是主要是细菌类毒素（包括破伤风和白喉类毒素）或卵清蛋白，与自体靶抗原肽耦合形成轭合物。

摘要：为研究猪A组轮状病毒(PRV-A)血凝蛋白(VP4)、群抗原蛋白(VP6)和中和抗原蛋白(VP7)编码基因疫苗联合免疫的效力,本研究将表达PRV-AVP4、VP6、VP7蛋白基因的真核表达质粒pVAX1-VP4、pVAX1-VP6、pVAX1-VP7以pVAX1-VP4+pVAX1-VP7(B组)和pVAX1-VP4+p VAX1-VP6+pVAX1-VP7(A组)设计试验组,分别以100μg/只经肌肉注射途径免疫BLAL/c小鼠,间隔2周以相同剂量、途径加强免疫,共免疫3次,免疫后不同时间采血,采用ELISA检测血清抗体。结果显示,B组在免疫后14 d和42 d检测到RV抗体阳性(P/N≥2),A组在免疫后14 d、28 d、42 d均检测到RV抗体阳性(P/N≥2);脾脏免疫相关细胞测定结果表明,A组的CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比值和CD19^+B细胞数量均高于B组,两组与对照组相比差异显著(p<0.05);淋巴细胞转化试验显示A组的SI值均高于B组,并且42 d时A、B两组差异显著(p<0.05)。上述结果表明,3组分联合免疫的DNA疫苗可以诱导小鼠产生较强的体液和细胞免疫应答,为PRV-A的核酸疫苗研究奠定了基础。

摘要：利用DNASIS等软件分析传染性喉气管炎病毒（ILTV）WG株的gB蛋白抗原性，筛选出一段抗原性较强的片段，该片段位于邸蛋白的403位至686位氨基酸残基之间。设计引物，引入双酶切位点EcoR Ⅰ，Sal Ⅰ，将目的片段t-gB插入原核表达载体pET30a（＋），得到重组表达质粒pET—tgB并转化到大肠杆菌BL21中，经IPTG诱导后，表达分子量为37ku的融合蛋白His—tgB，表达量占菌体蛋白的40．6％。Westemblot分析表明，His-tgB具有免疫反应性。重组蛋白免疫兔之后可以产生针对ILTVgB的特异性抗体。

摘要：目的　分析传染性喉气管炎病毒 (ILTV)gC蛋白的免疫活性。方法　设计引物扩增编码gC蛋白主要免疫原性区域cDNA ,将其克隆到原核表达载体pGEX_6P_1的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间 ,构建重组质粒r_pGEX_gC。将r_pGEX_gC转化到大肠埃希菌BL2 1(DE3)株中。结果　经IPTG诱导后 ,GST gC融合蛋白在重组菌株获得表达 ,表达产物相对分子质量为 6 5× 10 3,与预计相对分子质量大小一致。融合蛋白的表达含量占整个菌体含量的 2 7 8%。West ern_blot结果表明gC蛋白具有良好的反应活性。结论　本研究为传染性喉气管炎诊断抗原研制奠定基础。