摘要：背景:钠依赖二羧酸转运蛋白参与能量代谢,对细胞衰老可能有影响,但其促进细胞衰老的机制不清。目的:通过细胞周期和周期蛋白的测定探讨二羧酸转运蛋白(hNaDC3)促进细胞衰老的可能机制。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2007-12/2008-05在南京市鼓楼医院完成。材料:WI-38细胞为ATCC公司产品;pLNCX2反转录病毒载体、正义载体PLNCX2-hNaDC3和反义载体PLNCX2-AshNaDC3为Clontech公司产品。方法:在已构建的反转录病毒载体基础上,使用含有hNaDC3基因的反转录病毒液将hNaDC3基因导入人胚肺二倍体成纤维细胞(WI-38)中,并获得表达,通过细胞周期、P16的检测以观察其对细胞衰老的影响。主要观察指标:①WI-38细胞hNaDC3整合和表达。②hNaDC3转导致WI-38细胞形态和传代数的改变。③细胞周期变化。④细胞周期蛋白P16的表达。结果:Northern blot及Western blot结果显示WI-38/hNaDC3细胞在基因和蛋白水平均有hNaDC3的表达,WI-38/AshNaDC3细胞有hNaDC3 mRNA整合而无蛋白表达。与对照细胞相比,hNaDC3基因导入后,人二倍体成纤维细胞形态呈衰老细胞样变化,细胞传代数减少8～12代,生长速率降低,细胞周期阻滞于G1期,细胞周期蛋白P16的表达增高。结论:hNaDC3可能通过增高P16表达促进人二倍体成纤维细胞的衰老。