摘要：目的探讨槲皮素对人宫颈癌He La细胞株的放射增敏作用及槲皮素放射增敏作用机理。方法克隆形成法研究不同浓度槲皮素(20%IC_(50)和IC_(50))及不同给药时序(先放后药和先药后放)对宫颈癌He La细胞的放射增敏作用,根据实验设计分为单放组、20%IC_(50)槲皮素先药后放组、20%IC_(50)槲皮素先放后药组、IC_(50)槲皮素先药后放组、IC_(50)槲皮素先放后药组,检测各组经不同量X线照射(12、8、6、4、2、0 Gy)后的细胞存活率(SF)。选择上述实验结果最佳给药时序,将实验设计为未加药对照组、单放组、单药1组(20%IC_(50))、单药2组(IC_(50))、药放1组(20%IC_(50))及药放2组(IC_(50)),放疗剂量为4Gy,分别采用流式细胞法、DAPI染色、Western blotting(仅采用20%IC_(50))检测各组处理24 h后的细胞周期分布、细胞凋亡变化及Bcl-2、Bax蛋白水平。结果不同浓度槲皮素及不同剂量射线按不同时序处理后的各组细胞与单放组比较SF均下降(P<0.05)。SF与槲皮素浓度呈反比,药物浓度越高,槲皮素的放射增敏作用越强。相同浓度药物和相同剂量射线不同处理时序相比较,先放后药组的SF均比先药后放组低。DAPI染色后荧光显微镜显示,放射线及槲皮素均可引起He La细胞核不同程度的皱缩,两者联合作用后胞核皱缩、碎裂更为明显。流式细胞仪检测显示,与其他各组比较,药放联合组G2/M期阻滞更显著(P<0.05)。Western blotting检测显示,药放联合组Bcl-2蛋白表达下调较其他各组更加显著(P<0.05),但Bax蛋白表达上调与槲皮素单药组比较差异无统计学意义。结论槲皮素对He La细胞具有放射增敏作用,其增敏作用具有浓度及时序效应;放疗增敏作用的机制可能与诱导细胞凋亡、阻滞细胞于G2/M期及下调Bcl-2/Bax比例有关。

摘要：目的:研究CD4(Th1)和CD8(Tc1)T细胞对肝癌患者的AFP的应答反应及其与临床特征的相关性,为其早期诊断与预防提供新策略。方法:研究对象为62例HCC患者,30例肝硬化患者及30例健康志愿者;重点分析CD4 T细胞和CD8 T细胞对HCC患者的AFP-衍生肽的反应;用胞内细胞因子检测法对IFN-γ进行检测。结果:抗AFP的Tc1反应检测阳性结果在对照组为28.5%,在OkudaⅠ期的肝癌患者中为25.0%,在Ⅱ或Ⅲ期的HCC患者中为31.6%。抗AFP Th1阳性反应仅在HCC患者中检测到。抗AFP Th1阳性反应在44.4%的Child-Pugh A级的HCC患者中检测到,但是在Child-Pugh B或C级中仅15.4%。Tc1型反应在Child-Pugh A级肝功的患者中为16.7%,在Child-Pugh B或C级患者中为46.2%。结论:抗AFP Th1应答更多出现在早期肝硬化的HCC的患者中,而抗AFP Tc1应答更可能出现在晚期肝硬化患者中,这些结论为抗肝癌疫苗药物设计提供了理论基础。