摘要：目的:探讨信号转导子与转录激活子3短发夹RNA(shRNA)真核表达载体对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的作用。方法:根据siRNA设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,脂质体法将重组质粒转染人宫颈癌SiHa细胞。RT-PCR和Western blot检测SiHa细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平;MTT法和流式细胞术(FCM)检测细胞的增殖和凋亡。结果:成功构建了STAT3基因shRNA真核表达载体,转染人宫颈癌SiHa细胞。细胞STAT3蛋白及mRNA表达下降;同时SiHa细胞增殖能力下降,细胞凋亡增加。结论:构建的STAT3基因shRNA真核表达载体能够通过下调STAT3基因表达,抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖能力,诱导细胞凋亡。

摘要：目的探讨HIF-1α基因短发夹干扰RNA(shRNA)低氧条件下对宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭能力的作用。方法针对HIF-1α基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后将其克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,构建shRNA真核表达质粒,脂质体转染人宫颈癌细胞株HeLa细胞。低氧培养后,应用Western blot和定量PCR法检测HIF-1α蛋白及mRNA表达水平;用软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测HeLa细胞的定植和侵袭能力。结果成功构建的HIF-1αshRNA真核表达载体转染宫颈癌HeLa细胞,低氧条件下HeLa细胞的HIF-1α蛋白及mRNA表达下降;同时细胞在软琼脂中克隆形成数和穿透Matrigel膜的细胞数减少。结论HIF-1α的shRNA真核表达载体在低氧条件下可抑制宫颈癌细胞的定植和侵袭能力。

摘要：一、目前存在的问题及原因(一)是网络专业技术人才短缺,制约了网站的建设和发展.网络是近几年迅速发展并普及应用的.常言讲:专而精.人民银行科技部门的主要服务职能是负责全行计算机的技术性工作,为数不多的科技人员自然也都成为了技术多面手,加之日常工作也十分繁忙,科技人员对网络专业知识进行全面学习培训的机会也很少.

摘要：岁月如流,我从艺已有四十多年。在我的艺术人生中,很幸运遇到了众多的艺术大师。红线女、罗品超、罗家宝、陈笑风……他们甘为人梯,一路以来对我悉心栽培、指点提携。卿叔(陈冠卿)就是其中难以忘怀的一位,他给我的帮助和影响是非常重要的。

摘要：为研究冷藏陈列柜内食品包温度和室内环境因素之间的关系,本文应用数值模拟方法研究不同的风幕出口速度、室内温度和相对湿度对冷藏陈列柜内食品包温度分布的影响,并考虑辐射传热和传质对食品包温度分布的影响。数值计算结果表明:光照使前排食品包温度提高0.1～1.2℃;在所研究范围内,随着风幕出口平均速度升高,食品包温度降低,而随着室内温度和相对湿度的升高,食品包温度升高。风幕出口冷风平均速度每升高0.15m/s,柜内食品包温度降低0.2～1.1℃;当室内温度每升高2℃,食品包温度升高约0.3℃;室内相对湿度每升高20%,食品包温度升高约0.9℃。本研究可为食品质量的研究和冷藏陈列柜的优化设计提供参考。

摘要：目的构建缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)基因的短发夹状干扰RNA(short hair-pin RNA,shRNA)表达质粒,探讨其在低氧条件下对BeWo细胞转化生长因子3β(transforming growth factor3β,TGF-3β)基因表达的抑制作用。方法根据小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)设计原则,针对HIF-1α基因设计并合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染BeWo细胞。缺氧培养后,应用Western blot法检测滋养细胞HIF-1α和TGF-3β蛋白表达水平,应用real time PCR法检测滋养细胞HIF-1α和TGF-3βmRNA表达水平。结果成功构建HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染BeWo细胞。低氧条件下,细胞HIF-1α蛋白和mRNA表达下降;同时细胞TGF-3β蛋白和mRNA表达也降低。结论构建的HIF-1α基因shRNA表达质粒在低氧条件下明显抑制滋养细胞TGF-3β基因的表达。

摘要：【目的】探讨信号转导与激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的作用。【方法】根据siRNA(small inter-ference RNA,siRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒,脂质体法将重组质粒转染人宫颈癌HeLa细胞。RT-PCR和Western blotting检测HeLa细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平;MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡。【结果】成功构建了STAT3基因shRNA真核表达载体,转染人宫颈癌HeLa细胞。非特异siRNA组细胞STAT3蛋白、mRNA、细胞增殖率及凋亡率分别为0.55±0.08、0.49±0.05、(4.12±0.45)%和(11.31±1.69)%,而目的siRNA组细胞STAT3蛋白、mRNA、细胞增殖率及凋亡率分别为0.36±0.06、0.32±0.05、(2.51±0.48)%和(17.39±1.58)%。与非特异siRNA组细胞相比,目的siRNA组细胞STAT3蛋白及mRNA表达下降;同时HeLa细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加。【结论】构建的STAT3基因shRNA真核表达载体能够通过下调STAT3基因表达,抑制宫颈癌细胞的增殖能力,诱导细胞凋亡。

摘要：【目的】构建针对HIF-1α基因的短发夹干忧RNA真核表达质粒,探讨低氧条件下其对卵巢癌SKOV3细胞定植和侵袭能力的影响。【方法】根据siRNA设计原则,结合psilencer2.1-U6-neo质粒特点,针对HIF-1α基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后将其克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,采用脂质体法将重组真核表达质粒转染人卵巢癌SKOV3细胞。缺氧培养后,应用实时定量PCR和Western blotting方法检测HIF-1α蛋白及mRNA表达水平;用软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测SKOV3细胞的定植和侵袭能力。【结果】成功构建的HIF-1α的短发状siRNA真核表达载体,转染卵巢癌SKOV3细胞,低氧条件下细胞HIF-1蛋白及mRNA表达水平下降;同时SKOV3细胞在软琼脂中形成的克隆数和穿透Matrigel膜的细胞数明显减少。【结论】构建的HIF-1α短发状siRNA真核表达载体,下调卵巢癌SKOV3细胞HIF-lα基因表达,卵巢癌细胞的定植和侵袭能力降低。