摘要：目的探讨均匀设计在候选内参基因RT-qPCR实验条件优化中的应用,有助于后期实验筛选不同状态下THP-1细胞的稳定内参基因。方法以THP-1细胞cDNA为模板,cDNA模板量、引物浓度和退火温度3个因素为影响因素,应用均匀设计3因素8水平,探索影响候选内参基因RT-qPCR的扩增条件,检测不同实验条件下的扩增效果,在最优扩增条件下建立候选内参基因定量扩增的相对标准曲线,并检测扩增效率。结果通过均匀设计,完成对cDNA模板量、引物浓度和退火温度3因素8水平的实验条件优化,建立候选内参基因RT-qPCR检测的最佳组合为cDNA模板量0.5μg、引物浓度200μmol/L、退火温度55℃。结论本实验选用均匀设计优化RT-qPCR实验条件,筛选出THP-1细胞候选内参基因RT-qPCR的最优实验条件。均匀设计适合于本实验研究多因素多水平试验条件的配比。

摘要：背景:早期胚胎心脏流出道心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞参与了流出道的分隔,但在流出道分隔中的分布规律及作用机制仍然不明。目的:观察心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞在流出道分隔过程中分布的时空规律,探讨其与流出道分隔的关系。设计、时间及单位:单一样本观察,于2006-06/2007-12在山西医科大学组织胚胎学教研室完成。材料:鼠龄3个月的雌性中国昆明小鼠30只,体质量30～32g。方法:妊娠小鼠经乙醚麻醉,收集9～16d胎龄胚胎共32只,制作心脏切片。连续切片每10片取1片做苏木精-伊红染色,其余9片进行免疫组织化学染色。主要观察指标:抗α-平滑肌肌动蛋白、抗结蛋白、抗α-横纹肌肌节肌动蛋白单克隆抗体在胎龄9～16d小鼠胚胎心脏流出道的表达。结果:胎龄10d,可见α-平滑肌肌动蛋白阳性主肺动脉隔形成,同时,α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞沿弓动脉壁迁入流出道心胶质。胎龄11d,流出道心内膜内,α-平滑肌肌动蛋白阳性和α-平滑肌肌动蛋白阴性间充质细胞聚集形成流出道嵴。胎龄12～13d,主肺动脉隔将半月瓣远端流出道分隔为升主动脉和肺动脉干,主肺动脉隔分化为升主动脉和肺动脉干相对的内侧壁。胎龄13d后,半月瓣以下,流出道嵴愈合形成流出道隔,将流出道近段分为左右心室流出道。流出道隔中可见部分α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞聚集呈漩涡状。间充质性流出道隔形成与其肌性化相伴随。结论:流出道心内膜和主肺动脉隔的α-平滑肌肌动蛋白强阳性细胞来自神经嵴。流出道不同部位的α-平滑肌肌动蛋白阳性神经嵴细胞功能不同,与流出道其他细胞成分相互作用,完成流出道的分隔和重建。

摘要：背景:对动物胚胎的活体标记试验表明鸡和小鼠胚胎心脏流出道及右心室来自心管外的咽部中胚层。人胚是否有相似情况作者经文献检索尚未见报道。目的:观察并验证人胚心脏动脉端心肌的来源。设计、时间及地点:单一样本观察,于2005-10/2006-10在山西医科大学组织胚胎学教研室完成。材料:山西医科大学各附属医院药物流产后绒毛膜保存完好的早期人胚标本25例。方法:体视显微镜下仔细分离出胚体。用Carnegie分期法对胚胎进行发育分期,其中C10期、C11期、C12期、C13期、C15期和C16期胚胎各3例,C14期胚胎7例。主要观察指标:应用免疫组织化学PAP法观察了α-平滑肌肌动蛋白和α-横纹肌肌节肌动蛋白在C10晚期至C16期人胚心脏及咽部中胚层的表达型,并用苏木精-伊红染色观察各期心脏及咽中胚层的形态学特征。结果:C10晚期至C12,流出道远端的脏层心包和心包腔的背侧壁为复层上皮,向壁层心包内延伸逐渐变为单层扁平上皮。背侧心包于C13至C15变为单层上皮。C10晚期至C13流出道远端α-平滑肌肌动蛋白和α-横纹肌肌节肌动蛋白表达可延伸至脏层心包及咽部间充质细胞。C14至C15,流出道逐渐延长,其远端的脏层心包细胞增生并迁至流出道,在近流出道心肌细胞处表达α-平滑肌肌动蛋白和α-横纹肌肌节肌动蛋白。结论:C10至C15,咽中胚层不断分化出心肌细胞添加至心脏的动脉端使流出道延长,为人胚的前心区;流出道远端心肌可诱导前心区细胞增殖分化为心肌细胞。人胚心脏动脉端心肌来自前心区。

摘要：基于情景教学法的线上教学方式以促进学生主动融入教学过程为目标,有利于提高线上教学效果。本文以新型冠状病毒肺炎疫情防控期间山西医科大学2019级六年制临床医学专业留学生组织学与胚胎学教学为例,阐述了基于情景教学法的线上教学方式在本课程的教学设计和实施过程。通过过程性评价、终结性评价和问卷调查评价教学效果。结果显示,留学生过程性评价的及格率为93.7%(74/79),优秀率为79.7%(63/79);终结性评价的及格率仅为12.7%(10/79),优秀率为3.8%(3/79);86.6%(58/67)的留学生认为基于情景教学法的线上教学方式有助于他们进行积极主动思考。基于情景教学法的线上教学方式有助于留学生参与课堂学习及其主动思考能力的培养,但如何督促留学生在线上课程结束后合理安排复习,提高其终结性评价成绩,尚需进一步探索。

摘要：目的利用线粒体的特点构建一种特异性好、灵敏度高、稳定性好、操作简便,适用于法医学种属鉴定的复合扩增体系。方法查找Gene bank上常见动物mt DNA序列,用序列比对软件,对人和动物序列进行分析,选出COX1、12SrRNA、16SrRNA区域。使用primer5和primer3(online)设计引物,COX1的引物有人类特异性,12SrRNA和16SrRNA的引物作为内参对照可以匹配人和大部分常见动物。收集人和恒河猴,猪、牛、羊、兔、鲈鱼、鲍鱼、鸭、鸡、狗、鼠11种动物的肌肉或血液样本,用Chelex-100法提取DNA,复合扩增COX1、12SrRNA、16SrRNA基因片段,琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物。结果人的样本出现三条带,分别为COX1、12SrRNA、16SrRNA的扩增产物,大小分别为202、231、395bp;11种动物出现两条带,分别为12SrRNA和16SrRNA的扩增产物,大小分别在230、395bp左右。复合扩增体系灵敏度为2.5pg,而特异性引物COX-1的灵敏度为10-8pg。结论该复合扩增体系可以明确区分人与动物,灵敏度高,可应用法医学中的种属鉴定。