摘要：目的应用实时荧光聚合酶链反应（PCR）方法检测流感病毒，并对2006年广州地区儿童感染流感病毒进行流行病学分析。方法以流感病毒的NP基因序列为参考，综合分析GenBank上的NP基因序列，使用引物和探针设计软件Primer Express设计A／B型流感病毒及A亚型流感病毒各1对特异性引物和1条TaqMan荧光探针，用于分别检测A／B型流感病毒及A亚型流感病毒，建立实时荧光PCR方法，进行灵敏度和特异性检测。采用实时荧光PCR方法，对来自2006年门诊或住院呼吸道感染患儿的12301份咽拭子或鼻腔抽洗液样本进行检测，并与病毒分离方法进行对照。结果实时荧光PCR方法共检出1687份阳性样本，总阳性率为13．71％，其中A型773份（45．8％），全部为H1N1型；B型914份（54．2％）。1—4月份检出流感病毒阳性525例，其中B型流感病毒455例（86．7％），A型（H1N1）流感病毒70例（13．3％）；5—8月份检出流感病毒阳性1118例，其中B型流感病毒419例（37．5％），A型（H1N1）流感病毒699例（62．5％）。病毒培养分离阳性为1380份，均为实时荧光PCR方法阳性，占实时荧光PCR方法阳性者的81．80％。结论实时荧光PCR方法应用于流感病毒的检测具有简便快捷、特异、敏感的特点，2006年广州地区儿童流行性感冒病毒的流行1—4月份以B型流感病毒为主，5—8月份以H1N1亚型流感病毒为主。

摘要：目的 探讨广州地区儿童感染的诺如病毒基因组分子结构特点和基因组类型。方法 参考GenBank上的诺如病毒MD145-12基因组设计分段扩增引物，进行RT-PCR分段扩增诺如病毒基因组，克隆于T载体上，测定序列，用Clustal W／X、DNAStar、RAT（recombination analysis tool）等软件分析基因组序列。结果 诺如病毒NVgz01全基因组为7558bp，提交到C,enBank上的序列号为DQ369797，3’端非编码区末端长45bp，病毒基因组有3个开放阅读框（ORF），ORF1长5100bp（5～5104nt），ORF2基因长1623bp，位于基因组中5085～6707nt之间，ORF3基因长807bp（6707～7513nt），其中ORF1、ORF2两基因有19个核苷酸的重叠区；NVgz01全基因组核苷酸序列与GenBank上诺如GI组Norwalk68、Southampto、BS5、Chiba、WUG1的同源相似性在43％～44％之间，与GⅡ组MD145、Farmington　Hills、B4S5、Hawaii、Lordsdale、SaitamaU1、Mc37同源相似性在76％～90％之间。NVgz01的ORF1与Mc37核苷酸序列同源性为94％，但ORF2与Mc37的同源性只有65％；NVgz01的ORF2与Fannillgton Hills（AY502023）同源性为最高（94％），ORF1的同源性为88％。结论广州地区儿童腹泻感染的诺如病毒NVgz01株全基因组序列为7558bp，GenBank序列号为DQ369797，NVgz01与诺如病毒的GⅡ组同源性较高，确认NVgz01株属于诺如病毒GⅡ组；根据ORF1、ORF2的同源性差异和RAT程序分析初步认为NVgz01可能是重组病毒。