摘要：目的构建3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)基因shRNA慢病毒干扰载体,建立3β-HSD基因沉默细胞株,研究3β-HSD基因沉默对塑化剂邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯(DEHP)致凋亡的影响。方法根据GenBank提供的3β-HSD基因mRNA序列,设计合成3条干扰序列,退火后连接到PLVX-shRNA2-puro中,将重组慢病毒载体转染293FT细胞,收集病毒上清,感染MCF-7细胞。利用嘌呤霉素筛选得到3β-HSD沉默细胞株,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Westernblot)对干扰效果进行鉴定。用不同剂量DEHP对MCF-7细胞和3β-HSD沉默细胞染毒24h,检测凋亡基因Bax、Caspase-3、Caspase-8的基因和蛋白表达水平的变化。结果该实验插入慢病毒载体PLVX-shRNA2-puro中的3β-HSD基因干扰序列与设计的序列一致;3β-HSD沉默细胞中3β-HSD基因表达水平较对照组MCF-7细胞降低77%,3β-HSD蛋白表达水平较对照组MCF-7细胞降低74%。不同剂量DEHP染毒3β-HSD沉默细胞和MCF-7细胞后,qRT-PCR结果显示,MCF-7细胞中Bax基因表达水平较对照组(0mmol/LDEHP)升高28%~54%,Caspase-3基因表达水平升高13%~49%,Caspase-8基因表达升高21%~70%。与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD沉默细胞中Bax基因表达水平降低11%~28%,Caspase-3基因表达降低12%~23%,Caspase-8基因表达降低11%~34%。Westernblot结果显示,MCF-7细胞中BAX蛋白表达水平较对照组升高28%~61%,Caspase-3蛋白表达升高40%~48%,Caspase-8蛋白表达升高31%~84%。与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD沉默细胞Bax蛋白表达水平降低11%~27%,Caspase-3蛋白表达降低21%~40%,Caspase-8蛋白表达降低12%~25%。结论该研究成功构建了3β-HSD基因沉默细胞株。DEHP可引起细胞凋亡基因及蛋白表达升高,3β-HSD基因沉默能在一定程度上抑制DEHP对凋亡基因的活化。

摘要：“大学生素质拓展计划”是一项系统教育工程.其通过开发人力资源、注重职业导航,在恩想政治与道德素养、社会实践与志愿服务、学术科技与创新创业、文化艺术与身心发展、社团活动与社会工作、技能培养等六大方面拓展素质的提升.本文分析了专业教师职业导航在大学生素质拓展中的作用,提出了专业教师如何开展职业导航工作内容以及职业导航教师的素质相关要求.

摘要：通过线上教学、线下理论教学和创新实践教学3个环节,开展了构建注重学生成长的教学模式、设计紧跟医学发展的课程内容、组建推进学科交叉的师资队伍、建设产教研融合的创新基地等探索实践,以不断完善课程建设的新理念、新定位、新模式、新质量及新体系,构建紧跟医学发展且具有全球视野、文化传承、自主创新等特点的培养体系,为流行病学课程教育教学改革提供新思路和新策略。

摘要：公共卫生学科的学生将面临新发、突发公共卫生事件,需要不断提高自主学习能力。文章以学校全面推行的“三学期制”为契机,通过夏季学期开设“如何提高自主学习能力”的针对性讲座,在随后的秋季和春季学期的学习中得以应用和验证,进而在自主设计实验中激发学生的创新和科学实践能力,提高公共卫生学科学生的自主学习能力。