摘要：热爱生活的女艺术家以神奇的想象力,塑造了一系列不存在于世的奇幻生物雕塑,带领人们进入超现实的魔幻之旅。"看见它的第一眼,我屏住了呼吸。"初见埃伦·朱厄特(Ellen Jewett)的动物形态雕塑,有人发出了这样的感慨。颓败的狐狸骨架里嵌满了鸟笼和齿轮等物件;形态逼真的金鱼身上长出绿色的枝桠;双眼灵动的兔子骨架被藤蔓包裹,上面落着黄色的蝴蝶……雕塑出的动物真实又怪异,仿佛美好的童话故事里,女巫念起了魔咒,世间万物瞬间改变。

摘要：自1490年意大利艺术家、科学家达·芬奇利用声管听到水中的声音起,声呐技术发展至今已有500多年的历史。在两次世界大战期间,反潜战使声呐成为海军不可或缺的耳目,推动着声呐技术逐步趋于成熟。近年来,随着微电子技术、信号处理技术的发展以及人们对声传播规律的认识, 声呐技术有了长足的进步,出现了多种低频、大功率,大尺寸基阵声呐和新体制声呐。本文将谈及现代声呐技术的几个发展方向。

摘要：背景:动物实验证明乙醇可引起股骨头内脂肪积聚,导致骨坏死,其作用机制不详。NIH3T3成纤维细胞是一种多潜能干细胞,尚未见关于乙醇对NIH3T3成纤维细胞作用的有关报道。目的:观察乙醇对NIH3T3成纤维细胞分化为脂肪细胞的作用,及其对成脂转录因子过氧化物酶体增殖子活化受体-γ表达的影响。设计:单一样本观察。单位:郑州大学基础医学院生物化学教研室和郑州大学第一附属医院骨科。材料:NIH-3T3成纤维细胞由美国弗吉尼亚大学医院骨科实验室提供。方法:实验于2002-04/2003-06在郑州大学基础医学院生物化学教研室实验室完成。取NIH-3T3成纤维细胞随机分为6组,每天分别加入体积分数为0.998乙醇,剂量为0(对照组),0.03,0.06,0.09,0.15,0.21mol/L,培养至14d,苏丹Ⅳ染色,采用电子计算机图像分析软件ImageProPlus4.1,确定脂肪细胞百分比。采用反转录聚合酶链反应技术,检测细胞过氧化物酶体增殖子活化受体-γmRNA的表达。主要观察指标:①NIH3T3细胞分化为脂肪细胞结果。②乙醇组和对照组细胞基因表达结果。结果:以递增浓度(0.03,0.06,0.09,0.15,0.21mol/L)乙醇处理细胞14d。①各乙醇组中脂肪细胞百分比分别为11.9%,23.8%,28.2%,31.1%,42.6%,分别是对照组(9.6%)的1.2,2.5,2.9,3.2,4.4倍。0.03mol/L乙醇组与对照组的差别无统计学意义(P>0.05),其余4组与对照组及0.03mol/L乙醇组的差别有高度显著性(P0.05)。其余4组与对照组及0.03mol/L乙醇组的差别有高度显著性(P<0.001)。结论:乙醇能够直接诱导NIH3T3成纤维细胞大量分化为脂肪细胞,这可能是乙醇性骨坏死时骨髓内脂肪增多的原因之一。

摘要：目的构建靶向过氧化物酶体增殖活化受体-γ（PPAR-γ）基因的siRNA载体。方法根据siRNA设计原则，在PPAR-γ mRNA（AF013266）序列中设计2个特异性靶序列（677-695和497-515）；体外合成对应发卡样DNA片段，退火后加A处理，先将其克隆入T载体，再亚克隆入siRNA载体pRNAT-U6．2，对插入序列进行DNA序列分析。结果发卡样siRNA单链DNA寡核苷酸，退火后，电泳可见明亮靶条带；T7／SP6作为引物进行PCR扩增，筛选得到阳性克隆pGEM-T-SP-PAR-γ1和pGEM-T-SPPAR-γ2。PCR扩增鉴定得到阳性亚克隆pRNAT-U6．2-SPPAR-γ1和pRNAT-U6．2-SPPAR-γ2，测序证实插入序列与设计完全一致。结论成功构建2个PPAR-γ基因靶向性siRNA载体pRNAT-U6．2-SPPAR-γ；为PPAR-1基因沉默的研究提供实验工具。

摘要：目的构建靶向过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ)基因的小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)载体,转染骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)后观察其对PPARγmRNA的抑制作用。方法根据siRNA设计原则,在PPARγmRNA序列中选择2个特异性靶序列(677-695和497-515)及同时设计1条无关对照序列；体外合成对应发卡样DNA片段,经退火后,将其定向克隆入siRNA载体pR- NAT-U6．2,将重组siRNA载体pRNAT-U6．2-PPARγ用脂质体包裹转染入MSCs后,采用RT-PCR检测PPARγ基因mR- NA表达水平的变化。结果得到阳性重组克隆pRNAT-U6．2-SPPARγ,经过PCR鉴定与测序,结果正确；RT-PCR检测转染MSCs显示,PPARγ基因的表达水平明显降低。结论成功构建靶向PPARγ基因的siRNA载体pRNAT- U6．2-SPPARγ,转染MSCs可以有效抑制PPARγmRNA的表达,这为预防酒精性股骨头坏死发生的研究奠定了可靠基础。

摘要：背景:葛根素属异黄酮类物质,研究发现其具有减轻酒精毒性和酒精戒断症状的作用,此外还可以抗氧化、清除组织及细胞产生的氧自由基、减轻脂质过氧化对细胞的损害。目的:探讨葛根素对酒精导致的人骨髓间充质干细胞成脂分化的抑制作用。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-10在郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室实验室完成。材料:骨髓取自健康成人志愿者,由郑州大学第一附属医院骨科提供。葛根素标准品由中国药品生物制品检定所提供。方法:采用梯度离心法分离培养人骨髓间充质干细胞,取传2代细胞,随机分为3组:空白对照组加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养基;模型组每天加入乙醇0.09mol/L;实验组每天加入酒精0.09mol/L,每两三天更换培养液时加入葛根素10-6mol/L。各组细胞培养7d。主要观察指标:采用RT-PCR法检测PPAR-γ2基因的表达,油红"O"染色进行脂肪细胞计数,测定细胞内碱性磷酸酶活性。结果:模型组PPAR-γ2mRNA呈高表达,明显高于实验组和空白对照组(P0.05)。模型组脂肪细胞最多,细胞内脂滴大而丰富;实验组脂肪细胞较模型组显著减少(P<0.05);空白对照组脂肪细胞极少。与空白对照组比较,模型组细胞内碱性磷酸酶活性明显降低(P<0.05);与模型组比较,实验组细胞内碱性磷酸酶活性明显升高(P<0.05)。结论:葛根素能抑制酒精导致的骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化。

摘要：目的构建、鉴定靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ（PPAR-γ）基因的siRNA腺病毒载体。方法遵循siRNA片段的设计原则，依据GenBank中PPAR吖基因（AF013266）的序列，设计3个特异性靶序列（36～54位、73～91位和404～422位）；体外合成对应发卡样DNA片段，经退火后，将其克隆入***载体，通过PCR和I-CeuI和PI-SceI酶切鉴定后，再亚克隆入pAdeno-X腺病毒载体。对插入序列进行DNA序列分析。结果发卡样siRNA单链DNA寡核苷酸退火后，电泳可见明亮靶条带；PCR扩增和酶切鉴定得到阳性克隆pSIREN-Shuttle—siPPAR-γ1、pSIREN-Shuttle—siPPARγ-2和pSIREN-Shuttle—siPPARγ-3。亚克隆重组腺病毒载体pAdeno—***^t-1、pAdeno—X-siPPARγ-2和pAdenc-X—siPPARγ-3，经测序鉴定证实插入DNA序列与设计完全一致。结论成功构建3个靶向PPARγ基因的siRNA重组腺病毒载体，为进一步的基因治疗研究奠定了实验基础。

摘要：目的:构建针对过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)基因的siRNA腺病毒载体。方法:依据siR-NA设计原则,在PPARγmRNA(AF013266)序列中设计2个特异性靶序列(36-54、73-91),体外合成对应发卡样DNAs,退火后先将其克隆入pSIREN-Shuttle载体,再亚克隆入pAdeno腺病毒载体,对插入序列进行DNA序列分析。结果:发卡样siRNA单链DNA寡核苷酸退火后,电泳可见明亮靶条带。连接退火寡核苷酸和pSIREN-Shuttle载体得到阳性克隆pSIREN-Shuttle-siPPARγ-36、pSIREN-Shuttle-siPPARγ-73。同源重组后得到亚克隆pAdeno-siPPARγ-36、pAdeno-siPPARγ-73,测序证实插入序列与设计序列完全一致。结论:成功构建2个靶向PPARγ基因的siRNA载体pAdeno-siPPARγ-36和pAdeno-siPPARγ-73。

摘要：目的:构建同时沉默Livin基因和MTA1基因的小干扰RNA(siRNA)载体。方法:设计Livin和MTA1的siRNA靶序列,合成它们互补的寡核苷酸链,分别退火后重组入pRNAT-U6.2载体,得到pRNAT-U6.2-Livin和pR-NAT-U6.2-MTA1。AccⅡ和XhoⅠ酶切pRNAT-U6.2-MTA1,回收475bp的MTA1siRNA单元,然后与XhoⅠ和PmeⅠ酶切线形化的pRNAT-U6.2-Livin重组,得到pRNAT-U6.2-Livin-MTA1,后者用脂质体包被转染人食管癌细胞EC9706,采用RT-PCR法分别检测转染细胞Livin和MTA1基因mRNA的表达情况。结果:针对Livin基因和MTA1基因的siRNA的双链寡核苷酸片段分别克隆入pRNAT-U6.2载体,经测序分析插入片段正确。PCR扩增证实MTA1siRNA单元重组入pRNAT-U6.2-Livin。RT-PCR检测显示,转染pRNAT-U6.2-Livin-MTA1的EC9706细胞Livin基因和MTA1基因mRNA表达水平皆明显降低。结论:同时沉默Livin基因和MTA1基因表达的siRNA载体构建成功。

摘要：背景:动物实验证明乙醇可引起股骨头内脂肪积聚,导致骨坏死。分子生物学实验证明乙醇能够诱导骨髓基质细胞成脂分化。若某种药物能够对抗乙醇诱导骨髓基质细胞的成脂分化作用,则可能防治酒精性骨坏死。目的:从细胞生物学角度观察葛根素对抗酒精诱导骨髓基质细胞成脂分化作用,探讨葛根素对酒精性骨坏死的防治作用。设计:随机对照实验。单位:郑州大学第一附属医院骨科和郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室。材料:实验于2000-04/2002-12在郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室实验室完成。选用清洁级健康昆明小鼠50只,6～8周龄,雌雄不拘。获取双侧股骨骨髓细胞,细胞接种密度1.5×106/cm2,置入6孔及24孔培养板内,随机分组,每孔作为1个样本,每组为24个样本。方法:分离培养小鼠骨髓基质细胞,随机分为3组:模型组(给予乙醇0.09mol/L处理细胞),实验组(乙醇0.09mol/L和葛根素终浓度为0.01g/L),对照组(无乙醇和葛根素)。苏丹Ⅲ染色,光镜下脂肪细胞计数;测定细胞内三酰甘油含量、碱性磷酸酶活性和细胞培养液中的骨钙素含量。主要观察指标:①3组小鼠骨髓基质细胞分化为脂肪细胞结果。②3组小鼠骨髓基质细胞内三酰甘油含量。③3组小鼠骨髓基质细胞内碱性磷酸酶活性值。④3组细胞培养液中骨钙素含量。结果:①处理细胞并培养21d后,实验组、对照组中脂肪细胞均比模型组显著为少。模型组中脂肪细胞数是实验组的8.9倍,是对照组的15.6倍[(319.17±19.92),(35.92±23.77)(20.42±12.15)个/cm2,P<0.001]。②处理细胞并培养21d后,实验组和对照组中三酰甘油含量均明显低于模型组[(4.15±1.92)和(3.42±1.60),(11.55±4.42)μg/孔,P<0.001]。③处理细胞并培养12d后,实验组和对照组细胞内碱性磷酸酶活性均明显高于模型组[(9.51±2.96),(11.18±3.11),(4.84±2.23)μkat/g,P<0.001]。④处理细胞并培养14d后,实验组和对照组培养液中的骨钙素含量分别是模型组的2.2倍和2.7倍,与模型组间的差异均非常显著[(11.11±4.57),(13.43±5.29),(4.95±2.31)μg/g,P<0.001]。结论:葛根素能够抑制酒精诱导骨髓基质细胞分化为脂肪细胞,维持其成骨分化,可能预防骨坏死。