摘要：目的探讨人腺苷酸活化蛋白激酶5（ARK5）基因RNA干扰（RNAi）慢病毒载体的构建及其对人胃癌SGC7901细胞生物学行为的影响。方法以人ARK5mRNA编码序列为干扰靶点，设计3条沉默ARK5的特异性短发卡RNA（shRNA），构建重组慢病毒表达载体，转染人胃癌SGC7901细胞。采用实时荧光定量PCR和Westernblot检测ARK5基因的沉默效果，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖能力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell法检测细胞侵袭能力，流式细胞仪检测葡萄糖饥饿和肿瘤坏死因子α（TNF—α）诱导处理对细胞凋亡的影响。结果测序结果证明，RNAi重组慢病毒载体ARK5-shRNA-3构建成功。实时荧光定量PCR检测显示，正常对照组、阴性对照组和ARK5-shRNA-3转染组的ARK5基因表达水平分别为1．002±0．082、1．001±0．050和0．140±0．003。***-3转染组与正常对照组、阴性对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。细胞划痕实验显示，ARK5-shRNA-3转染组的细胞迁移率为（38．5±4．3）％，而正常对照组和阴性对照组的细胞迁移率分别为（72．4±6．4）％和（75．1±7．1）％，差异有统计学意义（P〈0．01）。Transwell检测结果显示，正常对照组、阴性对照组和ARK5-shRNA-3转染组的穿膜细胞数分别为（257．4±12．3）个、（245．7±11．6）个、（112．5±7.8）个，ARK5-shRNA-3转染组与正常对照组、阴性对照组差异有统计学意义（P〈0．01）。在葡萄糖饥饿和TNF-α处理24h后，正常对照组、阴性对照组和ARK5-shRNA-3转染组的细胞凋亡率分别为（11．7±3．2）％、（12．3±2．6）％和（30．8±4．3）％，ARK5-shRNA-3转染组与正常对照组、阴性对照组差异有统计学意义（P〈0．01）。结论成功构建了能高效沉默ARK5基因的重组慢病毒表达载体，并且明显地抑制了胃癌细胞增殖、迁移和侵袭，促进了胃癌细胞在饥饿胁迫及TNF—α诱导情况下的凋亡。