摘要：本实验参照已发表的猪瘟病毒(CSFV)石门株、HCLV株、Paderborn株、GXWZ02株等的基因组序列设计合成了11对引物,通过RT-PCR方法从广西一株流行猪瘟病料中直接扩增得到了11个片段,将所得片段克隆至PGEM-Teasy载体上,经过测序、拼接,最终得到广西猪瘟GX54基因组全序列。序列分析表明,GX54基因组全长12296个碱基。与国内外已发表的10株猪瘟病毒系列进行同源性分析,结果表明,与各株核苷酸同源性分别为85.1%、85.0%、85.1%、84.7%、84.8%、94.4%、84.3%、94.3%、84.8%、84.5%。系统发育树分析发现,所比较的11个毒株可以分为2群,1群包括GX54,GXWZ02和Paderborn株,其余毒株属于2群,其中GX54株与GXWZ02株关系最近。

摘要：根据GenBank公布的猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）Shimen株全基因序列，设计并合成2对引物，用RT—PCR方法对采自陕西省部分地区的30份CSF病料中，CSFV流行毒株的E2基因进行了扩增，并将其克隆入pMD18-T载体，转化感受态大肠杆菌DH5α。提取pMD-18T-E2重组质粒，进行BamHⅠ、HindⅢ双酶切鉴定，并对阳性质粒进行测序，将测序结果与HCLV疫苗株和shimen株E2基因及E2蛋白进行序列分析。结果表明，从30份病料中共扩增到10株CSFV流行毒株的E2基因；扩增的10株陕西CSFV流行毒株E2基因同源性为92．3％～99．6％，与Shimen株及HCLV疫苗株的同源性为75．0％～79．4％；10株CSFV流行株E2蛋白的同源性为90．0％～100％，与Shimen株和HCLV疫苗株E2蛋白的同源性分别为78．9％～84．4％和77．8％～83．3％。说明所扩增的10株陕西CSFV流行毒株的E2基因发生了较大变异。

摘要：思想政治工作应贯穿教育教学全过程。高职院校在学生中开展“课程思政”是树立社会主义核心价值观、培育学生全面发展成才的重要抓手。《动物疫病防治技术》是专业核心课程,对畜牧兽医专业学生核心能力的培养有着极其关键的作用。文章从高职《动物疫病防治技术》实施课程思政的意义、课程思政元素的挖掘、课程思政教学设计及课程思政的实施四个方面进行探索,使学生获得专业知识的同时,接受德育培育,让学生成为德才兼备、全面发展的人才。

摘要：【目的】分析目前陕西省猪瘟病毒(CSFV)流行毒株的E0、E2全基因分子特征,为猪瘟防控提供参考。【方法】根据CSFV Shimen株及HCLV株全基因序列,设计并合成了4对引物,采用RT-PCR方法,从采自陕西不同地区的猪瘟病料中扩增E0、E2全基因并进行序列测定分析。【结果】从采集的病料中成功扩增了5株猪瘟流行毒株的E0、E2全基因,这5株流行毒株E0基因核苷酸同源性在94.4%～99.8%,与参考毒株ALD、Alfort187、Bres-cia、CAP、Glentorf、GPE、GXWZ02、HCLV、Paderborn、Rimes和Shimen的核苷酸同源性在80.4%～96.3%,氨基酸同源性在86.5%～99.3%。5株流行毒株E2基因核苷酸同源性在91.1%～98.0%,与参考毒株的核苷酸同源性在77.7%～94.6%,氨基酸同源性在85.2%～95.9%。5株流行毒株E0Rnase活性区域氨基酸基序位点没有变异,但导致流行毒株发生免疫逃逸的E2蛋白关键位点中有3个发生了变异。【结论】测定的陕西省猪瘟流行毒株E0、E2基因序列变异明显,其中E2蛋白关键位点变异较大。

摘要：为建立一种灵敏特异的检测鹦鹉喙羽症病毒PCR方法,给临床快速诊断鹦鹉喙羽症提供技术支持,根据Genbank上公开的鹦鹉喙羽症病毒基因序列,比对分析找出高保守区域,设计了1对检测引物,提取鹦鹉喙羽症病毒阳性样品DNA模板,对扩增体系和反应条件进行一系列调整,确定理想的PCR反应方案;通过10倍梯度稀释DNA模板法,确定该检测方法的灵敏度极限;应用该方法检测传染性法氏囊炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、新城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、鸡痘病毒和Ⅰ群禽腺病毒4型这6种禽病病原,确定方法的特异性;运用该PCR方法检测90份临床样品,测试其实用性。结果表明,设计的检测引物能特异性扩增鹦鹉喙羽症病毒,其它6种家禽病毒均为阴性,其检测DNA浓度的下限是3.725×10^(-6)ng/μL。临床应用表明,90份疑似病料有28份为阳性,阳性率为31.1%。成功建立了一种灵敏度高、特异性好的鹦鹉喙羽症病毒PCR方法。