摘要：目的编制一套用于评价口服抗凝药物治疗患者知识、信念、行为的调查问卷。方法以知信行理论为指导,采用文献分析和访谈法设计口服抗凝药物治疗患者知信行初始问卷;采用Delphi法就初始问卷进行专家函询,并围绕专家建议修改问卷,形成最终问卷。结果向18名专家进行两轮函询,每轮函询均发放和回收18份问卷,专家积极系数为100%,专家权威系数为0.94。两轮函询中问卷所有维度、因子、条目的重要性均分均≥4分,变异系数均≤0.25,问卷整体及知识、信念、行为3个维度的肯德尔和谐系数为0.09~0.34(P均<0.05)。第一轮专家函询后修改4个条目,删除2个条目,新增5个条目;第二轮专家函询后修改10个条目。最终形成的问卷包含知识、信念、行为3个维度,17个问卷因子,40个条目。结论所编制的口服抗凝药物治疗患者知信行问卷的可靠性和科学性均较高,专家意见较一致,可用于评估口服抗凝药物治疗患者的知识、信念、行为现状。

摘要：[目的]优化水杉总黄酮的提取工艺。[方法]采用均匀设计方法,利用紫外分光光度法测定水杉中总黄酮的含量。[结果]以80%的乙醇浓度7、0℃、15倍量,每次提取15 min为最佳提取条件。[结论]试验结果可为水杉总黄酮的提取工艺的确定提供科学依据。

摘要：目的设计合成新型高分子材料壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物,并考察该材料与siRNA复凝后对人肝癌HepG-2细胞的转染能力。方法采取Michael加成法将含C=C双键的磺酸甜菜碱化合物(DMAAPS)与壳聚糖(CS)偶联接枝;利用核磁共振氢谱进行结构表征;CCK-8检测材料的细胞相容性;荧光显微镜观察siRNA的转染效率;Real-time PCR检测转染siRNA后对Bcl-2 mRNA的沉默效率。结果核磁共振氢谱数据表明:DMAAPS已成功枝接到CS上。荧光显微镜观察结果显示:质量比(m0/mt:CS-DMAAPS/siRNA)为32、16、8、4、2的复合颗粒分别转染人肝癌HepG-2细胞24 h后,转染率分别为33.78%、45.82%、50.98%、69.89%、81.22%。Real-time PCR检测结果显示:质量比为4的CS-DMAAPS/siRNA复合颗粒转染人肝癌HepG-2细胞48 h后,对人肝癌HepG-2细胞的Bcl-2基因沉默效率为26.8%。结论壳聚糖-磺酸甜菜碱(CS-DMAAPS)化合物能实现siRNA对人肝癌HepG-2细胞的转染,且细胞相容性良好,能实现目标基因的部分沉默。

摘要：2013年,遵义医科大学启动卓越医生教育培养计划,推动多学科课程教学模式的改革,其中生物化学实验通过改革课程设置,合理分配教学学时;课程细化,完善课程教学;优化实验教学,灵活采用网络教学、讨论式教学等多种教学模式;考核多元化,综合评定学生学习情况,关注个别差异,以期达到综合评定学生的标准,进而激发学生主观能动性,认知自我,积极参与教学过程,使得实验内容体现出基础性、综合性、设计性、创新性,呈现出层层递进、不断提高的模式,培养了学生的自主学习能力、创新意识、团队合作精神,并启蒙与引导学生的科学创新和设计能力,收获了良好的教学效果。

摘要：目的研究DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡的影响。方法实验分为空白对照组、脂质体对照组、NC对照组、siDNA-PKcs实验组。采用噻唑蓝(MTT)法检测耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药性;采用阳离子脂质体法将siDNA-PKcs寡核苷酸片段转染Bel7402/5-Fu细胞;Real-time PCR和Western blot分别检测细胞DNA-PKcs mRNA及蛋白的表达情况;倒置荧光显微镜下观察细胞形态变化(Hoechst33342染色法);流式细胞术检测细胞凋亡情况(AnnexinV/PI双染法);Western blot检测B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-x基因长片段(Bcl-xl)蛋白的表达情况。结果 MTT检测Bel7402/5-Fu细胞的半抑制浓度(IC50)明显增高,耐药细胞Bel7402/5-Fu的耐药指数为13.13;DNA-PKcs的mRNA与蛋白表达水平明显减少,设计的siDNA-PKcs特异序列能有效沉默细胞DNA-PKcs的表达;Hoechst-33342染色检测结果显示siDNA-PKcs实验组细胞体积缩小、细胞核边集、呈亮蓝色;流式细胞术检测结果显示,siDNA-PKcs实验组细胞凋亡率比其余组增加(P<0.01);Western blot检测结果显示siDNA-PKcs实验组Bax蛋白表达水平比其余组高,Bcl-xl蛋白表达水平比其余组低(P<0.01)。结论siDNA-PKcs能诱导肝癌耐药细胞Bel7402/5-Fu细胞凋亡,并能上调促凋亡蛋白Bax的蛋白表达水平,抑制抗凋亡蛋白Bcl-xl的蛋白表达水平。