摘要：建立一种快速定量检测混合肉制品中牛肉成分含量的方法。以牛线粒体细胞色素b基因为目的基因,真核生物核糖体18S rRNA为内参基因,设计引物;采用基于SYBR green I的实时荧光PCR技术对已知牛肉添加比例的混合肉样标准品建立标准曲线模型。结果显示,该方法在0.05%-100%区间具有良好的线性和扩增效率;通过熔解曲线验证了具有良好的特异性;通过对模拟样品的验证试验,证实该方法适用于对牛肉含量的检测,对市售加工食品具有较好的应用性。此方法可作为测定混合肉制品中牛肉含量的检测方法。

摘要：编队行驶是指两辆及以上的车辆,利用通信技术和自动驾驶技术使彼此之间保持一定的车距并以稳定的速度进行行驶。近年来随着无线通信技术和自动驾驶技术的快速发展,重型商用车编队行驶成为重点研究的方向,它有助于提高运输的安全性、效率,同时可以降低能源消耗和尾气排放。设计运行条件(ODC)是编队行驶系统的必备条件,即系统可以启动、安全执行动态驾驶任务的条件。文章通过分析国际上关于设计运行条件的构建方法研究现状,结合编队行驶系统的功能特点,提出了适用于重型商用车编队行驶的设计运行条件,并对动静态实体、环境、驾乘人员、车辆状态、跟车距离做了分析,用于保障编队行驶功能在设计运行范围(ODD)内的稳定运行,有助于提升系统安全。

摘要：免费艾滋病抗病毒治疗启动20年来,我国在HIV诊断、治疗和预防等方面都取得了显著的进展。但与世界HIV领域面临的难题一样,由于目前抗HIV药物无法清除潜伏HIV形成的储存库,导致患者无法停药。针对HIV储存库的研究成为国内外HIV研究领域的难点和热点。本文对我国的科研团队在HIV储存库方面的一些研究进展进行了回顾与总结。1 HIV储存库检测方法的建立HIV储存库检测方法的建立是针对HIV储存库进行研究的前提和基础。HIV DNA是反映HIV储存库大小的重要指标,吴昊教授研究团队首先建立了针对HIV DNA进行定性和定量检测的方法[1-3]。此外,邓凯教授团队还设计了一种基于HIV vpu/env mRNA表达的定量PCR测量方法。经过多种实验验证,该方法能够很好地避免基于gag/pol设计所带来的测量缺陷型病毒的缺点[4]。

摘要：目的:通过抑制乳酸产生相关基因丙酮酸脱氢酶激酶3(PDHK3)的表达,降低CHO细胞系的乳酸表达,增加CHO细胞系蛋白表达量。方法:针对PDHK3序列设计特定的shRNA质粒,在CHO细胞系构建过程中将含有此shRNA的质粒与表达抗体蛋白的质粒一同转染至宿主细胞中,经过抗生素筛选后进行批次补料生产抗体蛋白。测定乳酸及蛋白产量,同时检测PDHK3基因的mRNA表达水平及shRNA质粒中的neomycin基因拷贝数。结果:利用此方法分别转染的不同抗体蛋白分子,PDHK3基因的mRNA水平降低了65.0%~76.0%,批次补料过程乳酸含量显著降低,同时相应的抗体蛋白表达量提升了18.6%~233.0%。结论:利用shRNA方法抑制乳酸相关的PDHK3基因的表达,可以有效降低乳酸表达,同时提高目的蛋白的表达。

摘要：基于细胞划痕实验研究了DDX20基因对胃癌细胞迁移能力的调控作用。首先采用实时定量PCR检测人胃粘膜细胞GES、胃癌细胞MGC803、SGC7901和MKN74中DDX20基因的表达水平,确定DDX20基因高表达和低表达细胞株;进而针对DDX20基因设计、包被过表达并干扰慢病毒,基于实时定量PCR和Western Blot筛选稳定转染细胞株;基于稳定转染细胞株进行细胞划痕实验并采集图片。结果显示,与正常的胃粘膜细胞GES相比,DDX20基因在MGC803胃癌细胞中表达水平最高、MKN74胃癌细胞中表达水平次之、SGC7901胃癌细胞中表达水平最低。转染DDX20过表达慢病毒后,DDX20基因及蛋白表达水平显著增加;转染DDX20干扰慢病毒后,DDX20基因及蛋白表达水平显著降低,特别是转染干扰组2干扰慢病毒。过表达DDX20基因能显著促进胃癌细胞的迁移,抑制DDX20基因的表达可显著降低胃癌细胞的迁移。结果表明,DDX20基因是一个肿瘤转移相关基因,通过抑制该基因的表达能有效降低肿瘤细胞的迁移,为胃癌的临床治疗提供了一个潜在靶点,具有一定的临床应用价值。

摘要：目的:基于细胞划痕实验研究DDX20基因对胃癌细胞迁移能力的调控作用。方法:首先采用实时定量PCR检测人胃黏膜细胞GES,胃癌细胞MGC803、SGC7901和MKN74中DDX20基因的表达水平,确定DDX20基因高表达和低表达细胞株;进而针对DDX20基因设计并包装过表达及干扰慢病毒,基于实时定量PCR和Western印迹筛选稳定转染细胞株;基于稳定转染细胞株进行细胞划痕实验并采集图片。结果:与正常的胃黏膜细胞GES相比,DDX20基因在MGC803胃癌细胞中表达水平最高,在MKN74胃癌细胞中表达水平次之,在SGC7901胃癌细胞中表达水平最低。转染DDX20过表达慢病毒后,DDX20基因及蛋白表达水平显著增加;转染DDX20干扰慢病毒,特别是sh-RNA-02干扰慢病毒后,DDX20基因及蛋白表达水平显著降低。过表达DDX20基因能显著促进胃癌细胞的迁移,抑制DDX20基因的表达可显著降低胃癌细胞的迁移。结论:DDX20基因是一个肿瘤转移相关基因,通过抑制该基因的表达能有效降低细胞的迁移,为胃癌的临床治疗提供了一个潜在靶点,具有一定的临床应用价值。