摘要：目的 建立高效的腺苷酸依赖的蛋白激酶(AMPK)的制备方法,并建立1种基于酶联免疫吸附(ELISA)法的AMPK的激酶活性检测方法以用于药物筛选。方法 利用大肠杆菌表达系统,将AMPK的α、β和γ 3个亚基与钙调素依赖性蛋白激酶β(CAMKK β)共表达,重组AMPK被CAMKK β磷酸化修饰并激活,进而纯化得到具有激酶活性的重组AMPK蛋白复合体。根据AMPK底物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的磷酸化修饰位点(Ser79)设计合成生物素标记的多肽(SAMS)作为AMPK激酶的底物。在ATP存在的情况下AMPK对生物素标记的SAMS多肽进行磷酸化修饰,反应产物转移到链霉亲和素包被的酶标板中,SAMS多肽通过链霉亲和素结合到酶标板。以能够识别SAMS磷酸化修饰的抗体作为一抗进行ELISA检测,SAMS的磷酸化修饰水平反应AMPK的激酶活性。结果 利用大肠杆菌表达系统成功得到有激酶活性的AMPK蛋白复合体,建立了ELISA检测AMPK的激酶活性方法。通过对AMPK激活剂A-769662检测,证明该方法可以用于AMPK激活剂/抑制剂的筛选。结论 通过构建大肠杆菌共表达系统,成功获得了AMPK激酶,与传统方法相比更为简洁高效;建立的AMPK的激酶活性检测方法操作简单、准确度高且安全高效,有望用于海洋活性分子的大规模筛选,加快我国“蓝色药库”的开发。

摘要：本文研究了OFDM调制技术在短波通信中的应用,提出了一个基于OFDM调制的短波通信电台的设计方案并完成了软硬件系统设计。对实验样机的测试结果表明,本系统性能指标能够满足实际要求。

摘要：目的实施压疮的监控和呈报,预防压疮的发生。方法组织护士学习压疮的相关知识和运用压疮危险因素进行护理评估,设计压疮报表和难免性压疮的申报条件,采取规范化的预防护理措施。结果提高了广大护士主动预防压疮的意识,使对危重患者未发生压疮前的评估及采取预防措施成为临床护理工作的重点。结论实施压疮的监控和呈报,能及时发现院外带入压疮,减少甚至避免院内压疮的发生。