摘要：针对我国北方地区灌区防渗衬砌遭受冻胀破坏的问题,分析了防渗衬砌发生冻胀时的主要破坏形式,揭示了渠床基土冻胀作用是造成灌区防渗衬砌冻胀破坏的核心要素。在基土冻胀回避与置换、保温垫层布设以及地下水排除等方面探索了灌区防渗衬砌的综合防治对策。研究可为灌区防渗衬砌冻胀破坏的综合防治提供决策依据。

摘要：大伙房水库输水工程是大伙房水库输水一期工程,即将浑江流域调来的水由大伙房水库调节至辽宁省抚、沈、辽、鞍、营、盘等六城市输水的一项大型输水工程。本文研究输水隧洞在开挖中的问题,利用理论分析和对比分析等方法,对围岩等级、隧洞开挖等进行了重点说明;研究了正常地质段的施工以及不良地质段的施工措施,并对工程中遇到的问题进行了总结。

摘要：根据Gen Bank上公布的假单胞菌属的phb C基因设计引物。以假单胞菌UVCN18基因组DNA为模板,成功克隆了菌株假单胞菌UVCN18中的PHB聚合酶基因phb C。生物信息学方法分析表明,该基因全长1 704 bp,编码567个氨基酸。通过Blast P序列对比发现,该基因所表达的氨基酸属于PHA聚合酶家族。将获得的基因序列提交到Gen Bank,得到登录号为KT716020。采用MEGA5.1软件构建系统发育树,显示该基因编码的氨基酸序列与菌种恶臭假单胞菌所表达的氨基酸序列的同源性较高。同时构建工程菌大肠杆菌BL21-p ET-28a(+)-phb C,经IPTG诱导过量表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定结果与PHB聚合酶分子质量63 ku理论相符合,证明实现了异源蛋白表达。

摘要：筛选产β-葡萄糖苷酶的微生物及其在转化人参皂苷Rg3中的应用。kefir粒发酵人参后,采用改良七叶苷琼脂培养基筛选产β-葡萄糖苷酶的微生物,并结合菌落形态以及26S rDNA D1/D2区核酸序列鉴定。结果发现1株在七叶苷琼脂培养基上呈黑色水解斑的微生物,经分子生物学鉴定,该菌种为马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)。在单因素试验基础上,应用Box-Behnken设计原理,设计人参-水质量比、发酵时间、接种量3因素3水平响应面试验,优化马克斯克鲁维酵母发酵人参,转化人参皂苷Rg3的发酵条件,建立回归模型。优化后的发酵条件为人参-水质量比1∶2.65、接种量2.94%、发酵时间3 d,该条件下人参皂苷Rg3含量为3.31 mg/g,转化率为248%。该结论为全组分人参发酵食品工业化生产提供理论数据。

摘要：为进一步提高重组大肠杆菌(PUCRF)产β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-CGTase)的酶活力,以构建的一株能在胞外分泌表达β-CGTase工程菌*** PUCRF为出发菌株,利用响应面法对其发酵工艺条件进行优化。根据Box-Benhnken中心组合设计原理,在单因素试验基础上采用四因素三水平的响应面分析法确定重组大肠杆菌PUCRF最佳培养基组成(g/100mL)为:玉米淀粉0.962、玉米浆0.097、MgSO4.7H2O 0.153、K2HPO4.3H2O 1.235。经过优化,β-CGTase产量可达3610U/mL,是初始条件下β-CGTase酶活力(2690U/mL)的1.34倍。

摘要：以廉价的鲜豆渣为全组分探讨其生产纳豆激酶可行性,并与市售商品纳豆进行比较其活力。在单因素试验基础上,应用Box-Behnken中心组合设计原理,设计发酵温度、发酵时间及接种量三因素三水平响应面试验,建立回归模型。经响应面分析,回归模型具有较高拟合度。优化后的鲜豆渣固态发酵的工艺参数为:发酵温度36℃,发酵时间36 h,接种量8(mL/100 g),该条件下纳豆激酶酶活达到1 751.28 U/g。与商品化纳豆的纳豆激酶对比结果表明,除一个商品纳豆的纳豆激酶的活力与鲜豆渣发酵的纳豆激酶活力高以外,其余商品纳豆,同一品种的自制纳豆纳豆激酶的活力与鲜豆渣发酵的纳豆激酶活力无显著差异。全组分鲜豆渣作为纳豆激酶生产的原料,可以实现低成本、高品质产品开发。

摘要：优化豆渣为原料生产纳豆激酶的喷雾干燥工艺并探究纳豆激酶的稳定性。在单因素试验基础上,应用Box-Behnken中心组合设计原理,设计保护剂种类、进口温度、蠕动泵转速三因素三水平响应面试验,建立回归模型。通过响应面分析,回归模型具有较高的拟合度。优化后的喷雾干燥工艺参数:保护剂类别为海藻糖,进口温度152℃,蠕动泵转速378 mL/h,优化后纳豆激酶活性为236 278 FU/g。稳定性试验结果表明:在0℃、4℃、常温(18℃)、37℃的干燥保藏条件下,喷雾干燥后纳豆激酶活力均较为稳定,随着时间的增长,纳豆激酶活力逐渐降低,其中以海藻糖为保护剂的纳豆激酶稳定性最高。

摘要：采用乳酸菌表达系统进行绿色木霉纤维二糖水解酶基因cbhⅡ的表达研究。参照Gen Bank上发表的绿色木霉(Trichoderma viride)cbhⅡ基因(Gen Bank登录号:M55080)设计引物并通过聚合酶链式反应克隆获得其c DNA序列长1 441 bp。为了达到表达分泌该酶的目的,在其基因上游序列前添加了大小为80 bp的信号肽序列。进一步通过生物信息学方法将密码子按照乳酸菌的偏好性进行了优化,通过全基因合成获得了优化后的cbhⅡ基因。将该基因与穿梭表达载体p MG36e连接,构建原核表达载体p MG36e-S-cbhⅡ;利用电转化方法将其转入乳酸乳球菌NZ3900感受态细胞中构建重组乳酸菌,纯化的重组菌蛋白通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,得到一条约为53 k D的目的蛋白条带,与预期大小相符;利用3,5-二硝基水杨酸法测定培养基上清液中水解纤维素酶的活力达到16.7 U/m L,菌体裂解液上清液和菌体沉淀几乎没有酶活力。结果表明,纤维二糖水解酶基因信号肽序列被乳酸乳球菌正确识别,并成功实现了胞外表达。

摘要：以水为提取溶剂对荞麦壳黄酮的提取工艺进行了优化,同时考察了黄酮得率与抗氧化活性的相关性。基于Plackett-Burman试验设计考察了各因素对荞麦壳黄酮得率及DPPH自由基清除活性的影响。试验结果表明:以黄酮得率为响应值的模型不显著,提取次数和料液比对DPPH自由基清除活性的影响显著(P<0.05)。最佳提取条件:料液比(g∶m L)1∶20,80℃热水提取时间20 min,重复提取3次,黄酮得率最高,为1.273%,且抗氧化活性较强。荞麦壳黄酮得率与DPPH自由基清除活性具有一定的相关性,相关系数为0.650 4。

摘要：以乙醇为提取溶剂对荞麦壳黄酮的提取工艺进行优化,同时考察了黄酮得率与抗氧化活性的相关性。基于Plackett-Burman试验设计考察了各因素对荞麦壳黄酮得率、DPPH和ABTS自由基清除活性的影响。试验结果表明,提取次数是影响黄酮得率和抗氧化活性的显著因素(P<0.05),乙醇体积分数对3个响应值均无显著影响。最佳提取条件为乙醇体积分数30%,料液比(g∶m L)1∶20,提取时间10 min,提取3次,在此条件下荞麦壳的黄酮类化合物的得率为2.381%,且抗氧化活性较强。荞麦壳黄酮得率和抗氧化活性的相关性分析结果表明,荞麦壳对ABTS自由基及DPPH自由基的清除活性均与黄酮得率呈正相关,DPPH自由基的清除活性与黄酮得率相关度高,相关系数为0.703。